两相体系分光光度法测定聚乙二醇化蛋白质混合物中游离聚乙二醇

建立了用硫氰酸铁胺 氯仿两相体系分光光度法测定游离聚乙二醇含量的方法。确定了最大吸收波长,考察了混合振荡时间、其他生物大分子存在对测定结果的影响,并与三硝基苯磺酸(TNBS法)进行了比较。

聚乙二醇化蛋白质和肽类复合物研究进展

近年来生物技术领域发展迅速,许多肽类和蛋白质类药物用于治疗包括癌症在内的多种疾病,取得了较好的疗效.但这些生物制品从血浆中的快速清除和可能的免疫原性限制了其应用.为解决这一问题,研究者将聚乙二醇(PEG)和右旋糖酐等一些高分子聚合物与蛋白质以共价键的方式结合后,得到蛋白质-聚合物复合体,可以使人或动物免疫系统对外来蛋白质的识别能力减弱,从而使蛋白质的清除和免疫原性减少.多数蛋白质-聚合物复合体仍然保留原来蛋白质的药理活性,有些略有降低.

聚乙二醇化蛋白类药物的药代动力学

聚乙二醇化蛋白质药物的研究开发是改善蛋白药物药代动力学、药效学、毒性和安全性的重要研究领域。本文通过文献资料分析聚乙二醇和聚乙二醇-蛋白质类药物与药代动力学(包括分布、代谢、消除)的关系,认识聚乙二醇化药物的药代动力学对聚乙二醇化蛋白质药物的有效性、毒性、安全性的影响。本文利用聚乙二醇化集落刺激因子长效制剂在比格犬的药代动力学与药效学和聚乙二醇化重组集成干扰素变异体在猕猴的药代动力学研究结果。

两步连续离子交换制备色谱分离纯化聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子

建立了两步连续离子交换制备色谱分离、纯化聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子 (Recombinanthumangranulocytestimulatingfactor,rhG_CSF)偶联物的方法。首先用阳离子交换色谱将偶联蛋白质和非偶联蛋白质分开 ,然后使用阴离子交换色谱去除过量的游离聚乙二醇杂质 ,并分离纯化偶联蛋白异构体分别得到单聚乙二醇化、双聚乙二醇化和三聚乙二醇化的rhG_CSF。它们经十二烷基磺酸钠_聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS_PAGE)分析均为单带。采用基质辅助激光解吸离子化_飞行时间质谱(MALDI_TOF)分析三种偶联蛋白质的分子量 ,分别为 2 3 8kD、2 8 6kD、33 8kD。用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,以粒细胞集落刺激因子的依赖细胞株NFS_6 0为靶细胞 ,测定重组人粒细胞集落刺激因子及其与聚乙二醇的偶联物的体外细胞生物学活性 ,单聚乙二醇化、双聚乙二醇化和三聚乙二醇化的rhG_CSF体外活性保留率分别为 92 %、75 %、4 3%。

PEGylation of Hirudin and Analysis of Its Antithrombin Activity in vitro

Hirudin 是在自然发现的大多数抗凝剂药，但是它的短浆液半衰期显著地禁止它的临床的申请。hirudin 的 PEGylation，最有希望的抗凝剂药，在这篇论文被执行。为 PEGylated hirudin 的最佳的反应条件被调查。PEGylation 反应什么时候在 10h 以后在 4 ° C 下面被进行，在在最适 PH 的硼酸盐缓冲区 8.5 与到 hirudin 的木钉的摩尔比率 250:1，更高的修正程度被完成。最后， PEGylated hirudin 的 bioactrvity 在 vitro 被测量。与未修改的 hirudin 相比， 26% 反凝血酵素活动被保留。