瞬时受体电位蛋白通道A1在大鼠炎症性膀胱感觉通路中不同部位的表达变化

目的瞬时受体电位蛋白通道A1(TRPA1)参与机械性感觉、痛觉的传导以及炎性反应,我们制作大鼠的膀胱炎症模型,检测在膀胱传入通路中不同部位TRPA1的表达情况。方法采用大鼠腹腔内注射环磷酰胺制作膀胱炎症模型,正常大鼠作为对照组。采集膀胱黏膜层及脊髓后根神经节,利用实时定量PCR检测TRPA1转录水平的变化。结果大鼠腹腔内注射环磷酰胺2 d后,肉眼及病理检查证实膀胱炎性反应。TRPA1在膀胱黏膜层的表达水平没有明显变化,在脊髓后根神经节中,与对照组相比,炎症组的TRPA1的表达水平明显上调(P<0.05)。结论在膀胱炎症状态下,TRPA1在黏膜层的表达没有明显变化,提示它作为黏膜层的机械敏感性受体参与炎症诱发的排尿改变的可能性较小;TRPA1在脊髓后根神经节中表达上调,感觉神经元表达的TRPA1可能参与膀胱炎性反应,并且与膀胱炎时病理性的排尿方式相关。

维甲酸对皮肤角阮细胞水孔蛋白通道3表达的影响

目的探讨维甲酸类药物对表皮角阮细胞中水孔蛋白通道(AQP)3表达的影响。方法异维A酸、阿维A、阿达帕林处理角朊细胞的体外培养模型(Ha Ca T),采用免疫组化、RT-PCR、Western印迹分子生物学方法检测不同浓度(0.000、0.001、0.010、0.060、0.100 mg/ml)、不同作用时间(0、6、12、24、48 h)及不同干预因素下对Ha Ca T中AQP3含量的变化。结果 1浓度为0.010 mg/ml时,三组Ha Ca T中AQP3的表达均高于其他浓度(P<0.05);20.010 mg/ml浓度的异维A酸、阿维A、阿达帕林作用12 h,三组Ha Ca T中AQP3的表达异维A酸组>阿维A组>阿达帕林组,组间比较差异显著(P<0.05)。结论维甲酸可调节Ha Ca T中AQP3的表达,0.010 mg/ml浓度的异维A酸组12 h的时候对Ha Ca T中AQP3表达的上调作用最明显。

靶向切口蛋白通道的他瑞妥单抗Ⅱ期临床试验资料更新

OncoMed公司宣布更新其靶向切口蛋白2/3通道的单克隆抗体他瑞妥单抗（tarextumab,OMP-59R5）Ⅱ期临床ALPINE试验治疗胰腺癌和临床PINNACLE试验治疗小细胞肺癌的资料。靶向切口蛋白2/3受体的此药是全人源单抗。临床前研究提示此药有2个作用机制：①下调切口蛋白通路信号而具抗癌干细胞效应;②影响血管周细胞、基质细胞和肿瘤细胞的微环境。

