南瓜多糖特征官能团检测及其与抗蛋白质非酶糖基化关系的研究

目的检测南瓜多糖中特征官能团含量,考查特征官能团与其抗蛋白质非酶糖基化的关系。方法水提醇沉法提取南瓜粗多糖并分别以20%、40%和60%的乙醇分级醇沉为3种不同分子量的南瓜多糖,依次命名为PPⅠ、PPⅡ、PPⅢ。以苯酚硫酸法检测3种多糖中的糖含量;乙酰丙酮分光光度法检测氨基糖含量;硫酸咔唑法检测糖醛酸含量;硫酸钡比浊法检测硫酸基含量。根据线性相关分析法研究这些特征基团的含量与它们抗蛋白质非酶糖基化活性之间的关系。结果 PPⅠ、PPⅡ、PPⅢ的糖含量分别为92.62%、85.66%和79.60%;氨基糖含量分别为1.21%、1.95%和6.99%;糖醛酸含量分别为6.35%、4.64%和3.89%;3种多糖中均未检测到硫酸基的存在。南瓜多糖的抗糖基化活性与南瓜多糖的氨基糖含量呈正相关;与南瓜多糖的分子量及糖醛酸含量呈负相关。结论南瓜多糖中含有氨基糖和糖醛酸特征结构;南瓜多糖抗蛋白质非酶糖基化活性与其分子量、氨基糖及糖醛酸含量有关。

十两茶提取物对葡萄糖苷酶、蛋白质非酶糖基化及醛糖还原酶的体外抑制作用研究

目的研究湖南安化黑茶的主要品种十两茶水提物的体外降糖作用,初步探讨其作用机制。方法通过体外蛋白质非酶糖基化试验、葡萄糖苷酶试验、醛糖还原酶试验比较十两茶与其他茶类(茯砖茶-9、茯砖茶-11、红茶、绿茶)的体外降糖作用。结果 5种茶叶水提物在体外均能不同程度地抑制蛋白质非酶糖基化产物形成、葡萄糖苷酶以及醛糖还原酶活性,其中以十两茶作用为优。结论十两茶水提物对糖尿病相关酶具有抑制作用,具有一定的降糖和防止糖尿病并发症作用。

麦麸阿魏酸糖酯对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响

研究从小麦麸皮中提取的阿魏酸糖酯(FGs)对体外蛋白质非酶糖基化反应(NEG)的影响。将牛血清白蛋白和葡萄糖在体外共同孵育,建立蛋白质NEG体外体系;不同浓度的FGs分别与反应体系共孵育,以荧光分光光度法测定FGs对蛋白质非酶糖基化反应产物(AGEs)生成的影响;此外,采用铁氰化钾法检测FGs的总还原能力。结果显示,FGs呈剂量依赖方式抑制AGEs的形成,对蛋白质NEG抑制的IC50为0.0382 mmol/L;铁氰化钾法检测FGs的总还原能力,还原铁离子的IC50为0.0310 mmol/L,低于对照VC的0.042 0 mmol/L。FGs抑制蛋白质的非酶糖基化,可能与其强还原能力有关。

蛋白质非酶糖基化导致理化性状改变

目的 观察蛋白质糖基化后理化特性的改变。方法 牛血清白蛋白 (BSA)与葡萄糖在体外共同孵育后 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)及荧光分光光度计测定荧光值和扫描荧光光谱。结果 糖基化BSA荧光光谱改变 ,糖基化终产物 (AGEs)荧光值增加 ;单体BSA在PAGE上向正极泳动加速 ,SDS PAGE近负极段出现新的弥散带。结论 蛋白质非酶糖基化可导致棕色变、阴电荷增加、分子量增大、荧光光谱改变。

黄连多糖抗蛋白质非酶糖基化活性初步研究

初步研究了黄连多糖对体外蛋白质非酶糖基化过程的抑制作用。应用化学方法建立蛋白质非酶糖基化反应模型,以氨基胍为阳性对照,考察黄连多糖对蛋白质非酶糖基化过程中Amadori产物、二羰基化合物及蛋白质非酶糖基化终产物(AGEs)的生成这三个阶段的影响。实验结果表明,黄连多糖可以从糖基化反应的三个阶段来抑制AGEs的生成,在不同浓度下均具有很强的抑制作用,且对Amadori产物生成的抑制作用强于阳性对照氨基胍(p<0.05,n=3)。这提示黄连多糖可能为中药黄连中抑制糖尿病的活性物质。根据糖尿病并发症的产生机制,黄连多糖有可能成为价廉、无毒的糖尿病并发症抑制或治疗药物。

