疏肝和胃降逆汤对胃食管反流病肝胃不和证患者食管黏膜蛋白酶激活受体-2及环氧合酶-2蛋白表达的影响

目的:探讨疏肝和胃降逆汤对胃食管反流病(GERD)肝胃不和证患者食管黏膜蛋白酶激活受体-2(PAR-2)及环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达的影响。方法:选取2015年1月至2016年1月辽宁中医药大学附属医院收治GERD患者178例作为研究对象,以随机数表法分为观察组和对照组,每组89例。2组均给予奥美拉唑肠溶片治疗,观察组在此基础上给予疏肝健脾和胃方治疗。观察2组基线期和治疗后12周(治疗后)反流性疾病问卷(RDQ)症状积分及食管黏膜PAR-2及COX-2蛋白表达变化。结果:基线期,2组RDQ症状积分、食管黏膜PAR-2及COX-2蛋白表达基本相同,差异无统计学意义(P> 0. 05);治疗后,观察组RDQ症状积分、食管黏膜PAR-2及COX-2蛋白表达显著低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。观察组RDQ症状积分与食管黏膜PAR-2及COX-2蛋白表达正相关(P <0. 05),对照组RDQ症状积分与食管黏膜PAR-2及COX-2蛋白表达无明显相关性(P> 0. 05)。结论:奥美拉唑肠溶片联合温阳活血汤治疗胃食管反流病肝胃不和证具有较好的疗效,其机制可能是通过降低患者食管黏膜PAR-2及COX-2蛋白表达而起治疗作用。

肥大细胞及蛋白酶激活受体-2在肠易激综合征中的作用

目的:探讨肥大细胞及蛋白酶激活受体-2(protease activated receptor-2,PAR-2)在肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)中的作用.方法:2012-01/2012-12自南京医科大学附属南京医院消化内科门诊随机选取腹泻型IBS患者60例及正常者30例,采用免疫组织化学检测各组肥大细胞、PAR-2蛋白的表达强度;采用Western blot检测各组Occludin的表达量.结果:免疫组织化学法结果显示IBS-D组与对照组相比,肥大细胞表达明显增多(5.20±2.78vs 1.40±0.55,P<0.05);PAR-2蛋白的表达明显增多(3.20±1.64 vs 1.20±0.45,P<0.05);Western blot结果示IBS-D组Occludin蛋白的表达明显低于正常组(2108.33±59.58 vs 3113.00±77.74,P<0.01).结论:本研究提示IBS-D患者肥大细胞过表达、激活后可刺激PAR-2活化,从而进一步损伤细胞间紧密连接.

蛋白酶激活受体-2在原发性肝癌组织中的表达

目的:研究蛋白酶激活受体-2(PAR-2)在原发性肝癌(PHC)中的蛋白表达水平,并探讨其临床价值.方法:采用免疫组织化学和免疫荧光技术检测41例PHC患者癌组织和癌旁正常组织中PAR-2的蛋白表达水平.结果:PAR-2在PHC组织及癌旁正常组织中均有不同程度的表达,癌旁组织主要表现为核周胞质染色,而肝癌组织呈弥漫性胞质染色.PHC与癌旁组织的表达差异具有显著性意义(92.67±8.53vs57.52±7.31,P<0.05);不同组织学类型的肝癌表达不均衡,肝细胞癌高于胆管细胞癌,但差异无统计学意义(141.05±18.36vs112.10±10.05,P>0.05);肿瘤转移者高于无转移者,差异有统计学意义(167.83±8.91vs73.25±4.05,P<0.05).结论:PAR-2在PHC中高表达;PAR-2的表达与PHC的发生和发展密切相关.

