中医药干预慢性阻塞性肺疾病蛋白酶-抗蛋白酶失衡机制的研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制涉及炎症反应、氧化应激、蛋白酶/抗蛋白酶系统失衡等,其中蛋白酶与抗蛋白酶系统失衡为COPD的主要发病机制之一。增多的蛋白酶可通过参与炎症反应、降解细胞外基质、重塑气道等对肺组织造成破坏。近年来,中医药以蛋白酶-抗蛋白酶失衡为切入点,开展了大量的临床研究及基础实验,积累了丰硕的成果。

CDK4基因突变及其胰蛋白酶-抗胰蛋白酶失衡在胃癌发生中的作用

目的探讨胃癌患者中细胞周期蛋白依赖激酶基因(cell cycle-dependent protein kinase 4,CDK4)突变及其胃癌组织CDK4表达和血清胰蛋白酶-抗胰蛋白酶的失衡情况。方法应用PCR法扩增25例胃癌患者及62名健康体检者的CDK4基因外显子、启动子和侧翼序列,产物纯化后直接测序,分析不同基因型胃癌患者的临床特征,取患者的癌组织、癌旁组织和远离癌的正常组织做CDK4免疫组化,同时应用ELISA法检测同一时期患者及其对照的血清胰蛋白酶和α-抗胰蛋白酶水平,分析其差异性。结果在胃癌患者中发现CDK4基因3号外显子存在高频突变,其中5例患者为c.110 T>A突变,突变造成p.M37T;免疫组化显示,癌组织高表达CDK4,癌旁组织呈弱表达,远离癌的正常组织呈阴性;胃癌患者的血清胰蛋白酶浓度(33.98±11.24)ng/ml显著高于正常对照组(15.96±18.23)ng/ml,而血清抗胰蛋白酶浓度与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CDK4基因突变及其高表达与胃癌发生密切相关,机体内胰蛋白酶-抗胰蛋白酶的失衡可能是胃癌发病的重要原因。

基质金属蛋白酶与慢性阻塞性肺疾病的相关研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以不可逆性气流受限为特征且肺功能呈进行性下降的慢性气道疾病。蛋白酶-抗蛋白酶失衡是COPD的主要发病机制之一,基质金属蛋白酶(MMP)在气道、肺组织结构的破坏中起关键作用,可调节炎症因子的表达,参与患者气道重构进程。MMP还可通过降解细胞外基质的多种成分调节细胞的生长、分化及损伤修复。蛋白酶的数量和活性超过抗蛋白酶的抑制作用可导致细胞外基质被大量降解,从而促进COPD的发展。此外,MMP的基因多态性也可影响COPD患者的病程进展,Toll样受体、Wnt信号通路和核因子κB均可通过调节MMP的产生与释放参与气道重构和炎症反应。因此,深入研究MMP与COPD关系可以为COPD患者的治疗提供新思路。

间充质干细胞治疗慢性阻塞性肺疾病机制研究进展

目的慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要采用药物治疗,但暂无可治愈COPD的药物。目前,关于间充质干细胞(MSCs)治疗肺部疾病的研究较多。本文总结了COPD发病机制的研究进展,在此基础上探讨MSCs治疗COPD的疗效及其可能的机制,主要包括抑制炎症反应、纠正蛋白酶/抗蛋白酶失衡、抗细胞凋亡、抑制氧化应激及转分化为肺泡上皮细胞等,为MSCs应用于临床提供理论依据。

炎症及氧化应激反应在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的研究进展

慢性阻塞性肺疾病是一种复杂的全身性疾病,发病机制尚未完全清楚.气道和肺部炎症、氧化/抗氧化失衡和蛋白酶/抗蛋白酶失衡被认为是3个主要的发病机制.就细胞因子和炎症介质、氧化应激反应和蛋白酶/抗蛋白酶系统在COPD发病中所起的作用等方面的研究进展作一综述.