人乳头瘤病毒E6蛋白通过上调氯离子蛋白通道5的表达促进宫颈癌细胞迁移

目的:探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6蛋白与氯离子通道蛋白5(chloride voltage-gated channel 5,CLCN5)之间的关系以及CLCN5对宫颈癌细胞迁移的影响。方法:采用RNA干扰技术敲低HPV E6基因,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法检测敲低HPV E6后宫颈癌HeLa细胞中CLCN5 mRNA及蛋白的表达水平。通过PCR扩增CLCN5基因片段,并将其克隆至表达载体pCDNA3.1-3×Flag(简称pCDNA3.1)质粒中,构建重组质粒pCDNA3.1-CLCN5。将目的质粒pCDNA3.1-CLCN5及其对照pCDNA3.1质粒分别转染宫颈癌HeLa细胞,蛋白质印迹法检测CLCN5蛋白的表达。Transwell迁移实验检测过表达CLCN5对宫颈癌HeLa细胞迁移的影响。同时,将CLCN5的小干扰RNA及其阴性对照分别转染宫颈癌HeLa细胞,Transwell迁移实验检测敲低CLCN5对宫颈癌HeLa细胞迁移的影响。结果:RT-qPCR和蛋白质印迹检测结果显示,敲低HPV E6可显著降低CLCN5的mRNA和蛋白表达水平。质粒双酶切鉴定以及核酸测序比对结果证实重组质粒pCDNA3.1-CLCN5构建成功。蛋白质印迹检测结果显示CLCN5蛋白在宫颈癌HeLa细胞中被有效过表达或敲低。Transwell迁移实验结果表明,过表达CLCN5可促进宫颈癌细胞的迁移,敲低CLCN5可抑制宫颈癌细胞的迁移。结论:HPV E6蛋白通过上调CLCN5的表达促进宫颈癌细胞迁移。

心肌组织的连接蛋白通道

概述了心肌组织几种主要连接蛋白 (Cx)的特征、分布和某些病理情况下的改变 ,缝隙连接 (Gj)

视网膜静脉阻塞病人血清胶质纤维酸性蛋白和水通道蛋白4水平变化及其与预后的关系

目的检测视网膜静脉阻塞(RVO)病人血清中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、水通道蛋白4(AQP4)水平,探究二者表达水平与RVO病人预后的关系。方法回顾性选取2019年8月至2021年8月西安医学院第二附属医院收治的94例RVO病人为研究组,另取同期体检健康者85例为对照组。收集病人一般临床资料,对研究组和对照组的血清GFAP、AQP4水平进行检测;根据研究组病人预后情况将其分为预后良好组(39例)和预后不良组(55例);多因素logistic回归分析RVO病人预后的影响因素;绘制血清GFAP、AQP4对RVO病人预后评估的受试者操作特征曲线(ROC曲线)。结果研究组血清GFAP水平(3.56±0.74)μg/L显著高于对照组(1.85±0.41)μg/L,研究组血清AQP4水平(15.97±2.82)μg/L显著高于对照组(10.56±2.54)μg/L(P<0.05)。预后不良组血清GFAP水平(3.91±0.84)μg/L显著高于预后良好组(3.06±0.62)μg/L;预后不良组血清AQP4水平(17.25±3.29)μg/L显著高于预后良好组(14.18±2.18)μg/L(P<0.05)。预后良好组与预后不良组病人高血压史、空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)差异有统计学意义(P<0.05)。logistic回归分析显示,血清GFAP、AQP4、高血压史、空腹血糖、TC、TG、LDL-C和HDL-C均是RVO病人预后不良的影响因素(P<0.05)。血清中GFAP、AQP4、二者联合预测RVO病人预后的AUC分别是0.73、0.79、0.92,灵敏度分别为47.27%、78.85%、77.08%,特异度分别为89.74%、72.97%、97.14%,约登指数分别为0.370、0.518、0.742;二者联合优于GFAP、AQP4各自单独预测(均P<0.05)。结论RVO病人血清GFAP、AQP4水平显著升高,对病人的预后状况具有较高的预测效能,可为临床的合理干预和改善病人预后提供依据。

橡胶树水通道蛋白HbPIP2;7的亚细胞定位与多聚化分析

天然橡胶在橡胶树的乳管细胞中特异性合成。用于割胶的成熟乳管与邻近的薄壁细胞之间不存在胞间连丝,故乳管的水分转入只能通过细胞膜定位的PIP水通道蛋白来实现。为探讨乳管水分平衡的分子机制,研究对1个高丰度表达的PIP基因HbPIP2;7进行了克隆,在此基础上对其编码蛋白的亚细胞定位和多聚化特性进行了分析。结果表明:HbPIP2;7的编码区全长837 bp,预测编码278 AA,理论分子量为29.56 kDa、等电点为9.11、不稳定系数为29.89、总平均疏水指数为0.526,含有1个保守的MIP结构域及6个典型的跨膜螺旋,预测以四聚体的形式起作用。生物信息学预测和在烟草中的亚细胞定位分析均显示,HbPIP2;7定位在细胞膜。双分子荧光互补和酵母双杂交实验均表明,HbPIP2;7不能形成同源多聚体,推测HbPIP2;7主要通过异源互作的方式参与橡胶树乳管的水分平衡。

