MDM2蛋白过度表达致p53功能失活在原发性肝细胞癌发生中的作用

目的 :研究p5 3基因突变及p5 3,MDM2蛋白表达在原发性肝细胞癌 (HCC)发生中的作用。方法 :应用免疫组织化学SP法检测 6 1例原发性肝细胞癌及 5 9例相应癌旁肝组织中p5 3蛋白和MDM2蛋白的表达 ;用PCR -SSCP-银染技术对其中 2 1例HCC的p5 3基因第 5～ 8外显子的突变情况进行研究。结果 :p5 3和MDM2蛋白在HCC中的表达明显高于癌旁肝组织 (P <0 .0 1)。HCC中p5 3与MDM2蛋白表达无明显相关性 (P >0 .0 5 )。新鲜HCC组织中p5 3基因第 5～ 8外显子的突变率为 42 .86 % (9/ 2 1) ,且均位于第 7外显子 ,癌旁组织中未发现p5 3基因突变。突变病例中 6 6 .6 7% (6 / 9)有p5 3蛋白高表达 ,11.11% (1/ 9)有p5 3及MDM2蛋白的过度表达 ,无突变病例中MDM2过度表达率为 2 5 % (3/ 12 )。结论 :p5 3基因突变及由MDM2过度表达导致的p5 3功能失活在HCC发生中起重要作用。p5 3基因突变和其它机制引起的MDM2蛋白高表达可能在HCC中共同发挥致癌作用。

胆红素诱导海马区神经细胞Fas蛋白过度表达的实验研究

目的探讨胆红素的神经毒性机制。方法制作高胆红素血症动物模型,观察海马区神经细胞的组织学变化,检测海马区神经细胞Fas蛋白表达率及神经细胞凋亡率,并探讨其间相关性。结果高胆红素血症时,海马区神经细胞出现凋亡的组织学改变,神经细胞Fas蛋白表达率在实验组1(T1G,腹腔注射胆红素0.171μmol/g体重为(19.13±0.25)%,实验组2(T2G,腹腔注射胆红素0.342μmol/g体重)为(33.38±3.45)%,T1G神经细胞凋亡率为(6.13±0.37)%,T2G为(15.44±0.64)%,均较对照组差异有显著性(P<0.001),二者与脑组织胆红素浓度均呈显著正相关。结论胆红素通过Fas系统的参与,传递凋亡信号,介导胆红素神经毒性,导致神经细胞凋亡。

唾液腺腺样囊性癌P^(53)基因蛋白表达与临床病理特征的关系

目的 探讨唾液腺腺样囊性癌(ACC) P53基因蛋白表达与临床病理特征的关系。方法 选择38例唾液腺ACC病理标本,采用免疫组织化学法进行P53基因蛋白检测。分析P53基因蛋白表达与ACC病理类型、局部复发、远处转移及临床分期的关系。结果 P53基因蛋白检出率为6 0 .5 % ,其过度表达与唾液腺ACC的复发、远处转移及术后生存有关(P均<0 .0 5 ) ,与肿瘤病理类型、临床分期无关(P均>0 .0 5 )。结论 P53基因蛋白过度表达在唾液腺ACC中有较高的检出率。

NOV蛋白在切割海马伞大鼠海马中表达的变化

通过切割右侧海马伞制备大鼠海马伞损伤模型,应用Westernblotting、免疫组织化学技术,观察切割海马伞后不同时程海马中肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白表达的变化,并对结果进行图像处理和统计学分析。Westernblotting结果显示,NOV蛋白在切割海马伞后3d表达开始上升,14d达高峰后缓慢下降。切割海马伞后14d切割侧和正常侧相比较,海马CA1-CA3区的锥体细胞层及齿状回颗粒层NOV阳性细胞数目无显著性差异(P>0.05),但切割侧NOV阳性细胞明显比正常侧深染,两侧比较平均灰度值有显著性差异(P<0.01)。结合本课题组以往的工作,本研究结果提示,切割海马伞后海马中高表达的NOV蛋白可能参与了诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的过程。

癌蛋白MDM2过表达与明确的非霍奇金淋巴瘤的不良预后有关

ＭＤＭ２是一种参与Ｐ５３调探的癌蛋白。ＭＤＭ２通过Ｐ５３依赖和非Ｐ５３依赖性机制发挥它的致癌潜力。它在各种各样的恶性肿瘤中经常出现过表达。但是在非霍奇金淋巴瘤（（ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ，ＮＨＬ）中ＭＤＭ２的表达对预后有何价值，人们却知之甚少。用免疫组织化学方法我们分析了从前瞻性群体基础上的ＮＨＬ登记注册的１８８例ＮＨＬ病例的ＭＤＭ２表达情况。

