昆虫淀粉酶蛋白质类抑制剂研究进展

近年来,昆虫淀粉酶蛋白质类抑制剂成为一个新的研究热点,取得了令人瞩目的成果。综述了昆虫淀粉酶蛋白质类抑制剂研究的最新进展。对昆虫淀粉酶蛋白质类抑制剂的分布、分离纯化、活性测定、物理化学特性和抑制特性以及结构与功能的关系等作了概述,并对其应用前景作了展望。

野生苋属植物籽实中新型α淀粉酶抑制剂的分离纯化及其性质研究(英文)

从野生苋属植物 (Amaranthuspaniculatus)籽实中分离纯化出α淀粉酶的一种新型蛋白质类抑制剂 .该抑制剂被命名为WAI 1 .MALDI TOF质谱测得其分子量为 986 5 ,是目前报道的α 淀粉酶的蛋白质类抑制剂中分子量最小的 .初步的组成和结构分析结果表明 ,WAI 1由 9个氨基酸残基组成 ,其N端为焦谷氨酸 .直接用RP HPLC纯化后 ,WAI 1能在弱酸性条件下 ,以非竞争性抑制作用方式有效抑制美洲蜚蠊消化道α淀粉酶的活性 ,最适抑制pH 6 0 ,但对人唾液淀粉酶活性无影响 .WAI 1在 37℃下与酶预温浴约 30min后显示最大抑制活性 .当α淀粉酶用量一定时 ,α淀粉酶活性的抑制率在约 5 0 %的范围内随抑制剂 酶比例的增大而呈线性增加 ,超过 5 0 %后 ,抑制率随抑制剂 酶比例的增大而缓慢上升 ,最终达到最大值 (约 6 5 % ) .

豆科植物籽实中的昆虫消化道α－淀粉酶抑制剂的研究（Ⅱ）

对５个不同品种菜豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓｖｕｌｇａｌｒｉｕｓＬ．）中的蜚蠊（Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａ）消化道α－淀粉酶抑制剂作了比较研究．发现它们都能在酸性ｐＨ条件下有效地发挥抑制作用，且最适抑制ｐＨ均在５．５０左右；但它们的热稳定性、最大抑制活性及发挥最大抑制活性所需的预温时间等不尽相同。

视网膜新生血管中受体酪氨酸激酶及其抑制剂的开发利用

目的:视网膜血管性疾病的发生是多生长因子相互作用的结果,细胞内的酪氨酸激酶级联反应可调控基因表达、调节细胞的有丝分裂和增殖分化。为此本文就视网膜血管性疾病与受体酪氨酸激酶进行综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED 1997-01/2006-05期间的相关文章,检索词为“retina,neovascularization,growthfactor,receptor,inhibitor,receptor tyrosine kinase”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库2000-01/2006-05期间的相关文章,检索词为“视网膜,新生血管,受体酪氨酸激酶,信号传导,生长因子,抑制剂”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与视网膜血管性疾病或受体酪氨酸激酶相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到198篇相关文献,31篇文献符合纳入标准,排除的167篇文献为内容陈旧或重复。符合纳入标准的31篇文献中,2篇涉及视网膜新生血管与酪氨酸激酶的相关性,2篇涉及酪氨酸激酶信号传导途径,15篇涉及视网膜血管性疾病中生长因子及其受体的表达,14篇涉及视网膜新生血管与生长因子间的相互作用及酪氨酸激酶抑制剂的研究。资料综合:在视网膜血管性疾病中,视网膜中表达多种血管生长因子及酪氨酸激酶受体,通过细胞内的受体酪氨酸激酶的信号传导途径,调控基因表达、调节细胞的有丝分裂和增殖分化,从而参与视网膜新生血管的生成。从阻断多种生长因子的酪氨酸激酶信号传导途径着手,开发了一系列酪氨酸激酶抑制剂。结论:对受体酪氨酸激酶信号传导机制的深入研究及开发利用受体酪氨酸激酶抑制剂,将为视网膜新生血管疾病的治疗提供一种新的、安全、有效的途径。