基于“肾藏精主水”理论探析慢性心衰与水通道蛋白的相关性

慢性心力衰竭(chronicheartfailure,CHF)作为临床上各种心脏疾病发展的终末阶段,水液代谢障碍是其主要临床表现之一,因此中医常将其归为“心水”“水肿”等病症范畴进行探讨及诊疗。“肾藏精主水”之理论,源流于黄帝内经,是中医学用来阐释人体水液输布之大宗大本的理论依据。AQPs是一种跨膜水转运蛋白,其主要功能在于控制调节机体的水液代谢平衡,通过对其在机体之分布与功能的研究,可以发现其与“肾主水”的一些理论内涵不谋而合。文章探究中医从“肾藏精主水”理论出发论治慢性心力衰竭与AQPs的相关性。

抗水通道蛋白4抗体阳性视神经脊髓炎谱系疾病诊断与治疗进展

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSDs)以抗水通道蛋白4(AQP4)抗体阳性NMOSDs最为多见,主要表现为反复发作的视神经炎和脊髓炎等,严重降低患者生活质量。近年来,对该病的诊断技术、诊断标志物和免疫治疗药物不断有新的认识,本文综述抗AQP4抗体阳性NMOSDs的诊断技术和诊断标志物新进展以及新的治疗药物,以促进对该病的诊断与治疗新技术的理解和应用,探索更多可能的临床诊断与治疗方法。

水通道蛋白9商品化抗体和自制抗体识别位点的分析和应用

目的分析水通道蛋白9(AQP9)商品化抗体和自制抗体的抗原识别位点,并鉴别其应用效果。方法利用Western blotting对比3种商品化抗体与自制AQP9抗体鉴定基因型的效果。分析4种抗体的抗原识别位点,及其在实际应用中的特异性。结果Western blotting结果显示,3种商品化抗体在野生型(WT)和Aqp9^(-/-)小鼠中均可见蛋白条带。3种商品化抗体对应的血蓝蛋白(KLH)共轭合成肽依次为大鼠、人源和人源,与小鼠AQP9氨基酸序列存在一定差异。AQP3/7与AQP9分子量相近,且在肝中均有表达,同源性较高。自制抗体在WT鼠的27 kD位置可见一明显条带,但是Aqp9^(-/-)鼠的相应位置未见条带。结论1号和3号商品化抗体可用于辅助鉴别Aqp9^(-/-)鼠的基因型,自制抗体在蛋白水平上可以准确鉴定基因型。

天沙合剂对EGFRIs致皮肤干燥大鼠水通道蛋白表达影响的实验研究

目的:探究天沙合剂通过调节水通道蛋白(aquaporins,AQPs)对表皮生长因子受体抑制剂(epidermal growth factor receptor inhibitors,EGFRIs)造成的皮肤干燥的治疗作用机制。方法:将36只大鼠随机分为6组,分别为正常对照组、EGFRIs模型组、维生素E阳性对照组和低、中、高剂量天沙合剂组,每组6只。除正常对照组,其余5组大鼠通过连续28 d吉非替尼(37.5 mg/kg)灌胃给药构建EGFRIs诱导的背部皮肤干燥模型;从吉非替尼给药第15天开始,给予维生素E(13.5 mg/kg)或天沙合剂(8、4、2 mg/kg)干预,正常对照组和模型组给予等量生理盐水。给药结束后,观察背部皮疹情况,通过测量经皮失水评估皮肤损伤情况;通过HE染色评估皮肤组织病理变化;Western blot测定皮肤组织AQP1,AQP3和AQP5表达。结果:维生素E和高、中剂量天沙合剂组大鼠背部皮疹明显改善,经皮失水较模型组降低。维生素E和3剂量天沙合剂组大鼠皮肤组织病理变化减轻,皮肤组织AQP1、AQP3和AQP5表达增加。结论:天沙合剂可减轻EGFRIs诱导的皮肤损伤,改善其造成的皮肤病理变化,调节AQPs表达是其作用途径之一。