肾母细胞瘤过度表达基因CCN3和肿瘤转化因子β1在妊娠期糖尿病胎盘上的表达

目的探讨肾母细胞瘤过度表达蛋白（NOV，CCN3）和肿瘤转化因子p1（TGFβ1）在妊娠期糖尿病（GDM）胎盘组织中的表达变化及其意义。方法应用免疫组织化学方法检测GDM和正常足月妊娠分娩胎盘组织中CCN3和TGFβ1表达情况。结果CCN3和TGF-β1表达阳性率，正常足月妊娠分娩组分别为18％和52％，GDM组分别为40％和100％，差异有统计学意义。结论CCN3和TGFβ1可能在GDM病理过程中起重要作用。

mitoCPR是线粒体蛋白输入保护机制

据Weidberg H2018年4月13日[Science，2018，360（6385）：eaan4146．]报道，美国麻省理工学院霍华德休斯医学研究所研究人员在芽殖酵母中发现细胞如何对线粒体蛋白输入缺陷作出反应。在线粒体输入通道中，酵母细胞对线粒体蛋白压力的反应称为mitocpr安装。依赖于双组分信号序列（bipartite signal sequence）在线粒体中定位的蛋白过度表达会抑制线粒体输入并导致线粒体蛋白前体堆积。针对分裂的线粒体开展的蛋白酶保护测定和碳酸盐提取测定揭示出这些未输入蛋白堆积在线粒体表面上和被称作转位酶（translocase）的线粒体输入通道中。

人类及9种模式生物中ORAOV1蛋白的多维度特征分析

目的分析比较口腔癌过度表达序列1(ORAOV1)蛋白在人类与猕猴、大鼠、小鼠、家猫、家犬、金仓鼠、豚鼠、原鸡、非洲爪蟾9种模式生物中的特征,寻找宜用于建立口腔鳞状细胞癌(OSCC)动物模型的模式动物。方法采用生物信息学技术对人类ORAOV1蛋白提取以下特征:氨基酸序列、基本理化性质、亲疏水性、亚细胞定位、立体结构,并与9种模式生物ORAOV1蛋白的上述特征进行比较。结果在9种模式生物中,豚鼠ORAOV1蛋白在氨基酸序列、基本理化性质、亲疏水性、亚细胞定位及立体结构与人类最为接近,最宜于建立OSCC动物模型。结论人类ORAOV1蛋白具有137个氨基酸,位于微体,亲水,性质稳定;豚鼠与人类ORAOV1蛋白各特征相近,最宜用于建立OSCC动物模型。

FOXO1、KLF4蛋白在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

探讨正常脑组织细胞和不同级别的胶质瘤细胞中FOXO1蛋白和KLF4蛋白表达的差异。方法 根据WHO于2021年制定的脑胶质瘤病理分级标准,纳入40例胶质瘤标本,其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤标本各10例,正常脑组织标本10例作为对照组,采用免疫组织化学SP法检测各组FOXO1和KLF4蛋白的表达。结果 FOXO1蛋白在胶质瘤组的阳性表达率明显低于正常脑组织,其中在正常脑组织中的表达率为100%,在胶质瘤组织中的表达率为47.5%,而KLF4蛋白在胶质瘤组的阳性表达率明显高于正常脑组织,在正常脑组织和胶质瘤组织中的表达率分别为20%和80%。依据WHO病理分级标准,FOXO1蛋白在WHO(Ⅲ级、Ⅳ级)胶质瘤组织中的阳性表达率显著低于WHO(Ⅰ级、Ⅱ级)胶质瘤,而KLF4蛋白在WHO(Ⅲ级、Ⅳ级)胶质瘤组织中的阳性表达率显著高于WHO(Ⅰ级、Ⅱ级)脑胶质瘤(P<0.05),并发现FOXO1蛋白表达与KLF4蛋白表达呈负相关性(rs =-0.415,P<0.05)。结论 胶质瘤的恶性程度与FOXO1蛋白和KLF4蛋白的表达水平有关。FOXO1蛋白对胶质瘤的发生发展有抑制作用,KLF4蛋白在胶质瘤中有促进作用,两者之间存在协同作用。

肾癌分子靶向治疗的现状及研究进展

肾癌也称肾细胞癌（renal cell carcinoma,RCC）,是一种起源于肾小管上皮细胞的恶性肿瘤,可发生于肾实质的任何部位[1]。在中国,RCC的发病率位居泌尿系肿瘤第二位,仅次于膀胱癌,约20%～30%的患者术后出现复发或转移[2]。因RCC中有多种耐药蛋白过度表达,

乳腺癌HER2基因状态与17号染色体倍体分析

原癌基因HER2属于生长因子受体家族，定位于17P21，编码相对分子质量为185000的跨膜糖蛋白（HER2蛋白），通过细胞间的信号转导，调节细胞的生长、生存、分化和增殖。随着分子生物学的迅速发展。对原癌基因HER2的研究及其相关治疗已越来越受到重视。研究发现，在20％-30％的乳腺癌中有HER2基因扩增和蛋白过度表达，与乳腺癌的复发、转移、不良预后密切相关。