芝麻叶多酚的纯化及对蛋白质非酶糖基化的抑制作用

从D101、AB-8、NKA-9、S-8、ADS-5大孔吸附树脂中通过静态实验筛选出AB-8树脂,研究其对芝麻叶粗提物中多酚的静态吸附和解吸性能,并通过单因素实验确定AB-8树脂柱的最佳纯化工艺条件;然后,考察了芝麻叶多酚对体外蛋白质非酶糖基化终末产物(AGEs)生成的抑制作用。结果表明:AB-8大孔吸附树脂对芝麻叶多酚粗提物具有较好的分离纯化效果;AB-8树脂柱对芝麻叶多酚粗提物的最佳纯化条件为:上柱液体积12mL,上柱液浓度3.5mg/mL,pH5.0,洗脱体积为3BV(柱体积),依次以30%(v/v)和50%(v/v)乙醇溶液进行梯度洗脱,多酚纯度从16.88%分别提高到28.43%和45.71%,纯化产物分别命名为SPP1和SPP2。芝麻叶多酚粗提物、SPP1、SPP2对蛋白质非酶糖基化终产物的生成具有明显的抑制作用,抑制效果均优于阳性对照品氨基胍。

熊果酸对蛋白质体外非酶糖基化反应的影响

目的研究熊果酸(ursolic acid,UA)对体外蛋白质非酶糖基化反应的影响。方法采用L16(45)正交设计,以牛血清白蛋白(BSA)浓度,d-葡萄糖浓度和孵育时间3因素4水平正交试验,筛选出体外蛋白质非酶糖基化的最佳反应条件。并以此条件用荧光分光光度法观察UA对晚期糖基化终产物(advanced glycation endproducts,AGEs)形成的影响。同时,采用NBT法测定UA在体外对AGEs中间产物果糖胺(Amadori产物之一)形成的影响。结果正交试验结果显示,5g/LBSA,50mM d-葡萄糖及40d的孵育时间是蛋白质非酶糖基化反应的最佳条件,荧光分光光度法结果表明,UA(10、20、40μM)对AGEs的形成有明显的抑制作用(P<0.05or 0.01 vs模型组),且呈剂量依赖性。但UA在体外不能抑制果糖胺的形成。结论 UA可通过干扰早期糖基化产物-Amadori产物的深度糖基化来抑制AGEs形成,这可能是UA减轻糖尿病血管损伤的重要机制之一。

硫酸化修饰对霍山石斛多糖非酶糖基化活性的影响

文章采用定位保护羟基的方法对霍山石斛多糖(Dendrobium huoshanense polysaccharide,DHP)进行硫酸化修饰得到2种衍生物,分别为6-O-硫酸化霍山石斛多糖衍生物(6-O sulfated Dendrobium huoshanense polysaccharide derivatives,6-O-SDHPD)和2,2′,4-O-硫酸化霍山石斛多糖衍生物(2,2′,4-O sulfated Dendrobium huoshanense polysaccharide derivatives,2,2′,4-O-SDHPD)。该研究测定了2种衍生物的理化性质,并研究其对蛋白质非酶糖基化的干预作用。结果表明,6-O-SDHPD和2,2′,4-O-SDHPD硫酸基团取代度分别为0.813、0.647;碳水化合物的质量分数分别为45.43%、51.17%。抗蛋白质非酶糖基化活性研究表明,6-O-S DHPD和2,2′,4-O-SDHPD均可以从糖基化反应的3个阶段抑制糖基化产物的形成,尤其对糖基化初期Amadori产物的抑制效果最明显,分别达到了87.84%、84.93%。

不同品种马兰的活性组分及抑制蛋白糖基化功能

选取10个品种马兰(M1~M10)为研究对象,测定M1~M10的β-胡萝卜素、多酚、黄酮和皂苷的含量;并初步分析10个品种马兰抑制蛋白糖基化的活性及其与各功能成分之间的关系。结果表明:马兰中的活性成分含量较高,其中M2、M5的β-胡萝卜素含量最高;M3、M10的多酚和黄酮含量最多;M4、M6的皂苷含量最高。10个品种马兰粗提物具有良好的抑制蛋白糖基化效果,抑制率达到49%~71%。马兰对由甲基乙二醛(methylglyoxal,MGO)和乙二醛(glyoxal,GO)引发的蛋白质的非酶糖基化反应的抑制作用与其多酚含量和黄酮含量呈现一定的线性关系;而皂苷含量仅与对MGO引起的非酶糖基化反应的抑制作用呈现一定的线性关系。

