p27蛋白表达对精氨酸加压素介导心脏成纤维细胞增殖的影响

目的 :观察精氨酸加压素 (AVP)作用下 p2 7蛋白表达在心脏成纤维细胞 (CFs)中的变化 ,探讨 p2 7蛋白调控AVP促 CFs增殖的作用。方法 :以培养的新生 SD大鼠 CFs为实验动物模型 ,采用胰酶消化、差速贴壁法培养CFs,四氮唑盐 (MTT)比色法检测细胞增殖 ,碘化丙啶标记细胞 DNA ,p2 7蛋白的单抗和标记了 FITC的二抗标记细胞内的 p2 7蛋白 ,采用流式细胞分析仪技术测定细胞周期及 p2 7蛋白表达的阳性率。结果 :1随 AVP浓度的增加 ,MTT法测得的 CFs的 A值呈递增趋势 ,其中 10 - 7,10 - 6 m ol/ L AVP组分别为 0 .30 7± 0 .0 0 9,0 .337± 0 .0 0 7,均明显地高于对照组 (0 .2 98± 0 .0 0 9) ,并有统计学意义 (分别 P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ;2随 AVP浓度的增加 ,CFs的 S期细胞百分率和细胞增殖指数 (PI)逐渐增加 ,G0 / G1 期百分率下降 ,10 - 7,10 - 6 mol/ L AVP组与对照组比较差异非常显著 (P<0 .0 1) ;3CFs的 p2 7蛋白表达阳性率随 AVP浓度的增加而呈递减趋势 ,其中 10 - 7,10 - 6 m ol/ L AVP组 (分别为 71.6 %± 2 .2 % ,6 3.1%± 2 .3% )明显低于对照组 (86 .5 %± 2 .3% ) ,并有统计学意义 (P<0 .0 1)。结论 :p2 7蛋白是 AVP促 CFs增殖过程的重要负性调节因子 ,AVP通过下调 p2 7蛋白发挥促 CFs增殖作用 。

肝细胞肝癌组织中P27蛋白的表达及其意义

目的:探讨P27蛋白在肝细胞肝癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法:采用免疫组织化学S-P染色法检测33例肝细胞癌组织中P27蛋白表达;;并对阳性颗粒进行图像分析。结果:P27平均吸光度值(A)和肝细胞肝癌的恶性程度密切相关;;在高分化、无癌栓、直径<3cm的肝癌组织中;;平均A值明显高于中低分化、有癌栓直径>3cm的组织。结论:P27蛋白表达量的减少和肝细胞肝癌的恶性程度及侵袭性密切相关;;可作为一个新的预后指标。

p27kip1蛋白在卵巢上皮癌中的表达及其临床意义

目的 :研究p2 7kip1在卵巢上皮癌中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化SP法检测 2 0例卵巢良性、5 8例卵巢恶性上皮性肿瘤中p2 7kip1蛋白的表达。应用Kaplan Meier法及Cox比例风险回归模型 ,分析p2 7kip1蛋白表达与卵巢上皮癌患者预后的关系。结果 :(1)卵巢良性和恶性上皮性肿瘤中p2 7kip1蛋白表达阳性率分别为75 .0 % ,4 6 .6 % ,恶性肿瘤中p2 7kip1蛋白表达阳性率明显低于良性肿瘤 ,恶性肿瘤染色阳性部位以胞浆为主 ;(2 )p2 7kip1蛋白的表达与病理学分级有关 ,与年龄、临床分期、淋巴结转移、组织学亚型无关 ;(3)卵巢上皮癌中 ,p2 7kip1蛋白的表达与bax蛋白的表达呈正相关 ,与bcl 2蛋白的表达呈负相关 ,与ki6 7蛋白无明显相关性 ;(4)p2 7kip1蛋白表达是影响卵巢上皮癌患者预后的独立因素 ,阳性者预后较好。结论 :p2 7kip1蛋白可能与卵巢上皮癌的发生有关。p2 7kip1蛋白可作为判断患者预后的指标。