银杏达莫注射液对机械通气所致肺损伤大鼠蛋白酶激活受体-2表达的影响

目的观察银杏达莫注射液对机械通气相关性肺损伤（VILI）肺组织蛋白酶激活受体-2（PAR-2）表达的影响。方法21只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、过度通气组、银杏达莫干预组，每组7只。所有大鼠均行气管切开插管、右颈总动脉穿刺置管术；对照组不进行机械通气；过度通气组及银杏达莫组大鼠气管插管外接动物呼吸机，通气3h。银杏达莫干预组大鼠于实验前24h腹腔注射银杏达莫注射液1．6mL／kg，机械通气开始时尾静脉注射等剂量银杏达莫注射液。制模成功后测定大鼠血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-8（IL-8）水平；取肺组织，光镜下观察病理学变化并进行损伤病理评分，用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组化法检测肺组织PAR-2的mRNA和蛋白表达水平；用Pearson相关性分析法分析肺组织PAR-2mRNA和蛋白表达水平与细胞因子含量的相关性。结果与对照组比较，过度通气组TNF-α、IL-8、肺组织病理学评分及PAR-2mRNA和蛋白[吸光度（A）值]表达水平均较对照组明显升高[TNF-α（ng／L）：394．37±45．72比127．34±14．83，IL-8（ng／L）：407．58±22．54比167．28±16．81，病理学评分（分）：12．14±1．57比1．00±0．82，PAR-2mRNA（灰度值）：1．249±0．095比0．513±0．049，PAR-2蛋白（A值）：167．84±5．61比107．84±1．57；与过度通气组比较，银杏达莫干预组TNF-α、IL-8、肺组织病理学评分及PAR-2mRNA和蛋白表达水平均明显降低（分别为334．59±10．27比394．37±45．72、374．76±13．86比407．58±22．54、10．57±0．98比12．14±1．57、1．133±0．095比1．249±0．095、158．44±7．82比167．84±5．61），差异均有统计学意义（均P〈0．05）。光镜下过度通气组肺组织结构破坏，肺泡腔内大量出血，肺泡壁见明显充血和炎症细胞浸润，伴有不同程度肺泡腔实变和肺不张；银杏达莫干预组肺组织病理结构改变较过度通气组有一定程度的改善。相关分析显示：PAR-2mRNA与TNF-α、IL-8呈正相关（r值分别为0．971、0．969，均P〈0．001）；PAR-2蛋白与TNF-α、IL-8亦呈正相关（r值分别为0．958、0．980，均P〈0．001）。结论银杏达莫注射液可能通过抑制炎性因子及PAR-2的表达而对VILI过程中肺组织产生保护作用。

新辅助化疗对乳腺癌组织因子、基质金属蛋白酶-9和蛋白酶激活受体-2的表达及疗效的影响

背景与目的:组织因子(tissue factor,TF)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)是影响乳腺癌转移和预后的重要因子,蛋白酶激活受体-2(proteinaseactivated receptor-2,PAR-2)是二者之间的介导因子。本研究旨在探讨乳腺癌组织中TF、PAR-2和MMP-9表达的变化与乳腺癌新辅助化疗疗效的关系。方法:应用二步法免疫组织化学方法检测85例乳腺癌新辅助化疗前后乳腺癌组织中TF、PAR-2和MMP-9的表达,分析新辅助化疗前后其表达的变化与新辅助化疗疗效的关系。结果:85例乳腺癌新辅助化疗患者病理完全缓解率(G5)为8.3%,其他患者在新辅助化疗后TF、PAR-2和MMP-9阳性率均降低,其中MMP-9显著降低(P<0.05)。新辅助化疗后,MMP-9表达阳性减弱的患者病理疗效显著好于阳性增强者(P<0.05);TF、MMP-9由阳性转为阴性患者的病理疗效显著好于由阴性转为阳性患者(P<0.05)。PAR-2的改变则与病理疗效无显著关系。结论:乳腺癌新辅助化疗后TF、MMP-9的阳性表达降低与病理缓解率相关,有助于判断新辅助化疗疗效。