ER+乳腺癌中CDK4/6抑制剂疗效预测生物标志物的研究进展

细胞周期失调是肿瘤的基本特征。目前,新型细胞周期依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6)高度选择性抑制剂已被FDA批准联合内分泌治疗用于雌激素受体(estrogen receptor,ER)阳性、人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阴性乳腺癌患者的治疗。随着CDK4/6抑制剂应用的推广,研究者发现其并非对所有ER+乳腺癌患者有效,缺乏可靠的生物标志物以预测疗效或筛选患者群体是限制其临床应用的主要挑战。随着二代测序技术的进步,通过组学信息预测治疗策略的敏感性和实现个体化治疗对减轻患者负担和提高治疗效率具有重要意义。本文回顾近期对CDK4/6抑制剂生物标志物的研究,旨在为今后的深入研究提供思路,也为CDK4/6抑制剂的临床应用提供参考。

热休克蛋白90抑制剂治疗新生血管性眼病的研究现状

热休克蛋白90（HSP90）作为一种广泛存在的分子伴侣，在新生血管性疾病的发生发展中起重要作用。HSP90抑制剂能抑制HSP90活性，引起与细胞增生、细胞周期调节、细胞凋亡有关的重要信号蛋白选择性降解，并通过与磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶B和类风湿性关节炎因子／蛋氨酸脑啡肽／促分裂原活化蛋白激酶等信号通路中的多种HSP90客户蛋白分子相互作用，降低血管生成因子的表达，从而抑制血管内皮细胞的增生和存活。研发特异性的HSP90抑制剂药物已经成为治疗肿瘤及相关新生血管性疾病的新选择。其可能成为治疗新生血管性眼病的全新靶点。

Survivin拮抗肽的筛选及鉴定

目的:筛选能与Survivin相结合的多肽,从中寻找拮抗剂,抑制Survivin的作用。方法:通过筛选噬菌体12肽库得到与Survivin相结合的多肽,以固相法合成这些多肽并用质谱仪进行鉴定;利用Wwestern blot和caspase-3活性检测从中筛选拮抗Survivin表达和功能的多肽。结果:用Survivin蛋白筛选噬菌体肽库,得到8条结合多肽;经体外实验验证,8条肽抑制Survivin蛋白的活性不一,其中3条有显著活性(P<0.05);而且这3条多肽能够增强caspase-3的活性。结论:以噬菌体随机肽库法筛选获得了有抑制Survivin功能的拮抗肽,此结果为抗肿瘤肽类药物的研制奠定了基础。

PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235在肾癌治疗中的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白（PI3 K/Akt/mTOR）信号通路是细胞内重要的信号转导通路之一,这条信号通路的过度激活是肾癌发生、发展的重要原因之一.近年来,由于肾癌发病率不断增高,且对放疗和化疗不敏感,PI3K/Akt/mTOR抑制剂已成为抗肿瘤药物研发的热点之一.NVP-BEZ235因其能有效并且特异性地双重抑制PI3K/mTOR信号通路而倍受关注.本文就PI3 K/Akt/mTOR信号通路及NVP-BEZ235对肾癌的治疗作用机制进行综述.

拉帕替尼联合紫杉醇对HER2阳性晚期胃癌患者恶性分子、免疫功能及预后的影响

目的探讨拉帕替尼联合紫杉醇对人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性的晚期胃癌患者恶性分子、免疫功能及预后的影响。方法选取术后病理组织显示为HER2阳性的患者30例,根据入院时间偶数日期为拉帕替尼联合紫杉醇组,奇数日期为紫杉醇组,各15例。紫杉醇组仅给予紫杉醇(135~200 mg/m2,连续治疗3 d,间隔35 d),拉帕替尼联合紫杉醇组给予紫杉醇(135~175 mg/m2,连续治疗3d,间隔35 d)联用拉帕替尼(1 250 mg/m2,连续14 d)。比较两组患者的周期数。检测并比较治疗前、后两组恶性分子水平[成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF-2)、FGF-19、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)和成纤维细胞生长因子受体4(fibroblast growth factor receptor 4,FGFR-4)]和免疫细胞水平[外周血细胞分化抗原(cell differentiation antigen,CD)3^+、CD4^+、CD8^+和CD4^+/CD8^+]。随访3年,比较两组生存情况。结果拉帕替尼联合紫杉醇组治疗周期数少于紫杉醇组[(3.12±0.58)vs(4.23±1.02),P<0.05],但两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与紫杉醇组比较,拉帕替尼联合紫杉醇组治疗后血清恶性分子水平下降更明显,而T淋巴细胞水平升高更明显,两组比较差异均具有统计学意义(均P<0.05)。与紫杉醇组比较,拉帕替尼联合紫杉醇组3年生存率更高(46.7%vs 30.0%),但两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论拉帕替尼联合紫杉醇可降低HER2阳性的晚期胃癌患者恶性分子水平,改善其免疫功能,有改善预后的趋势,安全性好。

