蛋白酶生产菌对均四甲苯降解特性的研究

为探讨均四甲苯的微生物处理方法,研究了本实验室筛选的蛋白酶生产菌J6对均四甲苯的降解特性。将J6接入装有50mL发酵液的250mL摇瓶中,发酵液中均四甲苯含量为50g.L-1。将摇瓶置于30℃,180r.min-1的摇床中培养,分析均四甲苯对微生物生长进程的影响,以及微生物生长过程中均四甲苯的含量变化。结果表明:该菌在含有均四甲苯的培养基中能稳定生长,且比不含均四甲苯的培养基具有更长时间的稳定生长期(在实验室条件下长达200h);对发酵液的分析表明,该菌在发酵11h后,发酵液中均四甲苯的含量迅速降至0.746g.L-1,24h内降解率达91.6%。可见,J6菌能有效降解均四甲苯,有望将该菌用于含均四甲苯废水的处理中。

提高AS1.398中性蛋白酶发酵水平的研究

对中性蛋白酶生产菌AS1.398采用紫外线照射和亚硝基胍复合诱变,从上千株菌选出138株菌,用平皿快速检出法和Folin法测定酶活力,并经过复筛最终获得6株高产菌株,其中NP-72菌的酶活力达到10606u/mL,比原菌提高49%。对NP-72菌纯化分离获得NP-72-7菌,经发酵工艺优化,其摇瓶产酶活力达到11361u/mL,比原菌株提高了59.5%。

蛋白酶在羊毛纤维改性方面的应用

1蛋白酶应用技术概况 1．1蛋白酶的应用历史和现状 蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、植物果实和微生物中，自上世纪被人们发现以来，发展迅速并在工业生产中得列广泛应用。蛋白酶商品生产始于20世纪初，1908年德国Rohm等人开始用胰酶进行鞣革前的软处理；1911年美国华勒斯坦公司生产了作为啤酒澄清剂的木瓜蛋白酶；30年代微生物蛋白酶开始用在食品和制革工业。1950年后，日本学者首先发现霉菌中存在几种类型的蛋白酶，还发现了从链霉素发酵液中回收蛋白酶的方法。20世纪60年代初，荷兰开始在洗涤剂中添加碱性蛋白酶，同时结合生产实际的需要开展了耐热、耐酸、耐盐性蛋白酶生产菌的选育，并开始了以石油为原料发酵生产碱性蛋白酶的研究。随后酶制剂被广泛的应用于洗涤产品中，出现了加酶洗衣粉。如今蛋白酶不但应用于洗涤行业，还在制革、纺织、医药、环保等工业都得到了广泛的应用。目前，在世界范围内蛋白分解酶是工业酶种中用得最多的一种酶，约占酶总量的60％，它在商业中的巨大应用前景和基础研究中的重要作用，吸引着国际国内的许多公司和研究单位竞相对其进行多方面的研究。

微生物转化浮萍资源生产蛋白酶的条件

利用微生物转化富含蛋白质的浮萍生产蛋白酶,为浮萍的高值化利用开辟一条新途径。在摇瓶转化的基础上,探索在5L发酵罐上沙雷氏菌（Serratiasp.）SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳转化条件。通过对温度、通风量、搅拌转速、pH等参数的研究,发现在5L发酵罐上,沙雷氏菌SYBC H转化浮萍生产蛋白酶的最佳条件为通风量6vvm,搅拌转速400r/min,发酵温度30℃。转化过程中,采用全自动控制pH值（9.0）,蛋白酶的产量比不控制pH的对照组提高了23.3%。进一步研究发现,利用微生物沙雷氏菌SYBC H转化浮萍生产的蛋白酶具有耐有机溶剂的特性,在某些亲水性有机溶剂中保留90%以上的活性,是一种稀少珍贵的极端酶。

Serratia sp. SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的研究

以富含蛋白质的浮萍作为有机氮源,接种一株通过自然筛选而得的新颖菌株Serratia sp.SYBC H,进行微生物发酵生产稀有的蛋白酶,为浮萍的高值化利用开创一条新途径。先采用单因素实验,研究影响Serratia sp.SYBC H发酵浮萍生产蛋白酶的发酵时间,碳源,C/N比,无机盐,产酶添加剂,结果发现:以小麦粉为碳源,小麦粉与浮萍比例为1:2,Na Cl,表面活性剂吐温80,显著促进Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶。接着采用正交试验,研究影响Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶的发酵培养基的主要组成及其使用量。结果显示,在实验范围内,影响Serratia sp.SYBC H生产蛋白酶的发酵培养基组成及其最佳使用量为小麦粉15 g/L,浮萍30 g/L,吐温80,0.8%(V/V),Na Cl 0.05 mol/L。接种发酵18 h后,蛋白酶的生产值达到最大值,发酵液中最高蛋白酶活达到1459.94U/mL。

中国南海硇洲岛潮间带产胞外蛋白酶的可培养海洋真菌多样性(英文)

【目的】研究中国南海硇洲岛潮间带产胞外蛋白酶的可培养海洋真菌多样性。【方法】从中国南海硇洲岛潮间带采集海水和沉积物样品,采用分离培养、蛋白酶生产菌平板检测法和基于内转录间隔区1-5.8S rRNA基因内转录间隔区2(ITS1-5.8S-ITS2)序列的系统进化分析法,研究产胞外蛋白酶真菌的多样性。【结果】采用50%海水配制的马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)固体培养板从所采集的样品中分离、纯化并收集了198株真菌分离株,并采用ITS1-5.8S-ITS2序列PCR扩增、测序、BLAST和系统进化分析的方法成功鉴定了其中的178株。其中,有10株的ITS1-5.8S-ITS2序列与其在NCBI数据库中最匹配的ITS1-5.8S-ITS2序列的一致性<97,表明它们有可能是新的物种;其余168株的ITS1-5.8S-ITS2序列与NCBI数据库中已存在的相关ITS1-5.8S-ITS2序列的一致性均≥98%。这178株真菌归属为66个种,分布在子囊菌门和担子菌门的6纲,16个目,27个科的45个属中。其中的主要属为青霉菌属,占28.70%;其次为曲霉属,占11.24%。有83株真菌在加在脱脂奶粉的PDA固体培养板上的菌落周围有一透明圈,表明其可产生分泌胞外蛋白酶。【结论】从中国南海硇洲岛潮间带共分离、鉴定和收集了178株真菌,其中10株可能是新的物种,83株为胞外蛋白酶生产菌。