顽固性低钾低钠血症的水通道蛋白4阳性NMOSD 1例

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种主要累及视神经和脊髓的中枢神经系统脱髓鞘疾病,极后区综合征患者临床表现为频繁恶心、呕吐和顽固性呃逆,尤其是在不伴其他神经系统症状而单独出现时,早期易被误诊为消化道疾病和其他疾病,延误诊治。该文报道1例以频繁恶心、呕吐起病伴顽固性低钾低钠血症的水通道蛋白4阳性NMOSD,以提高对该病的认识,做到早诊断、早治疗,减少误、漏诊,从而改善患者预后。

铁离子、水通道蛋白-4在脑室出血后脑积水形成中的交互作用及预测预后的价值

目的分析铁离子(Fe)、水通道蛋白-4(AQP-4)在脑室出血(IVH)后脑积水形成中的交互作用及预测预后的价值。方法选取2021年1月至2023年1月洛阳市中心医院收治的52例IVH后发生脑积水的患者作为研究组,另选取同期52例IVH后未发生脑积水的患者作为对照组。比较两组患者以及研究组不同病情、不同预后患者的血清Fe、AQP-4水平,采用Pearson法分析Fe、AQP-4与格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性,通过交互作用分析Fe、AQP-4对脑积水形成的影响,并采用受试者工作特性曲线(ROC)分析Fe、AQP-4对预后的预测价值。结果研究组患者的血清Fe水平为(10.36±2.74)μmol/L,明显低于对照组的(14.12±3.58)μmol/L,AQP-4水平为(179.62±24.48)μg/L,明显高于对照组的(141.59±18.62)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组不同程度意识障碍患者血清Fe水平比较,重度<中度<轻度,AQP-4水平比较,重度>中度>轻度,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组不同程度神经功能缺损患者血清Fe水平比较,重度<中度<轻度,AQP-4水平比较,重度>中度>轻度,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson法分析结果显示,研究组患者的血清Fe水平与GCS评分、NIHSS评分呈负相关(r=-0.623、-0.661,P<0.05),AQP-4水平与之呈正相关(r=0.658、0.674,P<0.05);交互作用分析结果显示,低Fe水平与高AQP-4水平在IVH后脑积水形成中呈次相乘模型的正向交互作用(P<0.05);预后不良患者的术前血清Fe水平为(8.14±1.84)μmol/L,明显低于预后良好患者的(11.75±2.39)μmol/L,AQP-4水平为(197.65±23.24)μg/L,明显高于预后良好患者的(168.35±19.17)μg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);血清Fe、AQP-4单独及联合预测IVH后脑积水患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.805、0.814、0.928。结论低Fe水平、高AQP-4水平在IVH后脑积水形成中呈正向交互作用,两指标水平与脑积水病情严重程度具有一定相关性,联合检测对预后具有一定预测价值,可为临床工作提供可靠参考。

活血化瘀方药调控水通道蛋白研究概况

张仲景提出“血不利则为水”的中医理论,指出了血与水之间的病理联系,即瘀血致水病机,为后世医家采用活血化瘀法治疗水液代谢障碍性疾病提供了思路,但其分子生物学机制尚不明确。水通道蛋白(AQPs)在维持机体水液代谢平衡中具有重要意义,当AQPs异常时,人体水液动态平衡被打破,可以引发多种疾病。近年来大量研究证实,活血化瘀方药可通过调控AQPs表达水平治疗脑水肿、肺水肿、便秘、组织肿胀等水液代谢障碍性疾病。基于此,拟通过综述AQPs在水液代谢障碍性疾病中的异常表达以及活血化瘀方药对其的调控机制,为“血不利则为水”提供分子生物学层面理论基础,以期为进一步研究及临床应用提供参考。