P21和P27蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的探讨P21和P27蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学方法检测10份正常卵巢组织、10份良性卵巢肿瘤以及30份恶性卵巢肿瘤组织中P21和P27蛋白的表达。结果正常卵巢组织、良性肿瘤组织P21、P27蛋白阳性表达率与卵巢癌组织比较,差异有显著性(P=0.014、0.004)。P21和P27蛋白在恶性卵巢肿瘤中的表达与临床分期有关(P=0.024、0.008),而与组织学类型、组织分化程度、有无腹水、淋巴结有无转移无关(P=0.067～0.562)。3种组织中P21和P27蛋白的表达呈正相关(P=0.039)。结论P21和P27蛋白表达异常可直接影响细胞周期转化,促进卵巢癌的发生。联合检测P21和P27蛋白对卵巢癌的预后评估和指导治疗有积极的意义。

结肠直肠癌P27^(kip1)蛋白的表达及临床意义

目的:探讨结肠直肠癌肿瘤组织中P27kip1蛋白的表达情况与预后关系。方法:通过免疫组织化学染色法检测2002年12月至2004年12月于本院接受治疗的212位结肠直肠癌病人肿瘤组织标本中P27kip1蛋白的表达,同时对其中接受根治术的202例病人进行随访,分析P27kip1蛋白的表达与病人性别、年龄、肿瘤生长部位、大小、病理类型、分期及根治性手术后肿瘤发生转移、复发的关系。结果:212例结肠直肠肿瘤组织中P27kip1蛋白染色阳性表达者131例,占61.8%。P27kip1蛋白阳性表达与肿瘤直径呈负相关(P=0.045);P27kip1蛋白阳性表达程度的高低与肿瘤复发率、死亡率呈负相关(P<0.001)。右半结肠癌的P27kip1蛋白阳性表达与肿瘤淋巴转移情况呈负相关(P=0.003)。但P27kip1蛋白表达与病人性别、年龄、肿瘤生长部位、病理类型、分期及有无转移均无显著相关性(P>0.05)。结论:结肠直肠癌肿瘤组织中P27kip1蛋白的表达情况可以评估结肠直肠癌手术治疗的预后情况,具重要的临床参考价值。

胃癌中p27、p53蛋白及TGF-βRⅡ的关系和预后意义

目的:探讨p27、p53蛋白及TβRⅡ在胃癌中的表达关系和预后意义。方法:用免疫组化法同步检测人胃癌组织中p27、p53、TβRⅡ 的表达。结果:62例胃癌中p27蛋白失表达率为58.1％,高于胃癌旁组织20.0％;p53和TβRⅡ阳性率在胃癌中分别为43.5％和17.7％,而癌旁组织分别为0和50％。p27阳性组的p53、TβRⅡ阳性率(分别为65.4％、31.0％)显著高于p27阴性组(P<0.05),p27与p53及TβRⅡ呈正相关;而p53与TβRⅡ差异无显著性(P>0.05)。Kaplan-Meier曲线显示p27、TβRⅡ阴性组及p53阳性组患者的预后较对照组差(P<0.05),Cox回归模型分析显示,p27与预后弱相关(P=0.0561),p53和TβRⅡ与预后密切相关(P<0.05)。结论:p27、p53、TβRⅡ相互作用,对胃癌发生发展起重要作用;p27和TβRⅡ表达愈强、p53表达愈弱,说明预后较好,反之则差。联合检测p27、p53、TβRⅡ,可辅助胃癌诊断、估计预后、选择治疗方案。