马兰中酚类的分离纯化及其抑制蛋白糖基化的研究

采用大孔吸附树脂对马兰粗提物进行分离,得到4组含有多酚的洗脱组分(F1、F2、F3、F4)。用Sephadex LH-20色谱柱对F2进一步纯化,得到3,5-二咖啡酰奎宁酸和3,4,5-三咖啡酰奎宁酸。通过建立牛血清白蛋白-甲基乙二醛(bovine serum albumin-methylglyoxal,BSA-MGO)和牛血清白蛋白-乙二醛(bovine serum albuminglyoxal,BSA-GO)的蛋白质糖基化反应模型,分析各所得组分抑制蛋白质糖基化的能力。结果表明:多酚含量依次为F2>F1>F3>F4,马兰各组分对两种模型引起的蛋白质糖基化均具有良好的抑制效果。在BSA-GO的反应模型中,抑制蛋白质糖基化效果为3,5-二咖啡酰奎宁酸>F2>F3>F1>马兰粗提取物>F4,BSA-MGO的反应模型中,抑制蛋白质糖基化效果为3,5-二咖啡酰奎宁酸>F2>马兰粗提取物>F1>F4>F3,此结果与F2组分中分离得到的3,5-二咖啡酰奎宁酸具有良好的抑制效果一致。结论:马兰中分离得到的多酚类物质——3,5-二咖啡酰奎宁酸具有很强的抑制MGO/GO引发的蛋白糖基化功能。

苦瓜提取物抑制蛋白质的非酶糖基化

目的:研究苦瓜提取物对蛋白质非酶糖基化终末产物(AGE)生成的抑制作用。方法:体外蛋白质非酶糖基化反应系统中分别加入不同质量浓度的苦瓜提取物(0.01,0.1,1.0 g·L-1)或氨基胍(4 mmol·L-1),在不同时间分别测定蛋白质非酶糖化终末产物的生成量。制备糖尿病小鼠模型,以苦瓜提取物10,30 g·kg-1两个剂量连续ig 14 d,测定苦瓜提取物对糖尿病小鼠血糖以及心、肝、肾组织中AGE含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果:在体外系统中,蛋白糖化产物的生成与孵育时间呈正相关,苦瓜提取物浓度依赖性抑制蛋白糖化终末产物的生成(P<0.01)。动物实验表明苦瓜提取物能抑制血糖升高(P<0.05,P<0.01),改善糖尿病小鼠心、肝、肾组织中AGE含量(P<0.05,P<0.01)、升高SOD活性(P<0.05,P<0.01)和降低MDA含量(P<0.05,P<0.01),呈现剂量效果正相关。结论:苦瓜提取物体内体外均可有效抑制蛋白糖化终末产物的生成。

芒果苷抑制糖基化产物的生成及对血管内皮保护作用

目的探讨芒果苷对体外糖基化终产物生成的抑制作用,以及对血管内皮的保护作用。方法采用体外蛋白质非酶糖基化反应系统,分别加入不同浓度的芒果苷或阳性药氨基胍,孵育21 d后检测其荧光强度,研究其对蛋白质非酶糖基化是否有抑制作用。并利用大鼠离体胸主动脉舒张功能实验,研究芒果苷对棕榈酸诱导血管内皮舒张功能失调的改善作用。结果在体外蛋白质非酶糖基化反应系统中,芒果苷可浓度依赖性抑制蛋白糖基化终末产物的生成,不同浓度的芒果苷可以一定程度地预防棕榈酸对血管内皮的破坏作用。结论芒果苷对体外蛋白质非酶糖基化终末产物的生成有一定的抑制作用,并具有内皮保护功能。

抑制非酶糖基化食用菌的筛选及抑糖基化物质提取工艺优化

蛋白质非酶糖基化(non-enzymatic protein glycation,NEPG)是引起糖尿病并发症的主要因素之一,因此开发具有抑制非酶糖基化反应的天然活性物质对治疗糖尿病并发症有重大意义。本文以二甲双胍作为阳性对照,比较了灰树花Grifola frondosa、银耳Tremella fuciformis、黑木耳Auricularia heimuer、毛头鬼伞Coprinus comatus、猴头菇Hericium erinaceus、茯苓Wolfiporia cocos 6种食用菌水提物和醇提物在体外对蛋白质非酶糖基化反应抑制效果。结果表明,灰树花水提物对非酶糖基化反应有良好的抑制效果,食用菌醇提物对非酶糖基化没有抑制效果。利用二次正交旋转组合试验对抑制率最高的灰树花活性物质的提取条件进行了优化,确定了灰树花的最佳提取温度85℃,提取时间2.25h,料液比1:30,抑制率达到(96.28±0.16)%。灰树花水提物在预防糖尿病并发症方面有良好的应用前景。