蛋白酶激活受体-2激动药对重症急性胰腺炎大鼠肠道SIgA的影响

目的研究重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠黏膜免疫屏障的变化及蛋白酶激活受体(PAR)-2激动药对其的影响。方法制备SAP大鼠模型,采用PAR-2激动药进行预处理,检测假手术组、模型组及预处理组造模后6,12,24 h大鼠小肠黏液分泌性免疫球蛋白A(SIgA),小肠组织病理学、小肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6。组间数据比较采用单因素方差分析,小肠组织TNF-α、IL-6与小肠黏液SIgA,小肠组织病理学评分之间的相关性采用线性相关分析。结果模型组与假手术组相比,随造模时间的延长,小肠黏液SIgA浓度降低,小肠组织病理学评分及小肠组织TNF-α、IL-6水平升高(P<0.05),预处理组与模型组相比,小肠黏液SIgA浓度升高,小肠组织病理学评分及小肠组织TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05),小肠组织TNF-α、IL-6水平与小肠组织病理学评分具有明显的正相关(P<0.01),与小肠黏液SIgA之间具有明显的负相关(P<0.01)。结论 SAP大鼠早期即发生肠黏膜免疫功能下降,免疫屏障受损;SLIGKV-NH2预处理SAP大鼠后,能显著降低小肠局部主要炎症因子水平,改善肠黏膜免疫屏障损伤程度。

胆胃方对十二指肠食管反流模型大鼠蛋白酶激活受体-2及E-钙黏蛋白的影响

目的观察胆胃方对十二指肠食管反流模型大鼠蛋白酶激活受体-2(PAR-2)及E-钙黏蛋白的影响,探讨胆胃方治疗十二指肠食管反流的作用机制。方法选取72只SD大鼠,根据随机数字表法将其分为正常组、模型组、西药组和胆胃方低、中、高剂量组,各12只,采用“贲门缝合+食管十二指肠吻合术”制备十二指肠食管反流模型。胆胃方低、中、高剂量组分别予胆胃方1.46、2.92、5.84 g/ml,西药组予枸橼酸莫沙比利、铝碳酸镁混合溶液,模型组予生理盐水灌胃,按1 ml/100 g剂量灌胃,每日灌胃1次,共4周。观察食管下段黏膜形态及病理变化,免疫组化测定PAR-2及E-钙黏蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠洛杉矶分级积分及病理分级积分升高(P<0.05);与模型组比较,西药组、胆胃方低剂量组大鼠洛杉矶分级积分及病理分级积分降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠食管组织PAR-2、E-钙黏蛋白平均光密度值升高(P<0.05);与模型组比较,西药组、胆胃方低剂量组及胆胃方中剂量组大鼠食管组织PAR-2平均光密度值降低(P<0.05),西药组、胆胃方低剂量组大鼠食管组织E-钙黏蛋白平均光密度值降低(P<0.05);与胆胃方低剂量组比较,胆胃方中、高剂量组大鼠食管组织PAR-2、E-钙黏蛋白平均光密度值升高(P<0.05)。结论胆胃方能改善模型大鼠食管黏膜损害,对十二指肠食管反流具有一定治疗效果。

蛋白酶激活受体-2激动剂对人皮肤和扁桃体肥大细胞释放组胺和类胰蛋白酶的影响

目的:研究蛋白酶激活受体2(PAR- 2)激动剂对人皮肤和扁桃体肥大细胞释放组胺和类胰蛋白酶的影响.良し⒕感〉娜似し艉捅馓姨宸蚀笙赴?并分别测量类胰蛋白酶和组胺的释放量. 结果: PAR -2激动剂丝亮异亮甘赖缬(SLIGKV)可引起皮肤肥大细胞组胺释放,但对类胰蛋白酶释放无影响. 相反,SLIGKV可引起扁桃体肥大细胞的类胰蛋白酶,而不是组胺释放. 另外一种PAR -2激动剂反肉桂酰亮异亮甘精亮鸟[酰胺] (tc- LIG- RLO- NH2 )比SLIGKV -NH2 诱导类胰蛋白酶和组胺释放的作用弱. 结论: 我们首次报道了皮肤和扁桃体肥大细胞具有在体外释放类胰蛋白酶的特性. 皮肤和扁桃体肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的差别揭示了一种新的肥大细胞对刺激产生反应的异质性的类型,提示人类肥大细胞至少有2种脱颗粒信号的自我放大机制.