中枢神经系统相关水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是一族表达于细胞膜上,对水分子高效通透的特异性孔道蛋白,其在全身广泛分布,与多个生物过程关系密切,同时也与较多神经系统疾病的发生发展存在联系。AQPs与中枢神经系统内的液体流动、能量代谢、神经修复与发生、血脑屏障的发育与稳定、信号转导以及CSF的产生与循环密切相关。AQPs还与脑水肿、阿尔茨海默病、视神经脊髓炎、原发性颅内高压及帕金森病等中枢神经系统疾病的发生发展有关。在中枢神经系统中,虽然已经发现较多种类的AQPs存在,但研究成果主要集中于AQP1、AQP4及AQP9三个水通道蛋白上。对于AQPs的研究有助于加深中枢神经系统的认识,并提供疾病的潜在治疗靶点。本文综述了AQPs在中枢神经系统的表达分布、调节机制、生理功能及其与中枢神经系统疾病的关联,为相关神经科学研究提供新思路。

抑制水通道蛋白4表达对脑缺血再灌注模型小鼠自噬和凋亡的影响

目的:探讨抑制水通道蛋白4(AQP4)表达对脑缺血再灌注模型小鼠自噬和凋亡的影响及其机制。方法:采用暂时性大脑中动脉闭塞(tMCAO)建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。将60只小鼠按随机数字表法分成假手术(sham)组、I/R组、AQP4抑制组和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组15只,sham组和I/R组腹腔注射生理盐水,AQP4抑制组和3-MA组分别腹腔注射AER-271(2 mg·kg^(-1)·d^(-1))和AER-271+3-MA(2 mg·kg_(-1)·d^(-1)),给药3 d,每天1次。观察各组小鼠神经功能Longa评分,记录体重变化;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察脑梗死体积及组织病理变化;采用Western blot检测AQP4、LC3-Ⅱ、P62和cleaved caspase 3含量变化,采用免疫荧光法检测LC3-Ⅱ、P62、cleaved caspase-3与NeuN(神经元标志物)的共定位及表达情况。结果:I/R组与AQP4抑制组检测到大面积的脑梗塞和脑水肿,以及较高的Longa评分;与I/R组比较,AQP4抑制组的脑梗塞体积、脑水肿体积和Longa评分均显著降低(P<0.05);与sham组比较,I/R组的AQP4、LC3-Ⅱ和cleaved caspase-3的表达显著增加(P<0.01),而小鼠体重和P62表达则显著降低(P<0.05,P<0.01)。与I/R组比较,AQP4抑制组和3-MA组的AQP4、LC3-Ⅱ和cleaved caspase-3表达显著降低(P<0.05,P<0.01),而小鼠体重和P62表达则显著增加(P<0.05,P<0.01)。然而,与AQP4抑制组比较,3-MA组小鼠Longa评分、脑梗死体积、小鼠体重和AQP4、LC3-Ⅱ、cleaved caspase-3及P62的表达无显著差异。结论:抑制AQP4的表达能够显著减小tMCAO模型小鼠的脑梗死面积和减轻神经损伤程度。同时,抑制AQP4的表达对脑梗死后自噬和凋亡具有减缓作用,而加用自噬抑制剂后对AQP4抑制剂的保护作用无显著影响。

水通道蛋白与冠心病关系的研究进展

水通道蛋白(AQPs)是一类在人体内广泛表达的膜蛋白,它们在调节细胞膜的水分平衡中起着关键作用。近年来,AQPs在心血管系统中的研究逐渐受到关注,尤其是与冠心病的关系。本文将综述近年来关于水通道蛋白与冠心病关系的研究进展。