大肠癌p27^(kip1),Skp2蛋白表达及临床意义

为探讨p27kip1和Skp2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌之间的表达差异及其表达与大肠癌临床病理特征的关系,笔者采用免疫组化S-P法检测15例正常大肠黏膜、15例大肠腺瘤、50例结直肠癌组织中p27kip1和Skp2的表达情况。结果示,(1)p27kip1在大肠癌组织中的表达明显低于大肠黏膜、大肠腺瘤组(P<0.05),在各病理分化程度的大肠癌组织中表达无明显差异(P>0.05),在有淋巴结转移的大肠癌组织中p27kip1表达明显低于无淋巴结转移组(P<0.05),DukesC,D期大肠癌组织中p27kip1表达明显低于DukesA,B期大肠癌组织(P<0.05);(2)Skp2在大肠癌组织中的表达明显高于正常大肠黏膜、大肠腺瘤组(P<0.05),在低分化大肠癌组织中的表达明显高于高分化大肠癌组织(P<0.05),在有无淋巴结转移大肠癌组织中,在DukesA,B期及C,D期大肠癌组织表达均无明显差异(P>0.05);(3)在大肠癌中p27kip1与Skp2表达呈显著负相关(r=-0.470,P<0.01)。提示(1)p27kip1的低表达与大肠癌淋巴结转移、Dukes分期有关,p27kip1低表达可能合并淋巴结转移或高Dukes分期。(2)在大肠癌组织中Skp2与p27kip1的表达呈负相关。

IL-1β对鼠心肌成纤维细胞增殖和p27蛋白表达的影响

目的 :观察 IL - 1β对基础状态及精氨酸加压素 (AVP)诱导心肌成纤维细胞 (CFs)增殖和 p2 7蛋白表达的影响。方法 :采用胰酶消化 ,差速贴壁法培养 CFs,四氮唑盐 (MTT)比色法检测细胞增殖 ,碘化丙啶 (PI)标记细胞DNA,间接免疫组化染色标记细胞内的 p2 7蛋白 ,用流式细胞分析仪 (FCM)技术测定细胞周期和 p2 7蛋白表达的阳性率。结果 :11× 10 - 7mol/ L AVP组 MTT法测定的 CFs的吸收 (A)值 (0 .386± 0 .0 11)较基础状态 (0 .32 4± 0 .0 0 7)明显升高 (P<0 .0 1) ;1× 10 5 U/ L IL - 1β单独作用组 (0 .2 98± 0 .0 30 )和 AVP+IL - 1β组 (0 .332± 0 .0 41)的 A值均分别较基础状态和 AVP组显著降低 (均 P<0 .0 1) ;2 IL- 1β组和 AVP+IL- 1β组 CFs的 S期细胞百分率和细胞增殖指数 (PI)分别较基础状态组和 AVP组明显降低 ,而 G0 / G1 期细胞百分率则分别高于上述两组 (均 P<0 .0 1) ;3IL- 1β组和 AVP+IL- 1β组 CFs的 p2 7蛋白表达阳性率分别为 (95 .0 3± 1.0 2 ) % ,(88.2 3± 2 .87) % ,分别高于基础状态 (78.45± 1.91) %和 AVP组 (6 3.30± 1.85 ) % ,并且有统计学意义 (均 P<0 .0 1)。结论 :IL - 1β通过升高细胞内 p2 7蛋白表达水平参与 CFs增殖的负调控过程。

P27蛋白表达与肝癌术后复发的关系研究

目的 探讨P2 7蛋白表达与肝癌术后复发的关系。方法 用免疫组化S -P法检测 10例正常肝组织和 86例肝细胞癌及其癌旁肝组织中P2 7蛋白的表达情况 ,并结合各临床因素和随访资料进行分析。结果 ①肝细胞癌标本中P2 7蛋白阳性率为 3 7.2 % (3 2 / 86) ,明显低于正常肝组织 (80 % ,8/ 10 )和癌旁肝组织 (80 .2 % ,69/ 86)。②在肿瘤直径≤5cm、高分化和无门静脉侵犯或转移组的肝癌中P2 7蛋白的阳性率明显高于肿瘤直径 >5cm、低分化和有门静脉侵犯或转移组。③Cox比例风险模型多因素分析发现P2 7蛋白是一种保护因素 ,可减低肝癌术后复发的危险度。④Kaplan -Meier生存分析发现 ,P2 7蛋白阴性组肝癌术后无复发生存时间明显短于P2 7蛋白阳性组。结论 P2 7蛋白的表达与肝癌的术后复发有密切关系 ,其可成为预测肝癌术后复发的指标之一。

