p27kip1基因对食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成的影响

目的 :研究p2 7kip1基因对人食管癌细胞EC -970 6的DNA复制及蛋白质合成的影响。方法 :重组体腺病毒Ad -p2 7kip1转染EC -970 6细胞 ,采用细胞生长计数、[3H] -TdR、[3H] -Leucine掺入法、流式细胞术 ,研究其对食管癌细胞DNA复制及蛋白合成的影响。结果 :Ad -p2 7kip1组细胞生长明显受抑 ,[3H] -TdR和 [3H ] -Leucine掺入量均明显减少 ,与对照组比较P <0 0 1;食管癌细胞的增殖明显受抑制。结论 :p2 7可有效抑制食管癌细胞的增殖活性 ,这与其抑制食管癌细胞DNA复制及蛋白质合成有关。

乳腺癌细胞中p27^(kip1)分子相互作用蛋白质谱的改变

p27kip1是细胞周期重要的负性调控因子,在乳腺癌等多种肿瘤发生发展过程中发挥重要作用.乳腺癌细胞中p27kip1蛋白通常是低丰度表达和错位分布,导致这种分布和表达改变的确切机制并不明确.已有研究表明,p27kip1磷酸化是重要的调节途径之一,细胞内外信号分子通过多种途径调节p27kip1的分布和表达.为了进一步阐明肿瘤细胞内调节p27kip1功能的分子机制,必须首先明确p27kip1在肿瘤细胞与正常细胞中相互作用蛋白质谱的差异.包括细胞周期素、周期素依赖性激酶、CRM1、jab1、Skp2等在内的多种分子可以与p27kip1发生相互作用.在乳腺癌细胞中还有几种特异的作用分子.在不同细胞周期和不同细胞内分布状态下,p27kip1蛋白有不同的相互作用蛋白质谱.因此,我们推断在乳腺癌细胞内p27kip1分子相互作用蛋白质谱的差异可能是导致其低表达和错位分布的主要机制.

核糖体蛋白质S13通过下调p27^(Kip1)促进胃癌细胞增殖

核糖体蛋白质是核糖体小亚基的一个组分。大量研究表明，部分核糖体蛋白质具有不依赖于核糖体的第二功能。但目前尚无核糖体蛋白质第二功能的报道。我们的前期研究发现，核糖体蛋白质S13（ribosomal protein S13，RPS13）在胃癌耐药细胞中表达上调并能增强胃癌细胞对化疗药物诱导的凋亡抵抗。

宫颈腺癌中HPV感染与Skp2、p27^kip1蛋白表达的研究

目的 探讨S期激酶相关蛋白2（Skp2）和细胞周期调控因子p27^kip1在宫颈腺癌发生发展中的作用，分析高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染与Skp2、p27^kip1蛋白表达关系。方法 采用组织微阵列技术结合原位杂交和免疫组化（二步法）检测HPV16／18DNA和Skp2、p27^kip1蛋白在86例宫颈腺癌和24例慢性宫颈炎组织中的表达。结果 宫颈腺癌组HPV16／18DNA与Skp2蛋白阳性表达率分别为65．1％和68．6％，均显著高于慢性宫颈炎组（P〈0．01）。p27^kip1蛋白在宫颈腺癌组中的阳性表达率为55．8％，明显低于慢性宫颈炎组（P〈0.05）。HPV16／18感染与宫颈腺癌病理分级和组织学类型无明显相关性，但与Skp2表达里正相关（P〈0．05），与p27^kip1表达呈负相关（P〈0．05）。Skp2表达与宫颈腺癌的病理分级有关，G2、G3组阳性表达率均明显高于G1组（P〈0．05）。Skp2和p27^kip1表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性。结论 宫颈康癌的发生与HPV16／18感染及Skp2、p27^kip1蛋白的表达异常相关，三者协同作用导致宫颈腺癌恶性发展。