慢性阻塞性肺疾病血清中性粒细胞弹性蛋白酶和α1-抗胰蛋白酶的检测及其意义

目的 检测慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）患者急性加重期、稳定期和健康对照者血清中的中性粒细胞弹性蛋白酶（neutronphil elastase，NE）和α1-抗胰蛋白酶（alphal antitrypsin,α1-AT）的水平变化，统计分析其与肺功能指标和吸烟等危险因素的关系，探讨蛋白酶/抗蛋白酶失衡在COPD发病中的意义。方法收集2007年12月至2010年10月河北医科大学第一医院呼吸内科住院的COPD患者56例和健康对照组21名的血清标本。COPD患者又分为急性加重期30例和稳定期26例两组。采用酶联免疫吸附法检测各组血清中NE、α1-AT水平。结果 ①COPD急性加重期血清NE水平显著高于对照组，差异有统计学意义（t =3.91，P＜0.01）;COPD稳定期也高于对照组，差异有统计学意义（t =2.02，P＜0.05）；COPD急性加重期高于稳定期，差异无统计学意义（t=1.91，P＞0.05）。COPD急性加重期α1-AT血清水平显著低于对照组，差异有统计学意义（t=-4.45，P＜0.01）；稳定期也低于对照组，差异有统计学意义（t=-2.73，P＜0.05）；COPD急性加重期低于稳定期，差异有统计学意义（t =-3.19，P＜0.01）。②COPD急性加重期组α1-AT血清水平与NE呈明显负相关（r=-0.71，P＜0.01）；稳定期组两者无相关性（r=0.33,P＞0.05）。③COPD急性加重期血清NE水平与第1秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1％pred）呈明显负相关（r=-0.82，P＜0.01）；与RV/TLC或吸烟程度呈正相关（r=0.74,0.73，P＜0.01）。COPD稳定期血清NE水平与FEV1％ pred或RV/TLC无相关性（r=0.25，-0.23，P＞0.05）；与吸烟程度呈正相关（r=0.42，P＜0.05）。④COPD急性加重期血清α1-AT水平与FEV1％ pred呈明显正相关（r=0.86,P＜0.01）；与RV/TLC或吸烟程度呈负相关（r=-0.83，-0.80，P＜0.01）。COPD稳定期血清α1-AT水平与FEV1％ pred呈正相关（r=0.47，P＜0.05）；与RV/TLC呈负相关（r=-0.46,P＜0.05）；与吸烟程度无相关性（r =0.34,P＞0.05）。结论①NE与α1-AT的失衡在COPD发病中起重要作用。②NE分泌增多和α1-AT含量的相对不足与气道炎症及气道阻塞具有显著相关性，是肺气肿形成的重要因素。③吸烟可导致NE水平升高、α1-AT活性下降及含量相对不足，是COPD的高危因素之一。

慢性阻塞性肺疾病血清基质金属蛋白酶-9和组织型金属蛋白酶抑制物-1的检测及其意义

目的检测慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）急性加重期、稳定期患者和健康对照者血清中基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）和组织型金属蛋白酶抑制物-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1，TIMP-1）的水平变化，统计分析其与肺功能指标和吸烟等危险因素的关系，探讨蛋白酶／抗蛋白酶失衡在COPD发病中的意义。方法收集2007年12月至2010年10月河北医科大学第一医院呼吸内科住院的COPD患者56例和健康对照21名的血清标本。COPD病例又分为急性加重期30例和稳定期26例两组。采用酶联免疫吸附法检测各组血清中MMP-9、TIMP-1水平。结果1．①COPD急性加重期组MMP-9水平显著高于稳定期组、正常对照组，差异有统计学意义（t=3．24，4．22，P〈0．01）；稳定期组高于正常对照组，差异有统计学意义（t=2．08，P〈0．05）。②COPD急性加重期组TIMP-1水平高于稳定期组、正常对照组，差异有统计学意义（t=2．02，3．65，P〈0．05，0．01）；稳定期组高于正常对照组，差异有统计学意义（t=2．11，P〈0．05）。③COPD急性加重期组MMP-9／TIMP-1比值高于稳定期组、正常对照组，差异有统计学意义（t=2．51，2．11，Pd0．05）；稳定期组低于正常对照组，差异无统计学意义（t=-0．39，P〉0．05）。2．COPD急性加重期组MMP-9水平与FEV。％pred呈负相关（r=-0．37，Pd0．05）；与RV／TLC或吸烟程度呈正相关（r=0．39，0．41，P〈0．05）：COPD稳定期血清MMP-9水平与FEV1％pred或RV／TLC无相关性（r=0．25，-0．26，P〉0．05）；与吸烟程度正相关（r=0．50，P〈0．05）。3．COPD急性加重期组TIMP-1水平与FEV。％pred呈明显负相关（r=-0．51，P〈0．01）；与RV／TLC或吸烟程度无相关性（r=0．36，0．28，P〉0．05）。COPD稳定期组TIMP-1水平与FEV。％pred、RV／TLC或吸烟程度无相关性（r=0．18，-0．15，0．17，P〉0．05）。4．COPD急性加重期及稳定期组血清MMP-9／TIMP1与FEV。％pred、RV／TLC或吸烟程度均无相关性（r=0．19，～0．02，0．06，0．17，-0．23，0．38，P〉0．05）。结论1．MMP-9、TIMP-1及MMP-9／TIMP-1在COPD发病中起重要作用。2．MMP-9、TIMP-1可直接影响COPD急性加重期患者的肺功能水平。3．MMP-9水平与吸烟量关系密切，可能在吸烟导致的COPD发病中起重要作用。