p27蛋白和增殖细胞核抗原在上颌窦鳞癌中的表达

目的:探讨p2 7蛋白和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在上颌窦鳞癌中的表达及其与上颌窦鳞癌发生发展的关系。方法:应用免疫组化SABC法检测35例上颌窦鳞癌和15例鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的p2 7蛋白和PCNA表达。结果:p2 7蛋白及PCNA染色阳性细胞均为细胞核着色。其中上颌窦鳞癌的p2 7蛋白阳性率为2 5 .71% ,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的阳性率为73.3%。二者差异有高度显著性(P <0 .0 1)。但鳞癌各组间经统计学检验差异无显著性。上颌窦鳞癌PCNA指数为86 .94±9.83,鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的PCNA指数为4 6 .14±2 .6 6 ,二者差异有高度显著性(P<0 .0 0 1)。随上颌窦鳞癌分化程度的降低,PCNA指数增加,不同分化间PCNA指数差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论:检测上颌窦鳞癌组织中p2 7蛋白和PCNA的表达能够快速、准确地反映肿瘤细胞的增殖状态和评价预后,对判定上颌窦鳞癌的恶性程度及指导治疗有一定的意义。

p27蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的 :探讨p2 7在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化S -P法测定 16份正常子宫内膜、18份子宫内膜不典型增生及 50份子宫内膜癌组织中的p2 7蛋白表达。结果 :p2 7蛋白在子宫内膜癌、子宫内膜不典型增生及正常子宫内膜中的表达率分别为 34%、6 6 .6 7%和 93.75% ,正常子宫内膜及不典型增生组均显著高于子宫内膜癌组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5)。p2 7蛋白表达与子宫内膜癌组织学分级、肌层浸润程度及患者预后显著相关 (P <0 .0 5) ,但与临床分期无关。结论 :p2 7蛋白表达下降或缺失可能在子宫内膜癌的发生、发展中起重要作用 。

p27蛋白在食管鳞癌中的表达及其意义

目的:探讨食管鳞癌中p27蛋白的表达及其临床意义?方法:应用免疫组织化学S-P法检测12例正常食管上皮及62例食管鳞癌组织标本中p27的表达水平?结果:①正常食管上皮组织中p27的表达阳性率为100%,食管鳞癌组织中p27的表达阳性率为67.7%,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05);②p27的表达与性别?年龄?肿瘤长径?淋巴结转移?远处转移无相关性(P>0.05),与食管壁浸润程度?pTNM分期及肿瘤分化程度呈负相关(P<0.05);③高表达组患者的术后3年生存率明显高于低表达组,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)?结论:p27表达下调是食管鳞癌癌变过程中的早期事件,其表达率与反映食管癌恶性度的临床病理参数呈负相关关系,p27对预后的评价意义有待进一步研究?

细胞周期抑制蛋白P16、P27表达与垂体腺瘤PCNA的关系

目的探讨P27、P16与增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测43例侵袭性垂体腺瘤和37例非侵袭性腺瘤的P16、P27和PCNA蛋白表达水平,分析P16、P27与PCNA蛋白表达水平之间的相关性。结果垂体侵袭腺瘤P16、P27蛋白表达较非侵袭组显著性减低,差异有统计学意义;复发组P16蛋白表达阳性率与非复发组之间,差异无统计学意义;P27蛋白表达在非复发组减低,差异有统计学意义。三者的表达水平具有相关性。结论P16、P27蛋白表达异常与侵袭性垂体腺瘤的PCNA有关。