IBI302对实验性脉络膜新生血管的干预作用及机制研究

目的观察探讨IB1302对实验性脉络膜新生血管（CNV）的干预作用及其机制。方法采用酶联免疫吸附测定法观察IB1302与血管内皮生长因子（VEGF）-A165、VEGF-A12，和胎盘生长因子（P1GF）3种VEGF家族细胞因子和C3b、C4b两种补体蛋白的亲和力。采用人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）增生、迁移和管腔形成实验观察IB1302的抗VEGF活性。采用补体经典途径和旁路途径介导溶血实验观察IBI302的抗补体活性。采用激光诱导恒河猴CNV模型。分为CNV模型对照组、贝伐珠单抗注射组以及IB13020．25、0．50、1．25mg干预组。于给药后14、28d，荧光素眼底血管造影及光相干断层扫描检查观察各组恒河猴CNV荧光素渗漏面积及视网膜厚度变化。给药后29d，对比分析各组恒河猴房水中VEGF水平。结果IBI302与VEGF-A。e5、VEGF_A12。、P1GF以及C3b、C4b均具有较高亲和力。IBI302能明显抑制VEGF诱导的HUVEC增生、迁移和管腔形成。IBI302可抑制补体经典途径介导的绵羊红细胞溶血以及补体旁路途径介导的兔红细胞溶血。给药后14、28d，IBI3020．25、0．50、1．25mg干预组恒河猴CNV渗漏面积明显减小；3组之间荧光素渗漏面积比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。贝伐珠单抗注射组恒河猴CNV荧光素渗漏面积也明显减小，其荧光素渗漏面积减小率较IB1302各浓度干预组偏小，但差异无统计学意义（P〉0．05）。给药后14、28d，IB13020．25、0．50、1．25mg干预组恒河猴视网膜厚度均明显下降；3组之间视网膜厚度比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。贝伐珠单抗注射组恒河猴视网膜厚度也明显下降，其视网膜厚度下降率较IB1302各浓度干预组偏小，差异有统计学意义（P〈0．05）。给药后29d，CNV模型对照组、贝伐珠单抗注射组恒河猴房水VEGF浓度分别为（94．203±17.360）、（38．644±6．521）pg／ml；贝伐珠单抗注射组恒河猴房水VEGF浓度较CNV模型对照组明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。IB1302各浓度干预组恒河猴房水VEGF浓度均低于定量下限31．300pg／ml。结论IB1302能抑制实验性CNV，其机制与双重阻断VEGF和补体生物活性有关。

HSP_70与p57^kip2在骨巨细胞瘤中的表达及意义

目的探讨骨巨细胞瘤中HSP_70和p57^kip2皿的表达与其Enneking外科分期及预后的关系。方法应用免疫组化S-P法检测30例骨巨细胞瘤石蜡切片中HSP_70与p57^kip2的表达，并与13例骨软骨瘤作对比。结果随着骨巨细胞瘤Enneking分期的升高，HSP_70的表达强度增加，而p57^kip2的表达强度减弱。1-3期骨巨细胞瘤的HSP_70阳性率分别为22．2％、88．9％、100％，1～3期骨巨细胞瘤的p57^kip2弘阳性率分别为88．9％、88．9％、33．3％。HSP_70与p57^kip2表达存在负相关（r=-0．54，P〈0．01）。HSP_70在侵袭性强的骨巨细胞瘤中高表达，p57^kip2在侵袭性弱的骨巨细胞瘤中高表达。结论HSP_70与p57^kip2与骨巨细胞瘤的发生、发展有关，可为其外科分期和预后判断的提供一定的辅助参考。

COX-2及survivin在涎腺腺样囊性癌中的表达研究

目的:研究COX-2与Survivin基因在腺样囊性癌中的表达及其与肿瘤发生发展的关系。方法:采用免疫组化检测30例腺样囊性癌及20例正常涎腺组织中COX-2与Survivin蛋白的表达情况。结果:腺样囊性癌中COX-2及Sur-vivin的表达阳性性率分别为66.6%及86.6%,表达量随级别的增高而增加(P<0.05)。结论:COX-2与Survivin基因与腺样囊性癌的发生及恶变关系密切。