人乳头瘤病毒感染对宫颈腺癌中p27^kip1蛋白表达的影响

目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染对宫颈腺癌中细胞周期调控因子p27^kip1蛋白表达的影响以及二者在宫颈腺癌发生过程的作用。方法采用原位杂交和免疫组化（二步法）检测24例慢性宫颈炎和86例宫颈腺癌组织的HPV16／18DNA和p27^kip1蛋白表达情况。结果HPV16/18DNA在宫颈腺癌组织中的阳性率为65．1％，显著高于慢性宫颈炎组织8．3％（P〈0．01）。p27^kip1蛋白表达在宫颈腺癌组织中的阳性率为55．8％，明显低于慢性宫颈炎组织79.2％（P〈0．05）．HPV16／18感染与宫颈腺癌的组织学类型无关，但与p27^kip1表达呈负相关（P〈0．05）。p27^kip1表达与官颈腺癌组织学类型有明显相关性，透明细胞腺癌p27^kip1阳性表达率明显低于其它类型宫颈腺癌（P〈0．05）。结论HPV16／18感染可能引起p27^kip1蛋白表达异常，从而导致宫颈腺癌发生。

结肠直肠癌P27^(kip1)蛋白的表达及临床意义

目的:探讨结肠直肠癌肿瘤组织中P27kip1蛋白的表达情况与预后关系。方法:通过免疫组织化学染色法检测2002年12月至2004年12月于本院接受治疗的212位结肠直肠癌病人肿瘤组织标本中P27kip1蛋白的表达,同时对其中接受根治术的202例病人进行随访,分析P27kip1蛋白的表达与病人性别、年龄、肿瘤生长部位、大小、病理类型、分期及根治性手术后肿瘤发生转移、复发的关系。结果:212例结肠直肠肿瘤组织中P27kip1蛋白染色阳性表达者131例,占61.8%。P27kip1蛋白阳性表达与肿瘤直径呈负相关(P=0.045);P27kip1蛋白阳性表达程度的高低与肿瘤复发率、死亡率呈负相关(P<0.001)。右半结肠癌的P27kip1蛋白阳性表达与肿瘤淋巴转移情况呈负相关(P=0.003)。但P27kip1蛋白表达与病人性别、年龄、肿瘤生长部位、病理类型、分期及有无转移均无显著相关性(P>0.05)。结论:结肠直肠癌肿瘤组织中P27kip1蛋白的表达情况可以评估结肠直肠癌手术治疗的预后情况,具重要的临床参考价值。

大肠癌p27^(kip1),Skp2蛋白表达及临床意义

为探讨p27kip1和Skp2在正常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠癌之间的表达差异及其表达与大肠癌临床病理特征的关系,笔者采用免疫组化S-P法检测15例正常大肠黏膜、15例大肠腺瘤、50例结直肠癌组织中p27kip1和Skp2的表达情况。结果示,(1)p27kip1在大肠癌组织中的表达明显低于大肠黏膜、大肠腺瘤组(P<0.05),在各病理分化程度的大肠癌组织中表达无明显差异(P>0.05),在有淋巴结转移的大肠癌组织中p27kip1表达明显低于无淋巴结转移组(P<0.05),DukesC,D期大肠癌组织中p27kip1表达明显低于DukesA,B期大肠癌组织(P<0.05);(2)Skp2在大肠癌组织中的表达明显高于正常大肠黏膜、大肠腺瘤组(P<0.05),在低分化大肠癌组织中的表达明显高于高分化大肠癌组织(P<0.05),在有无淋巴结转移大肠癌组织中,在DukesA,B期及C,D期大肠癌组织表达均无明显差异(P>0.05);(3)在大肠癌中p27kip1与Skp2表达呈显著负相关(r=-0.470,P<0.01)。提示(1)p27kip1的低表达与大肠癌淋巴结转移、Dukes分期有关,p27kip1低表达可能合并淋巴结转移或高Dukes分期。(2)在大肠癌组织中Skp2与p27kip1的表达呈负相关。

OCT4和P27^kip1蛋白在肺癌含量及其相关性研究

目的研究OCT4和P27^kip1蛋白在肺癌中的表达及其相关性,并探讨与肺癌临床病理参数的关系。方法采用免疫组织化学SP法对30例肺癌标本OCT4和P27^kip1的表达进行检测。结果肺癌标本OCT4和P27^kip1蛋白阳性表达分别为66.7%和73.7%,且OCT4和P27^kip1的表达水平与患者年龄、性别无明显关联,而与肿瘤转移有关。OCT4和P27^kip1在肺癌中的表达存在负相关(rs=-0.426,P<0.05)。结论OCT4和P27^kip1呈负相关性,可能在肺癌的发生发展过程中起关键作用,为肺癌诊治的研究提供了新的思路。