胃癌中Cks1、P27^(Kip1)、Skp2蛋白表达相关性及其意义

目的:探讨Cks1在胃癌发生及Skp2调节P27Kip1降解过程中的作用。方法:应用流式细胞术检测正常胃黏膜、胃不典型增生组织及胃癌组织中Cks1、P27Kip1、Skp2蛋白的表达。结果:由正常胃黏膜、胃不典型增生组织到胃癌中Cks1、Skp2的表达均呈上升趋势(P<0.05),P27Kip1表达则呈下降趋势(P<0.05)。胃癌中Cks1、Skp2表达均与P27Kip1表达呈负相关(r=-0.649,P<0.05;r=-0.732,P<0.05);而Cks1蛋白表达与Skp2蛋白无相关性(P>0.05)。胃癌中Cks1表达与肿瘤分化程度相关(P<0.05),而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期不相关(P>0.05)。结论:Cks1可能参与胃癌的发生;胃癌中Cks1可能参与Skp2调节P27Kip1泛素化的降解过程。

子宫内膜癌组织P27蛋白的表达及其临床意义

目的探讨子宫内膜癌中P27蛋白的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测42例子宫内膜癌中P27蛋白的表达,并与正常子宫内膜和增生内膜进行了对比。结果子宫内膜癌中P27蛋白胞核高表达率为21.4%,明显低于正常子宫内膜和增生子宫内膜,差异有显著性(2χ=5.470、12.306,P<0.05);P27蛋白胞核表达与组织学分级有关,分化差者P27蛋白胞核表达率低(2χ=12.715,P<0.01);内膜癌中P27蛋白胞浆表达阳性率为47.6%,明显高于正常子宫内膜和增生内膜(H=57.656,P<0.01)。结论P27蛋白胞核表达缺失与子宫内膜癌的发生发展及恶性程度的增高有关;P27蛋白胞核定位缺失与其功能丧失有关。

胃癌组织Skp2表达的意义及与p27表达的关系

目的探讨人胃癌S期激酶相关蛋白2(S-phase k inase-assoc iated prote in 2,Skp2)表达的意义及与p27表达的关系。方法采用免疫组化方法检测138例原发性胃癌,配对癌旁胃黏膜,102例配对淋巴结转移胃癌组织,30例非典型增生,30例肠上皮化生(肠化),10例慢性浅表性胃炎和5例正常胃黏膜Skp2的表达及138例原发性胃癌p27的表达。结果Skp2表达的阳性率(%),肠化(12.68±0.86)及癌旁胃黏膜(19.32±1.22)均明显高于慢性浅表性胃炎(0.53±0.13)及正常胃黏膜(0.47±0.19)(P=0.000),后两者差异无显著性(P=0.716);非典型增生(16.74±0.82)明显高于肠化(P=0.000);原发性胃癌(31.34±2.17)明显高于非典型增生及癌旁胃黏膜(P值均=0.000);淋巴结转移胃癌组织(39.76±2.00)明显高于原发性胃癌(P=0.037)。胃癌Skp2的阳性率与分化程度(rho=0.315,P=0.000)、脉管内瘤栓(rho=0.303,P=0.000)及淋巴结转移(rho=0.254,P=0.000)呈正相关。胃癌Skp2表达与靶蛋白p27表达呈负相关(rho=-0.451,P=0.000)。结论Skp2蛋白过表达与胃癌的发生及转移有关;胃癌Skp2蛋白过表达与p27蛋白降解有关,提示Skp2蛋白过表达在胃癌发生、发展过程中可能起重要作用。

1,25二羟维生素D3联合顺铂对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖及Skp2/p27表达的影响

目的:探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]与顺铂(DDP)联合抑制人子宫内膜癌HEC-1-A细胞的增殖,测定二者作用下S期激酶相关蛋白(Skp2)、抑癌基因p27蛋白的表达。方法:用CCK-8法测定1,25(OH)2D3、DDP及二者联合处理后细胞增殖情况,用流式细胞仪分析细胞周期,用W estern blot检测Skp2及p27蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,1,25(OH)2D3、DDP作用下细胞吸光度(OD)值减少,细胞增殖受到抑制(P<0.01),二者联用时此作用明显增强;1,25(OH)2D3、DDP均能增加G0/G1期细胞比例,降低S、G2/M期细胞比例,从而降低细胞增殖指数(P<0.01);二者作用下Skp2表达减少,p27蛋白表达增多。结论:1,25(OH)2D3有增强DDP抗肿瘤的作用,二者均可能通过下调Skp2、上调p27蛋白表达,抑制癌细胞增殖。

