PSMB5对多发性骨髓瘤细胞增殖和硼替佐米耐药的影响及其机制研究

目的探讨蛋白酶体D5亚单位（PSMB5）基因对多发性骨髓瘤（MM）细胞增殖和硼替佐米（BTZ）耐药的影响及其机制。方法以MM细胞株RPMI8226细胞和BTZ耐药细胞株RPMI8226／BTZ100（简称BTZ100）细胞为研究对象，采用慢病毒转染的方法建立过表达和下调PSMB5表达的MM稳转细胞系；CCK8法检测PSMB5对MM细胞增殖和BTZ耐药性的影响；流式细胞术检测PSMB5对细胞凋亡的影响；Westernblot法检测PSMB5对凋亡相关基因Bax、Bcl-2、P—Akt和Cleavedcaspase．3表达的影响。结果①成功构建稳定过表达和下调PSMB5表达的RPMI8226和BTZ100细胞系。②PSMB5表达与RPMI8226和BTZ100细胞增殖呈正相关（P值均〈0．05）。③下调PSMB5表达后，在相同浓度的BTZ作用下RPMI8226细胞活力较对照组降低[作用24h时IC50分别为（7．01±0．47）、（9．64±0．55）nmol／L，t=6．289，P=0．003]，过表达后的细胞活力较对照组升高[IC50分别为（10．99±0．58）、（9．51±0．37）nmol／L，t=3．724，P=0．020]。④PSMB5表达可促进BTZ诱导的RPMI8226、BTZ100细胞凋亡，与对照组比较，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。⑤下调PSMB5表达可上调Bax和Cleavedcaspase-3表达，降低Bcl-2和p-Akt表达，而过表达则相反。结论下调PSMB5表达可通过激活凋亡信号通路促进MM细胞凋亡，增强MM细胞对BTZ的敏感性。提示PSMB5可能是治疗MM的潜在靶点。