钙激活的氯通道gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达

目的:研究“钙激活的氯通道”成员之一gob-5和粘蛋白基因Muc5ac在小鼠哮喘模型肺部的表达。方法:22只清洁级BALB/c小鼠随机分成哮喘组和对照组,用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)和免疫组化法分别测定肺组织gob-5mRNA和粘蛋白基因Muc5ac蛋白的表达。结果:小鼠哮喘组肺组织gob-5mRNA表达阳性(0·2297±0·0186,A),而对照组未出现gob-5mRNA的表达(P<0·01);哮喘组Muc5ac蛋白表达(0·6637±0·0127,A)明显高于对照组(0·2060±0·0179,A)(P<0·01);哮喘组肺组织gob-5mRNA表达与Muc5ac蛋白表达呈直线正相关(r=0·864,P<0·05)。结论:Gob-5mRNA表达的上调可能在哮喘小鼠气道粘液过度分泌中起着关键作用;抑制gob-5的表达将为哮喘的治疗提供新的策略。

烟曲霉菌提取物对人支气管上皮细胞Muc5ac表达的影响

目的:探讨烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的黏液蛋白Muc5ac表达的影响及其可能机制。方法:分别应用不同浓度(0、8、16、20mg/L)的烟曲霉菌提取物(AFE)作用体外培养人支气管上皮细胞16HBE-14o不同的时间。实验还应用热处理的AFE(HT-AFE)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(抑肽酶)和蛋白激酶激活受体-2(PAR-2)阻断剂(FSLLRY-NH2)。应用细胞免疫组织化学和酶联免疫法(ELISA)检测细胞Muc5ac蛋白量,同时应用RT-PCR检测Muc5acmRNA的表达。结果:正常未给予AFE刺激培养条件下的对照组细胞仅表达少量Muc5ac,而给予不同浓度的AFE作用后,细胞合成和分泌Muc5ac的量明显高于对照组(P<0.01),并呈明显的时间和浓度依赖性。丝氨酸蛋白酶抑制剂和PAR-2特异性阻断剂可以明显抑制AFE的上述作用。另外,热处理的AFE蛋白酶活性完全灭活,不能促进细胞Muc5ac表达增加。结论:AFE依赖其蛋白酶活性激活受体PAR-2,促进呼吸道上皮细胞Muc5ac表达增加,使黏液分泌增加。