化消饮对糖尿病大鼠血浆内皮素、胸主A胶原蛋白含量胶原蛋白AGEs荧光强度的影响

目的 :观察化消饮对DM大鼠血浆内皮素含量、胸主动脉胶原蛋白含量、胶原蛋白AGEs荧光强度的影响。方法 :采用 β -cytotoxins大鼠模型 ,将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、胰岛素组、化消饮低、中、高剂量 +胰岛素组 ,观察在胰岛素控制血糖基本一致的情况下 ,化消饮治疗 8周对DM大鼠血浆内皮素含量、胸主A胶原蛋白含量、胶原蛋白AGEs荧光强度的影响。结果 :与胰岛素组相比 ,化消饮低、中、高剂量+胰岛素组在降低血浆内皮素、胸主A胶原蛋白含量上均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;其作用明显优于胰岛素组 ,且以低剂量 +胰岛素为优组。与胰岛素组相比 ,化消饮各剂量 +胰岛素组虽能减弱AGEs荧光强度 ,但仅低剂量 +胰岛素组有显著性差异 (P <0 .0 5 )。

老年糖尿病患者的糖化血红蛋白水平观察

老年糖尿病患者的糖化血红蛋白水平观察３１５３００浙江省慈溪市中医院张振飞浙江省慈溪市人民医院康可上糖化血红蛋白（ＧＨｂ）是血红蛋白主体ＨｂＡ与糖类缩合的产物，它的合成过程持续于红细胞１２０天的生命期中，其含量与血液中血糖浓度密切相关，反映了红细胞半衰...

玉竹乙醇提取物和分离部位对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的探讨玉竹乙醇提取物和分离部位对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。方法单次ip链脲佐菌素(STZ)60mg/kg建立实验性糖尿病大鼠模型,分别ig给予玉竹乙醇提取物和三氯甲烷、正丁醇分离部位。给药80d后测定血清肌酐(Cr)、尿素(Ur)、糖化血红蛋白(GHb)、肾皮质蛋白质非酶糖基化终末产物(AGEs)、尿白蛋白(UAL)排泄率,并观察肾组织病理学改变。结果玉竹乙醇提取物和三氯甲烷分离部位降低糖尿病大鼠血中GHb水平和UAL排泄率,抑制肾皮质AGEs的形成,同时改善肾脏病理改变;正丁醇分离部位降低UAL排泄率。结论玉竹乙醇提取物和三氯甲烷分离部位对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制可能与抑制AGEs形成有关。

糖尿病视网膜病变发病机制的研究进展

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病的严重并发症之一,它的发生可能与蛋白质非酶促糖基化、蛋白激酶C(PKC)信号传导通路障碍、自由基形成与清除失调、细胞因子的作用、氧化-还原势能失衡、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的作用、多元醇通路代谢异常等多种因素有关。本文对近年来DR发病机制的研究进展做一综述。

糖基化终末产物抑制剂对糖尿病并发症的影响

蛋白质非酶糖基化是蛋白质等大分子中的游离氨基与还原糖经过一系列的反应形成稳定的非酶糖基化终末产物(AGEs)的过程。过多的AGEs积累会改变蛋白质生理功能和理化性质,诱导促炎介质的表达,并进行氧化应激反应,造成细胞损伤,进一步导致糖尿病及其并发症的发生。阻断AGEs的形成可改善和预防糖尿病慢性并发症,这也为临床治疗糖尿病并发症提供了新的方向。本文主要就AGEs的特点、AGEs与糖尿病并发症以及抑制AGEs对糖尿病并发症的作用进行综述,以期为临床治疗糖尿病并发症提供参考依据。

油橄榄叶抗糖尿病活性部位筛选

目的筛选油橄榄叶抗糖尿病活性部位。方法应用回流提取法和大孔吸附树脂技术,从油橄榄叶中提取6个部位(A～F)。对6个部位进行α-淀粉酶抑制实验、蛋白质非酶糖基化抑制实验和四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型实验,综合评价和筛选抗糖尿病活性部位。结果 C～F部位对α-淀粉酶、蛋白质非酶糖基化均显示明显的抑制活性,其中以D部位活性最强,且呈量效关系。C、D部位降血糖作用较明显,且以D部位活性最显著。结论油橄榄叶具有潜在抗糖尿病活性,其中D部位的活性尤为显著。