银杏叶提取物对光损伤后视网膜色素上皮细胞蛋白质表达的影响

目的 观察中药银杏叶提取物对光损伤后视网膜色素上皮（RPE）细胞蛋白质表达的影响，探讨银杏叶提取物保护RPE光损伤的分子机制。方法生长良好的人RPE细胞（ARPE-19）融合生长到80％时，随机分为正常对照组、光损伤组和银杏叶提取物处理组。运用冷白光以（2200±300）lx光照ARPE19，建立光损伤模型；以100μg／ml的银杏叶提取物（EGb761）处理光损伤的RPE细胞。提取细胞可溶性蛋白，进行蛋白质双向电泳，ImageMaster凝胶软件分析差异蛋白质点，并选取表达差异蛋白进行质谱鉴定和生物信息学分析。结果蛋白图谱差异分析显示，光损伤组与正常对照组比较，差异蛋白质有33个，其中蛋白质表达下调10个，蛋白质表达上调23个；银杏叶提取物处理组与光损伤组差异蛋白质有25个，其中，蛋白质表达上调3个，蛋白质表达下调22个。银杏叶提取物处理组与正常对照组比较，差异蛋白质有11个，其中，蛋白质表达上调4个，蛋白质表达下调7个。差异蛋白质的质谱鉴定和生物信息分析，成功鉴定出16个蛋白，包括组织蛋白酶B、热休克蛋白、细胞色素c还原酶等。结论光损伤RPE细胞与银杏叶提取物处理后的光损伤RPE细胞及正常RPE细胞间的蛋白质表达有差异；银杏叶提取物光损伤保护作用涉及组织蛋白酶B、热休克蛋白、细胞色素C还原酶等多种蛋白。