CCN3通过上调微小RNA-29a表达抑制肾小球系膜细胞胞外基质的合成

目的研究肾母细胞瘤过度表达蛋白（nephroblastoma overexpressed protein，CCN3）对转化生长因子-β1（TGF—β1）诱导的肾小球系膜细胞胞外基质（ECM）合成的影响及微小RNA-29（miRNA-29）在其中的作用机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞（HMC），观察外源给予不同浓度（5、50、500μg／L）重组CCN3蛋白或内源转染pcDNA-3．1（＋）-CCN3质粒对TGF-β1诱导的ECM和miRNA-29家族（a、b、c）表达的影响。HMC转染miRNA-29a抑制物和类似物，探讨miRNA-29a在CCN3调节TGF-β1诱导的ECM表达中的作用。实时荧光定量PCR检测各组纤连蛋白（FN）、I型胶原蛋白（COLI）的mRNA及miRNA-29家族（a、b、c）的表达，Western印迹检测各组FN、COLI的蛋白表达，细胞免疫荧光检测各组FN、COLI的表达。结果（1）与正常对照组比较，TGF-β1干预后HMC的FN、COLI蛋白及mRNA表达均增加，miRNA．29a、b、c的表达均降低（均P〈0．05）。（2）不同浓度CCN3重组蛋白干扰和转染CCN3质粒后TGF-β1诱导的FN、COLI蛋白及mRNA的表达均低于TGF-β1组（均P〈0．05）；而50、500μg，LCCN3重组蛋白干预组和转染CCN3质粒组miRNA-29a的表达较TGF．Bl组增加（均P〈0．05），其余miRNA-29家族表达与TGF-β1组比较差异无统计学意义（均P〉0．05）。（3）与TGF-β1＋重组CCN3蛋白组比较，TGF-β1＋重组CCN3蛋白＋miRNA-29a类似物转染组FN及COLI的表达减少（均P〈0．05），而TGF-β1＋重组CCN3蛋白＋miRNA-29a抑制物转染组FN及COLI的表达均增加（均P〈0．05）。结论CCN3可通过上调miRNA-29a抑制TGF-β1诱导的HMC合成ECM。

血红素氧化酶-1在鼠异种肝移植中的抗排斥作用及其机制研究

目的探讨血红素氧化酶1(HO1)在异种肝移植中的作用及其机制方法采用豚鼠对大鼠肝移植模型,实验动物分为3组,每组10对鼠。A组供体鼠术前24h腹腔注射5ml/kg生理盐水作为对照;B组供体术前24h腹腔注射HO1诱导剂钴原卟啉(CoPP),C组供体注射CoPP的同时给予HO1抑制剂锌原卟啉(ZnPP)。每组受体均接受眼镜蛇毒因子(CVF)。分别以RTPCR和western印迹法观察HO1mRNA及蛋白表达。通过凝胶电泳迁移率改变法(EMSA)检测移植肝核转录因子(NF)κB的活化,免疫组化观察E选择素表达,来评价HO1对内皮细胞活化的抑制作用。并比较各组受体鼠存活时间。结果各组均未发生超急性排斥反应。CoPP预处理可以诱导HO1mRNA和蛋白过度表达,进而显著抑制移植肝内NFκB的活化和内皮细胞E选择素表达;B组与(0.112±0.039)A组(0.211±0.030)、C组(0.283±0.075)相比差异有统计学意义(P<0.05)。HO1过度表达组与其它组相比,移植肝内皮细胞肿胀减轻,浸润细胞数减少,肝脏功能改善,而且受体鼠存活时间显著延长;B组(15.5h±3.8h)比A组(7.3h±2.1h)差异有统计学意义(P<0.01)。这种保护效应可被同时给予HO1抑制剂ZnPP所取消;B组比C组(6.7h±2.9h)差异有统计学意义(P<0.01)。结论HO1通过抑制内皮细胞活化,延缓异种移植肝排斥反应发生。

人表皮生长因子受体-2阳性乳腺癌靶向治疗新进展

人表皮生长因子受体-2（ human epidermal growth factor receptor 2，HER2）基因是人表皮生长因子受体家族成员之一，约20％～25％乳腺癌患者表现为HER2基因扩增或蛋白过度表达，其过度表达可激活PI3K／AKT和Ras／Raf／MEK／MAPKz信号通路，促进细胞生长、增殖［1］，在临床上表现为治疗效果欠佳、复发风险和死亡率增加。过去的十几年间，抗HER2的四代靶向药物曲妥珠单抗、拉帕替尼、帕妥珠单抗及T-DM1相继进入临床应用并取得令人瞩目的成就，新的抗HER2靶向药物也呈现出良好的应用前景。

用贺赛汀治疗早期乳腺癌

贺赛汀（Herceptin）是单克隆抗体，是治疗乳腺癌仅有的靶向药。癌细胞中的HER-2蛋白是靶蛋白，但有HER-2蛋白过度表达的乳腺癌只占15%～25％，但这些乳腺癌倾向生长快，对标准化疗和三苯氧胺反应不好。