胃癌中Cks1、p27^(Kip1)和Skp2蛋白的表达

目的探讨Cks1在胃癌发生及其在Skp2调节p27Kip1降解过程中的作用。方法应用流式细胞术测定正常胃粘膜和胃癌组织中Cks1、p27Kip1、Skp2蛋白表达。结果胃癌组织中Cks1、Skp2表达明显高于正常胃粘膜(χ2=22.69,P<0.05;χ2=13.42,P<0.05),而p27Kip1表达则低于正常胃粘膜(χ2=14.83,P<0.05)。胃癌中Cks1、Skp2表达与p27Kip1表达呈负相关(r=-0.649,P<0.05;r=-0.732,P<0.05);而Cks1蛋白表达与Skp2蛋白缺乏相关性(P>0.05)。胃癌中Cks1的表达与肿瘤分化程度相关(χ2=5.05,P<0.05),而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期不相关(P>0.05)。结论Cks1可能参与了胃癌的发生;胃癌中Cks1可能参与了Skp2调节p27Kip1泛素化降解过程。

p27^(Kip1)蛋白在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的 :探讨子宫内膜癌中 p2 7Kipl蛋白的表达情况及临床病理意义。方法 :采用免疫组化S P法检测 10 5例子宫内膜癌p2 7Kip1蛋白的表达 ,并运用流式细胞术检测 46例子宫内膜癌组织的DNA含量。结果 :子宫内膜癌 p2 7Kip1蛋白阳性表达率为6 9 % (72 / 10 5例 ) ,明显低于正常增生期子宫内膜及单纯增生、复合增生子宫内膜总的阳性率 (91% ,P <0 0 1) ,而与不典型增生子宫内膜的 p2 7Kip1蛋白表达无明显差异 (P >0 0 5 )。p2 7Kip1蛋白阳性表达与子宫内膜癌的组织学分级、临床分期及DNA倍体有关 (P <0 0 5 )。组织分化差、临床期别晚以及异倍体细胞中 ,其 p2 7Kip1蛋白阳性表达明显下降。p2 7Kip1蛋白表达与子宫内膜癌组织学类型、肌层浸润、患者年龄及淋巴结转移无明显相关性。结论 :p2 7Kip1蛋白表达的下降可能与子宫内膜癌的发生发展有关 。

乳腺癌组织中PTEN和p27^(kip1)蛋白的表达及其相互关系

目的:探讨PTEN和p27kip1在乳腺癌组织中的表达规律及其相互关系。方法:采用免疫组化SP法检测64例乳腺癌组织中PTEN和p27kip1蛋白的表达。结果:乳腺癌组织PTEN(34/64)和p27kip1(33/64)蛋白表达显著低于正常乳腺组织(15/15),P值分别为0·0082和0·0078。有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组PTEN表达分别为13/33、3/11和16/38,明显低于无腋淋巴结转移(21/31)、无远处转移(31/53)和ER阳性组(18/26),P值分别为0·0240、0·0063和0·03475。p27kip1在乳腺癌有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组的表达分别为7/33、2/11和8/38,明显低于无腋淋巴结转移(15/31)、无远处转移(20/53)和ER阳性组(14/26),P值分别为0·0230、0·0440和0·0071。两者表达均与肿瘤大小无关。两种蛋白表达水平具有显著的相关性,P=0·0041。结论:PTEN、p27kip1表达异常与乳腺癌转移及恶性程度密切相关,两种基因蛋白表达强度一致,显示其在乳腺癌演进中具有协同作用。

PTEN基因稳定转染联合辐射对肿瘤细胞周期进程及G_1期激酶抑制蛋白P27^(kip1)表达的影响

目的:研究辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外转染对人脑胶质瘤SHG-44细胞周期进程及G1期激酶抑制蛋白P27表达的影响。方法:脂质体包裹重组载体体外转染肿瘤细胞并经G418筛选稳定表达细胞株,光学显微镜和透射电镜观察稳定转染细胞形态,以Western blotting法检测PTEN基因的辐射诱导表达情况,应用流式细胞术研究稳定转染联合0~10Gy X-射线照射对胶质瘤细胞周期进程及P27kip1的表达。结果:稳定转染PTEN基因的SHG-44细胞PTEN蛋白的相对表达量可被辐射诱导增强,5Gy以内PTEN蛋白的相对表达量随照射剂量增加而增加;稳定转染细胞超微结构有明显的退行性改变,可见核内染色质趋边的类似早期凋亡的改变;稳定转染联合X-射线照射细胞周期发生明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞,细胞周期相关蛋白P27表达上调。结论:PTEN基因稳定转染联合辐射可诱导肿瘤细胞G1期阻滞,并与P27kip1表达上调有关。