三叶青水提物对慢性阻塞性肺疾病MMP-9和TIMP-1的影响

目的观察三叶青水提物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠基质金属蛋白酶9(Matrix met alloproteinases-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(Matrix met alloproteinases inhibitor-1,TIMP-1)的影响,探讨三叶青对大鼠肺组织的作用机制。方法选择烟熏加气管内滴注内毒素(LPS)法复制COPD模型,将清洁级健康SD雄性大鼠30只,随机分为3组分别为对照组、模型组和三叶青组,每组10只。造模成功后肺组织采用HE染色观察病理改变,采用免疫组织化学方法测定大鼠肺组织中MMP-9和TIMP-1的表达,酶联免疫吸附法测定大鼠血清、支气管肺泡灌洗液和肺匀浆组织中MMP-9和TIMP-1的表达。结果光学显微镜下可见三叶青组大鼠炎症较模型组有所减轻。酶联免疫吸附法检测结果显示,模型组大鼠肺组织、血清和支气管肺泡灌洗液中MMP-9和TIMP-1含量较对照组显著增加(P<0.05),三叶青组的MMP-9和TIMP-1含量较模型组显著下降(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示,与对照组比较模型组肺组织中的MMP-9和TIMP-1表达明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较三叶青组肺组织中的MMP-9和TIMP-1表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论三叶青可能通过下调MMP-9、TIMP-1表达,调节MMP-9/TIMP-1失衡,进而干预气道重塑,延缓病变进展,这可能是其治疗COPD的作用机制之一。

参七化痰方含药血清对TGF-β1刺激下气道平滑肌细胞Snail、Slug、MMP-9、TIMP-1水平影响研究

目的观察参七化痰方(SQHT)含药血清对转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激下气道平滑肌细胞锌指转录因子Snail、锌指转录因子Snail2(Slug)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)水平的影响。方法选择生长良好的气道平滑肌细胞(ASMCs),随机分为5组,分别为对照组、模型组、10%SQHT组、法舒地尔(Fasudil)组、10%SQHT+Fasudi组。TGF-β1刺激造模后,Western blot检测Snail、Slug蛋白水平的表达;实时荧光定量PCR检测Snail mRNA、Slug mRNA水平的表达;采用酶联免疫吸附试验定量测定细胞上清液MMP-9、TIMP-1水平的变化。同时观察SQHT对上述指标的影响。结果TGF-β1干预后,与对照组比较,模型组Snail、Slug蛋白、mRNA,MMP-9,TIMP-1表达水平上升(P<0.01);与模型组比较,10%SQHT组、Fasudil组与10%SQHT+Fasudil组Snail、Slug蛋白、mRNA,MMP-9,TIMP-1表达水平均显著下降(P<0.01);各治疗组组间比较,其中以10%SQHT+Fasudil组Snail、Slug蛋白、mRNA,MMP-9,TIMP-1表达水平下降最为显著(P<0.01)。结论SQHT可能通过抑制Snail和Slug转录因子在TGF-β1刺激下的转录和表达,从而抑制MMP-9和TIMP-1的分泌,进而改善气道重塑。

慢性牙周炎和慢性阻塞性肺疾病共同生物学机制及危险因素的研究进展

近年来众多研究认为慢性牙周炎(CP)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)密切相关,两者常常相互伴随、相互影响。CP和COPD都是慢性感染性疾病,且都常见于高龄人群。多项研究发现两者在发病机制上有许多共同之处,如中性粒细胞浸润与聚集、蛋白酶/抗蛋白酶失衡及氧化应激都参与两种疾病的发病过程。此外,吸烟、性别差异、文化程度及经济情况等都是两者公认的危险因素,在两种疾病的发生发展过程中扮演重要角色。因此,研究CP与COPD的共同生物学机制及危险因素,对两种疾病的共同预防和治疗有重要意义。

细胞凋亡与慢性阻塞性肺疾病的相关性研究

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的发病率及死亡率都非常高,并且经济负担重,其发病机制至今仍未非常清楚。本文综述除慢性炎症、蛋白酶失衡、氧化与抗氧化失衡3种机制以外的近年来新发现的另一机制——细胞凋亡-抗凋亡失衡机制,这一机制在COPD患者慢性炎症细胞、肺内实质及间质细胞凋亡异常,以及与之前3种机制的相互联系。