蛋白酶体抑制剂MG132诱导caspase-8依赖的骨肉瘤细胞凋亡机制研究

目的:探讨蛋白酶体抑制剂Z-LLL-CHO(MG132)对人骨肉瘤细胞MG-63的作用以及可能作用机制。方法:将不同浓度的MG132作用于骨肉瘤细胞MG-63,采用显微镜观察形态改变、电镜观察细胞超微结构、MTT检测细胞增殖活力、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡、流式细胞仪分析细胞凋亡率以及细胞周期改变、RT-PCR检测基因转录、Western blotting检测蛋白表达水平。结果:MG132能有效诱导人骨肉瘤细胞系MG-63细胞周期在G2-M期的停滞,并引起MG-63的凋亡,出现凋亡的典型形态学改变,同时出现p27kip1蛋白的积累,caspase-8活化蛋白表达增加,Bax∶Bcl-2蛋白含量比例的增高,而对正常的人二倍体成纤维细胞,MG132并未表现诱导其凋亡的活性。结论:MG132引起的人骨肉瘤细胞MG-63的凋亡也许是与caspase-8、p27kip1和Bcl-2蛋白相关的。

SIV p27单克隆抗体的制备和鉴定

目的建立SIVp27杂交瘤细胞株，并对其分泌的SIVp27单克隆抗体进行初步鉴定。方法使用基因重组的SIVp27蛋白免疫BALB/c小鼠，采用杂交瘤技术使用半固体培养基法建立杂交瘤细胞株，制备单克隆抗体。通过染色体核型对杂交瘤细胞株进行鉴定；采用Western blot、免疫荧光法、酶联免疫吸附法确定单克隆抗体的交叉反应性、相对亲和力、抗原识别表位、免疫球蛋白的类型和亚类。对单克隆抗体进行鉴定。结果获得4株可稳定分泌SIVp27单克隆抗体的杂交瘤细胞，IC3、286为IgG1类，2E12为IgG2b类，3G3为IgG2a类。4株单抗均能识别SIV的p27蛋白，与逆转录病毒SRV、STLV无交叉反应，286、2E12与H1Vp24有交叉反应。免疫荧光法检测腹水效价为1：10240～1：40960。1C3、286、2E12、3G3染色体平均数分别为103、97、96、101。2E12与3G3识别不同的抗原表位。结论成功地制备出4株SIVp27单克隆抗体，均具有良好的特异性和亲和力，为进一步建立免疫分析方法，进行SIV／SAIDS及其艾滋病相关研究，奠定了基础。

胃癌中p16,p27^(kip1)和CDK4表达的比较及其意义

目的研究胃癌组织中p16、p27kip1蛋白和细胞周期依赖性激酶4(cyclin-dependentkinase4,CDK4)的表达,探讨它们与胃癌临床病理特征的关系及其对预后的影响。方法应用免疫组化S-P法,检测120例胃癌,20例胃粘膜非典型增生和30例正常胃粘膜组织切片中p16和p27kip1和CDK4、PCNA的表达,分析它们与临床病理参数的关系。结果120例胃癌中p16,p27kip1和CDK4,PCNA蛋白的表达率分别为43.3%,52.5%和46.7%,70.0%,与正常胃粘膜和非典型增生相比有显著性差异(P<0.01)。p16和p27kip1的表达缺失与胃癌的分化程度、局部淋巴结转移和临床TNM分期有密切关系(P<0.05,P<0.01)。CDK4、PCNA的高表达和胃癌的淋巴结转移和临床TNM分期有密切关系(P<0.01)。胃癌中p16、p27kip1的表达和CDK4、PCNA的表达呈负相关(P<0.01),而p16和p27kip1的表达、CDK4和PCNA的表达呈正相关(P<0.01)。结论CDK4、PCNA的高表达和p16、p27kip1的表达缺失与胃癌的发生以及侵袭和转移有关,可作为判断胃癌病情和预后的重要指标。