胃癌中Cks1、P27^(Kip1)、Skp2蛋白表达相关性及其意义

目的:探讨Cks1在胃癌发生及Skp2调节P27Kip1降解过程中的作用。方法:应用流式细胞术检测正常胃黏膜、胃不典型增生组织及胃癌组织中Cks1、P27Kip1、Skp2蛋白的表达。结果:由正常胃黏膜、胃不典型增生组织到胃癌中Cks1、Skp2的表达均呈上升趋势(P<0.05),P27Kip1表达则呈下降趋势(P<0.05)。胃癌中Cks1、Skp2表达均与P27Kip1表达呈负相关(r=-0.649,P<0.05;r=-0.732,P<0.05);而Cks1蛋白表达与Skp2蛋白无相关性(P>0.05)。胃癌中Cks1表达与肿瘤分化程度相关(P<0.05),而与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期不相关(P>0.05)。结论:Cks1可能参与胃癌的发生;胃癌中Cks1可能参与Skp2调节P27Kip1泛素化的降解过程。

PTEN、p27^(kip1)蛋白在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的检测PTEN、p27kip1在非小细胞肺癌组织的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测70例非小细胞肺癌患者标本PTEN、p27kip1的表达。结果PTEN蛋白在非小细胞肺癌中阳性表达率为51.43%(36/70),p27kip1在非小细胞肺癌中阳性表达率为47.14%(33/70),表达率均显著低于癌旁正常支气管上皮;PTEN、p27kip1在非小细胞肺癌中的表达与淋巴结转移负相关;PTEN与分化程度正相关;PTEN与p27kip1的表达呈正相关。结论PTEN、p27kip1异常表达可能共同或单独参与非小细胞肺癌的发生、演变,对判断预后有重要参考价值。

p27^Kip1在RA诱导人神经前体细胞分化中的作用

目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞。在细胞进入对数生长期时给予1μmol·L-1RA诱导。在诱导的d1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化。结果在RA诱导d3,人神经前体细胞形态发生变化,至d7时已接近成熟神经元形态。免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d3增加,在RA诱导d7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,p27Kip1 mRNA的表达在RA诱导d3增加,并在RA诱导d5达到高峰,而p21Cip1 mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势。cdk2、cy-clinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化。结论p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的。

OCT4和P27^(kip1)蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性

目的研究OCT4和P27^(kip1)蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性。方法采用免疫组织化学方法对24例肾透明细胞癌标本OCT4和P27^(kip1)的表达进行检测。观察OCT4和P27^(kip1)在肾癌组织中的阳性表达百分比及细胞分布情况。考察OCT4和P27^(kip1)在性别、年龄(<60岁和≥60岁)及癌细胞有无转移间的表达水平差异。对两者进行相关性分析。结果肾透明细胞癌标本OCT4和P27^(kip1)蛋白阳性表达分别为16例(66.7%)和18例(75%),OCT4蛋白高、中及低表达分别为8例(33.3%)、5例(20.5%)及3例(12.5%),主要在细胞质和细胞核中表达,另有少部分在胞膜中表达。P27^(kip1)高、中及低表达分别为3例(12.5%)、6例(25%)、9例(37.5%),阳性着色在胞浆和胞膜,少部分细胞核可表达。OCT4和P27^(kip1)的表达水平在年龄、性别间差异无统计学意义,在肿瘤有无转移间差异有统计学意义(P<0.05)。OCT4和P27^(kip1)在肾癌中的表达呈负相关(r_s=-0.408,P<0.05)。结论 OCT4和P27^(kip1)呈负相关,采用抑制OCT4表达或P27^(kip1)的降解,尤其是降低胞质中P27^(kip1)的表达,可作为基因治疗肾癌的一个新的的作用靶点。