蛋白酶激活受体-2对动脉粥样硬化斑块发展和稳定性作用的实验研究

目的:探讨蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对动脉粥样硬化斑块发展和稳定性的影响。方法:将32只6周龄雄性Apo E-/-小鼠随机分为对照组、实验组,每组16只。两组均给予高脂饮食建立动脉粥样硬化模型,连续喂养14周。实验组给予腹腔注射SLIGRL-NH2(5μmol·kg^(-1)·d^(-1)),对照组给予腹腔注射0.9%生理盐水,持续喂养至24周,处死小鼠并收集相关检测标本进行检测,采用酶法检测血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C),采用免疫组化检测巨噬细胞表面分子抗-2(Mac-2)、α平滑肌激动蛋白(α-SMA)、血小板-内皮细胞粘附分子(CD-31)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、血管细胞间粘附分子-1(VCAM-1),采用RT-PCR检测TNF-α、γ干扰素(IFN-γ)、IL-6、Egr-1、MCP-1等炎症因子mRNA表达。对比分析两组小鼠各项检测结果差异。结果:32只小鼠动脉粥样硬化模型建模成功率为93.75%(30/32),实验组小鼠PAR-2 mRNA表达明显高于对照组(P﹤0.05),两组小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C浓度及体质量(BW)差异无统计学意义(P﹥0.05),实验组小鼠动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度小于对照组,斑块核心坏死率、Mac-2、α-SMA、CD-31、MMP-9、MMP-13、VCAM-1等检测结果明显高于对照组(P﹤0.05),实验组TNF-α、IFN-γ、IL-6、Egr-1、MCP-1等炎症因子mRNA表达相对水平明显高于对照组(P﹤0.05)。结论:PAR-2激动剂能通过激活PAR-2促进小鼠动脉粥样硬化斑块发生发展,加快斑块内的炎症反应。

蛋白酶激活受体-2基因mRNA在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的转录分析

蛋白酶激活受体-2(Protease-activated receptor-2,PAR-2)是表达于角质化细胞的膜受体蛋白之一,经证实参与黑色素颗粒的胞间转运,本文通过分析PAR-2基因在不同毛色羊驼皮肤组织中的mRNA转录水平,以期从色素颗粒转运角度研究羊驼不同颜色被毛形成机制。以4头成年白色羊驼和4头棕色羊驼为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术,对PAR-2在白色和棕色羊驼皮肤中的mRNA表达水平进行研究。结果显示,PAR-2基因mRNA在棕色羊驼皮肤组织中的相对基因表达量是白色羊驼的2.43倍。结果提示,PAR-2基因mRNA在白色和棕色羊驼皮肤组织中的表达差异表明:毛囊黑色素细胞与角质形成细胞间色素颗粒转运水平是羊驼不同被毛颜色形成的机制之一。

过度机械通气所致大鼠肺组织损伤时蛋白酶激活受体-2的表达

目的观察不同时间点大潮气量机械通气大鼠肺组织中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)的表达,以探讨过度机械通气所致肺损伤与肺组织PAR-2水平的关系。方法 42只健康雄性SD大鼠随机分为对照组(Ad组)、小潮气量组(Ld组)、大潮气量组(H组),H组在0.5h、1h、2h和3h四个时间点再分为a、b、c、d四个亚组,各组大鼠均为7只。机械通气组中每只大鼠采用经环甲膜切开气管插管。在相应时间点用窒息法将大鼠处死,取肺组织在光镜下观察病理改变,并分别以RT-PCR、免疫组化法检测肺组织PAR-2的mRNA和蛋白表达,并以SPSS 17.0统计软件分析结果。结果与Ad组和Ld组相比,H组大鼠肺组织损伤评分明显升高(P<0.05)。PAR-2mRNA检测结果,PAR-2/β-actin在Ad组几乎不表达,Ld组可有极少量表达,H组表达明显,各组间差异有显著性(P<0.05)。PAR-2mRNA蛋白检测结果,通过图像分析系统比较各组的光密度,显示各组间差异有显著性(P<0.05)。后两种检测以Hd组变化最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大潮气量机械通气可导致正常大鼠肺组织PAR-2mRNA和蛋白表达水平增强,可能在机械通气相关性肺损伤的发生发展过程中起重要作用。

