基于蛋白沉淀光谱分析的核桃涩味评价技术研究

【目的】建立核桃内种皮涩味综合评价体系,为鲜食核桃品种选育提供理论依据。【方法】选用涩味差异明显的6个核桃品种(系),通过感官评价、内种皮水浸法和蛋白质化学沉淀法相结合的评价方式,初步建立核桃内种皮涩味综合评价技术体系。【结果】6个品种(系)的直接口感涩味值为5.83~9.27,分为差异显著的3类。水浸出物浓度为10 mg/mL时,依据水浸出物涩味值‘汾核4号’和‘ND-2’为一类,其余4个品种(系)各为一类。内种皮提取液浓度为20μl/mL时,蛋白沉淀在222 nm波长下吸光值差异最大,可将6个品种(系)分为差异显著的4类。内种皮化学沉淀吸光值与直接口感涩味值的相关系数为0.96,内种皮化学沉淀吸光值与10 mg/mL内种皮水浸出物涩味值相关系数为0.97,均呈极显著正相关。【结论】核桃内种皮提取液浓度为20μl/mL,222 nm波长条件下,通过蛋白质沉淀全光谱扫描,结合感官评价,可对核桃内种皮涩味进行有效评价。

蛋白质交联-絮凝沉淀法筛选产转谷氨酰胺酶放线菌株的效果分析

为寻找一种廉价、快捷的方法选育转谷氨酰胺酶(MTG)菌株,采用平板稀释法分离土壤放线菌,根据转谷氨酰胺酶催化反应结果的特性,设计了一种蛋白质交联—絮凝沉淀性能测定方法对分离菌株进行复筛,用比色法测定MTG酶活,并用插片法进行复筛菌株的初步鉴定。结果表明:从土壤中分离出16株放线菌,经复筛后有6株放线菌产生沉淀,即具有MTG酶活性,且其中LH-011的MTG酶活最大,达0.76u·mL-1。经初步鉴定,6株放线菌均属于放线菌科链霉属。可见,用蛋白交联—絮凝沉淀性能测定的方法可以筛选出产MTG菌株。

微囊藻毒素-LR致小鼠肝、肾和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨微囊藻毒素-LR所致小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联(DPC)作用。方法以昆明种雄性小鼠为实验对象,腹腔注射染毒,采用KCl-SDS沉淀法检测小鼠肝、肾、睾丸细胞中交联DNA和游离DNA的量,计算其DPC系数,DPC系数=交联DNA/(交联DNA+游离DNA),判断DNA与蛋白质的交联程度。结果在小鼠肝细胞中,微囊藻毒素-LR各染毒组DPC数量均有显著增加,其DPC系数与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。在小鼠肾细胞中,微囊藻毒素-LR染毒剂量为3μg/kgbw和6μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05);染毒剂量为12μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。在小鼠睾丸细胞中,染毒剂量为3μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。染毒剂量为6μg/kgbw和12μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论在一定的染毒剂量下,微囊藻毒素-LR可以引起小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联。

高脂血症大鼠血清中硒化合物的形态分析

目的通过检测高脂血症(HLP)大鼠用药前后血浆中硒代甲硫氨酸(SeMet)、硒代半胱氨酸(SeCys)、亚硒酸盐(Se(IV))、硒酸盐(Se(VI))和甲基硒代半胱氨酸(SeMe Cys)不同形态的硒化合物,确定高脂血症与不同形态硒化合物的相关性。方法通过蛋白质沉淀和酶水解方法分别从血清样品中提取分析物。采用HPLC-ICP/MS方法,同时测定大鼠血浆样品中的硒化合物,包括硒代甲硫氨酸(SeMet)、硒代半胱氨酸(SeCys)、四价亚硒酸盐(Se (IV))、六价亚硒酸盐(Se(VI))和甲基硒代半胱氨酸(SeMe Cys)。结果采用沉淀蛋白法处理样品,可以检测到Se(IV),采用酶水解法可以检测到SeCys。高脂血症组与正常对照组相比,大鼠血清中Se(IV)与SeCys含量有明显降低,高脂血症组大鼠用西药阿托伐他汀钙片以及中药绞股蓝总苷治疗四周后,血脂水平降低,Se(IV)与SeCys均有不同程度的恢复。结论该方法证明了HLP大鼠血清中硒化合物的变化,Se(IV)与SeCys可以作为临床监测高脂血症的重要的指标化合物。

4种方法快速检测病死猪肉的对比试验

随着我国养猪业的快速发展,猪的疫病种类不断增加,使得社会上私自收购屠宰病死猪、病死猪肉逃避检疫进入市场的情况时有发生,同时由于人们生活质量的提高,对肉品卫生和质量的要求越来越高,因此对于市场上病死猪肉的检验和鉴定日益受到广泛的关注[1]。

谷氨酰胺转氨酶菌株的筛选及其产酶条件研究

利用蛋白质交联-絮凝沉淀性能测定方法,从土壤中分离得到1株高产谷氨酰胺转氨酶(microbial transglutaminase,MTG)的菌株,命名为HF-82,初步确定为链霉菌属。单因素试验确定最适产酶氮源和碳源分别是蛋白胨和葡萄糖,正交试验确定最适发酵培养基为(g/L):葡萄糖25.0,蛋白胨20.0,酵母提取物5.0,Mg SO4·7 H2O 2.0,K2HPO4·3 H2O 2.0,Na H2PO42.0,Ca CO33.0,p H7.0。此发酵工艺条件下,MTG的酶活可达到0.53 U/m L。