乳腺癌中RUNX3、cyclin D1和p27^(kip1)蛋白的表达及其意义

[目的]探讨乳腺癌组织中RUNX3、cyclin D1和p27kip1基因的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组织化学SP法检测88例乳腺癌、40例乳腺纤维腺瘤、40例乳腺增生病中RUNX3、cyclin D1和p27kip1的表达。[结果](1)RUNX3和p27kip1在乳腺癌中的阳性表达率分别为35.23%和51.14%,明显低于在乳腺纤维腺瘤(85%和82.5%)及乳腺增生病(87.5%和85%)中的表达率(P<0.05)。乳腺癌中cyclin D1的表达率(63.63%)明显高于良性病变中表达。(2)RUNX3和p27kip1蛋白表达与乳腺癌的临床分期、淋巴结转移呈负相关,p27kip1蛋白表达与病理分级呈负相关。cyclin D1蛋白表达与病理分级呈正相关。(3)乳腺癌中RUNX3与p27kip1蛋白的表达呈正相关性(P<0.05),与cyclin D1的表达呈负相关性(P>0.05)。[结论]RUNX3、cyclin D1和p27kip1在乳腺癌的发生发展中起重要作用。检测乳腺癌组织中RUNX3、cyclin D1和p27kip1基因的表达对于评价患者的预后有一定价值。

PTEN和P27^(kip1)蛋白在胃癌及癌前病变中的表达和意义

目的检测PTEN、P27kip1蛋白在胃癌及癌前病变中的表达,探讨其在胃癌发生、发展中的作用。方法选取胃癌手术后、肠上皮化生和不典型增生标本,以癌旁正常组织作对照,应用免疫组化SP法检测PTEN、P27kip1蛋白的表达。结果 PTEN、P27kip1在肠上皮化生组、不典型增生组、胃癌组阳性率(P<0.01)低于正常组,呈逐渐下降趋势,两者表达呈正相关(P<0.05);PTEN、P27kip1在胃癌高、中、低、未分化、黏液癌中的阳性率(P<0.05)与胃癌病理分型、生长方式相关。结论 PTEN、P27kip1蛋白表达下调与胃癌的组织类型、生物学行为呈正相关,对胃癌的早期诊断、治疗、判断预后具有指导意义。

P27^(kip1)与细胞周期蛋白G在急性白血病中的表达及相关性研究

为了探讨P27kip1与细胞周期蛋白G(cyclin G)在急性白血病患者中的表达及其相关性,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G mRNA水平,采用Western blot检测39例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G蛋白表达水平。结果显示:急性白血病初治/复发组的cyclin G mRNA与蛋白表达水平均明显高于缓解组和正常对照组(p<0.05或p<0.01);缓解组与正常对照组之间无显著差异(p>0.05)。急性白血病初治/复发组的P27kip1 mRNA水平与缓解组和正常对照组比较均无明显差异(p>0.05)。而急性白血病缓解组和正常对照组的P27kip1的蛋白表达水平高于初治/复发组(p<0.05),缓解组与正常对照组之间无显著差异(p>0.05)。P27kip1与cyclin G的表达呈低度负相关。结论:P27kip1与cyclinG在白血病患者中有异常表达,与白血病的发生发展有一定联系;P27kip1的低表达与cyclin G的异常高表达可能是白血病预后不良的因素之一。

宫颈腺癌中HPV感染与Skp2、p27^(kip1)蛋白表达的研究

目的探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)和细胞周期调控因子p27kip1在宫颈腺癌发生发展中的作用,分析高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染与Skp2、p27kip1蛋白表达关系。方法采用组织微阵列技术结合原位杂交和免疫组化(二步法)检测HPV16/18DNA和Skp2、p27kip1蛋白在86例宫颈腺癌和24例慢性宫颈炎组织中的表达。结果宫颈腺癌组HPV16/18DNA与Skp2蛋白阳性表达率分别为65.1%和68.6%,均显著高于慢性宫颈炎组(P<0.01)。p27kip1蛋白在宫颈腺癌组中的阳性表达率为55.8%,明显低于慢性宫颈炎组(P<0.05)。HPV16/18感染与宫颈腺癌病理分级和组织学类型无明显相关性,但与Skp2表达呈正相关(P<0.05),与p27kip1表达呈负相关(P<0.05)。Skp2表达与宫颈腺癌的病理分级有关,G2、G3组阳性表达率均明显高于G1组(P<0.05)。Skp2和p27kip1表达与宫颈腺癌组织学类型有明显相关性。结论宫颈腺癌的发生与HPV16/18感染及Skp2、p27kip1蛋白的表达异常相关,三者协同作用导致宫颈腺癌恶性发展。