蛋白酶激活受体-2介导的呼吸道上皮细胞活化在哮喘中的作用

蛋白酶激活受体 (PAR)是近年来新发现的一个受体家族 ,其中PAR 2对呼吸道上皮细胞功能的影响及其在哮喘中的作用正受到越来越多的关注。作者就PAR 2的结构、激活剂及生物学功能 ,尤其是PAR

蛋白酶激活受体-2与消化系统疾病的研究进展

蛋白酶激活受体-2(protease activated receptor-2,PAR-2)属于G蛋白耦联受体,具有蛋白酶受体家族较特异的分子结构与激活方式,广泛分布于胃肠道,可被多种蛋白酶激活,产生多种生物学效应,包括影响多种消化腺的分泌,具有胃黏膜保护作用,影响胃肠道运动,参与胰腺炎的发生、发展,与消化道恶性肿瘤密切相关.PAR-2与消化系统疾病的关系正成为当前研究的一个热点.

蛋白酶激活受体-2激动剂在应激性溃疡中的作用

目的:探讨大鼠蛋白酶激活受体-2在应激性溃疡中的作用.方法:建立大鼠水浸束缚应激模型,肉眼计算胃黏膜溃疡指数(UI);取动脉血和胃液做血气分析计算胃黏膜内pH值(pHi);应用分光光度计检测胃黏膜氨基己糖;采用放射免疫方法检测血浆中6-酮前列腺素F1α(6-K)和血栓素B2(TXB2);观察胃组织病理形态学变化.结果:PAR-2激动剂组pHi(4.71±0.23vs4.53±0.11,P<0.05)、氨基己糖(5.26±1.48g/kgvs1.19±0.58g/kg,P<0.05)、6-K(856.92±165.21ng/Lvs654.50±221.31ng/L,P<0.05)高于阴性对照组,TXB2(338.67±12.91ng/Lvs378.89±15.10ng/L,P<0.05)、UI(37.50±24.42vs69.00±33.27,P<0.05)低于阴性对照组.除6-K(856.92±165.21ng/Lvs687.60±219.50ng/L,P<0.05)外,PAR-2激动剂组与奥美拉唑组相比其他参数差异无统计学意义(P>0.05),并且两组病理形态学观察均表现为无明显血栓形成.结论:蛋白激酶受体-2激动剂通过促进胃黏液分泌、舒张血管起到保护胃黏膜的作用,其机制可能是激活辣椒素敏感性感觉神经元.

RANTES对类胰蛋白酶引起的肥大细胞蛋白酶激活受体-2表达和白细胞介素-4释放的影响

目的检测RANTES对类胰蛋白酶引起的肥大细胞白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)分泌和蛋白酶激活受体(protease activated receptor,PAR)-2表达的影响。方法 P815肥大细胞培养后,用不同浓度的RANTES、类胰蛋白酶单独或联合激发肥大细胞,不同时间点收集激发细胞和上清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IL-4水平,用流式细胞术检测P815肥大细胞表面PAR-2的表达。结果 RANTES单独作用对肥大细胞IL-4分泌无明显影响,而类胰蛋白酶单独作用则以浓度依赖方式促进肥大细胞IL-4释放(P<0.01);RANTES或类胰蛋白酶单独作用对肥大细胞PAR-2表达均无明显影响(P>0.25)。以RANTES预处理肥大细胞,则类胰蛋白酶促进肥大细胞IL-4释放的作用被显著抑制(P<0.01);而类胰蛋白调节的肥大细胞PAR-2表达显著增强(P<0.01)。结论 RANTES抑制类胰蛋白酶引起的肥大细胞IL-4分泌可能是通过RANTES增强类胰蛋白酶调节PAR-2表达而实现。