中医药调节水通道蛋白的研究进展

津液代谢失常可使脏腑功能异常进而出现多种疾病,而中医药在津液代谢失常类疾病的治疗上效果显著。水通道蛋白作为特异性转运水分子的蛋白通道,是机体水液代谢的重要环节,并在各系统细胞膜上均有表达。随着经济发展,祖国医学对水液、津液代谢紊乱类疾病的治疗包括调节水通道蛋白的表达进展较多,该文对近年研究概况进行分析、总结,为今后的研究提供参考[1]。

血清及尿β_(2)微球蛋白、视黄醇结合蛋白、水通道蛋白-2与肾盂输尿管连接部梗阻致小儿肾积水严重程度的关系研究

目的探讨血清及尿β_(2)微球蛋白(β_(2)-MG)、视黄醇结合蛋白(RBP)、水通道蛋白-2(AQP2)与肾盂输尿管连接部梗阻(UPJO)致小儿肾积水严重程度的关系。方法选取南宁市第六人民医院泌尿外科接受肾盂输尿管梗阻手术治疗的60例肾积水患儿为肾积水组,根据肾积水严重程度分为轻度组(n=13)、中度组(n=22)和重度组(n=25),另外选取同期该院接受体检的60例健康儿童为对照组。比较对照组和肾积水组不同严重程度患儿血清及尿β_(2)-MG、RBP、AQP2水平;分析β_(2)-MG、RBP、AQP2水平与超声参数[肾盂前后径(APD)、肾实质厚度(PT)]的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清及尿β_(2)-MG、RBP、AQP2对中重度肾积水的诊断效能。结果肾积水组血清及尿β_(2)-MG、RBP水平均高于对照组,血清及尿AQP2水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。肾积水患儿血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP水平和APD水平由低到高为轻度组、中度组、重度组,尿AQP2水平和PT由高到低为轻度组、中度组、重度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。轻度组血清RBP水平低于中度组和重度组,差异有统计学意义(P<0.05)。肾积水患儿血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP水平与APD均呈正相关,与PT均呈负相关(P<0.05);尿AQP2水平与APD呈负相关,与PT呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP、尿AQP2检测对中重度肾积水均具有一定诊断价值,曲线下面积(AUC)分别为0.652、0.688、0.859、0.680,尿RBP诊断中重度肾积水的AUC显著大于其余指标(P<0.05)。结论血清β_(2)-MG、尿β_(2)-MG、尿RBP、尿AQP2与UPJO致小儿肾积水严重程度相关,尿RBP对中重度肾积水的诊断效能优于其他指标。

改良VPS治疗脑室出血后脑积水的效果及对神经功能、铁离子和水通道蛋白-4的影响

目的 探讨改良脑室-腹腔分流术(VPS)在脑室出血(IVH)后脑积水患者治疗中的应用价值。方法 选取2021年1月至2023年1月洛阳市中心医院收治的102例IVH后脑积水患者,采用简单随机化法分为两组,各51例。对照组接受传统VPS治疗,研究组接受改良VPS治疗。比较两组手术相关指标、神经功能评分[美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)]及相关因子[白蛋白商(QAlb)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、血清铁离子(Fe)、水通道蛋白-4(AQP-4)水平、认知功能[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分]、生活能力[日常生活能力量表(ADL)评分]、步态障碍评分(Tinetti评分)、并发症及术后6个月情况良好率。结果 研究组通气时间、住院时间、住院费用均较对照组低(P<0.05);术后第7天,研究组NIHSS评分、脑脊液NSE和QAlb、血清Fe和AQP-4水平均较对照组低(P<0.05);研究组术后第6个月MoCA评分、ADL评分、Tinetti评分均较对照组高(P<0.05);研究组并发症发生率较对照组低,术后6个月预后良好率较对照组高(P<0.05)。结论 改良VPS治疗IVH后脑积水患者,可减轻神经功能损伤,恢复认知功能和步态,增强日常生存能力,改善患者预后,且能减少并发症及住院时间,减轻患者负担。