蛋白酶激活受体-2与胃肠道运动和感知的研究进展

蛋白酶激活受体-2(proteinase-activated receptor,PAR)是G蛋白耦联受体家族成员之一,遍布整个胃肠道上皮细胞表面,易暴露于能使其激活的蛋白酶中,是体内许多消化道腺体外分泌的直接调控者,直接影响胃肠道动力。目前,蛋白酶激活受体独特的激活方式及其在消化系统中的广泛分布和复杂多样的生理作用,特别是蛋白酶激活受体-2与胃肠运动和感知的关系正受到广泛关注。

蛋白酶激活受体-2在中枢神经系统的双重作用

蛋白酶激活受体-2是一种细胞膜表面受体,属于G蛋白偶联受体家族,广泛分布于全身多种组织器官,激活后参与许多疾病的发生和发展过程,尤其在中枢神经系统中所起的作用受到人们越来越多的关注。

银杏达莫联合甲基强的松龙对机械通气所致肺损伤大鼠肺组织蛋白酶激活受体-2的表达及肺组织病理结构改变的影响

目的观察银杏达莫联合甲基强的松龙对机械通气所致肺损伤(VILI)大鼠肺组织蛋白酶激活受体-2(PAR-2)表达及其对肺组织病理结构的影响,为其在肺损伤过程中的临床应用提供理论依据。方法取112只健康雄性SD大鼠,随机分为四大组各28只,对照组(A组)、机械通气肺损伤组(H组)、机械通气肺损伤+甲基强的松龙组(D组),机械通气肺损伤+甲基强的松龙+银杏达莫组(F组)。机械通气组中每只大鼠采用经环甲膜切开气管插管。各组于机械通气开始时从尾静脉注入等量生理盐水。各组又分为0.5h、1h、2h、3h分为4个亚组,在各时间点用窒息法将大鼠处死,取肺组织在光镜下观察病理改变,PCR法检测PAR-2mRNA的表达,免疫组化检测肺组织PAR-2蛋白的表达,并以SPSS 17.0统计软件分析结果。结果 A组和H组相比,H组大鼠的肺组织损伤评分、PAR-2蛋白表达明显升高(P<0.01);与H组相比,D、F组大鼠肺组织损伤评分、PAR-2蛋白的表达明显降低(P<0.05),以F组降低为甚,差异具有统计学意义。结论机械通气所致肺损伤过程中PAR-2的表达明显升高,银杏达莫及甲基强的松龙可能通过抑制炎性反应及PAR-2的表达而在机械通气所致肺损伤过程中起保护作用。

蛋白酶激活受体-2在大鼠体内体外脑缺血模型中的作用研究

目的研究蛋白酶激活受体-2(PAR-2)在大鼠体内外脑缺血模型中的作用。方法以PAR-2激活肽(AP)和拮抗剂(Anta)为工具药,使用大脑中动脉阻塞和氧糖剥夺的方法分别建立大鼠和大鼠胚胎脑皮质神经元的缺血模型,观察PAR-2在缺血损伤中的作用及表达变化。用肌动描记器记录PAR-2对正常或来自脑缺血大鼠的大脑中动脉(MCA)血管张力的影响。结果蛋白质印迹法表明PAR-2在缺血侧大脑皮质中表达增多,缺血前给予PAR-2 AP(SLIGRL-NH2)显著改善了体内和体外模型缺血导致的损伤,且能够被PAR-2 Anta(ENMD-1068)所抑制。PAR-2 AP能够使MCA产生一氧化氮依赖性舒张,但是不能被ENMD-1068所抑制。结论 PAR-2有望作为预防性治疗脑缺血疾病的靶点进行研究,ENMD-1068能够抑制SLIGRL-NH2对脑缺血的保护作用。

肥大细胞及蛋白酶激活受体-2与肝纤维化

近年来研究表明肥大细胞与肝纤维化的发生发展有密切关系,但其具体作用途径不甚明确,目前推测肥大细胞可能通过蛋白酶激活受体-2途径在肝纤维化中发挥重要作用。现将肥大细胞、蛋白酶激活受体-2与肝纤维化的有关进展作一综述。