泛素-蛋白酶体系统在寄生原虫生长发育中的调控作用及潜在药物靶点分析

蛋白质降解是细胞维持正常生命活动的重要途径之一,其中泛素-蛋白酶体系统发挥关键作用。泛素-蛋白酶体系统参与调控细胞分化、细胞凋亡、DNA复制、蛋白质质量控制等生命活动。研究表明,对该系统中的功能蛋白进行干预,可直接影响寄生原虫的生长发育。本文主要探讨近年关于泛素-蛋白酶体系统在寄生原虫生长分化过程中发挥的关键作用,揭示其作用靶点,为开发新型抗原虫药物提供思路。

中医药干预慢性阻塞性肺疾病蛋白酶-抗蛋白酶失衡机制的研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机制涉及炎症反应、氧化应激、蛋白酶/抗蛋白酶系统失衡等,其中蛋白酶与抗蛋白酶系统失衡为COPD的主要发病机制之一。增多的蛋白酶可通过参与炎症反应、降解细胞外基质、重塑气道等对肺组织造成破坏。近年来,中医药以蛋白酶-抗蛋白酶失衡为切入点,开展了大量的临床研究及基础实验,积累了丰硕的成果。

泛素-蛋白酶体系统与神经系统疾病的研究进展

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是一种内部蛋白质分解机制,是细胞一系列生命过程的重要调节器,可处理大部分细胞的蛋白质周转,可去除老化、损坏和错误折叠的蛋白质,与各种疾病的发生发展密切相关。近年来各个领域对该系统的研究已渐渐成为热点,多项研究表明UPS的异常变化与炎症、糖尿病、肝肾疾病、肿瘤等疾病的发生有关,与神经系统疾病也有着密不可分的联系。本文就泛素-蛋白酶体系统的组成及其在神经系统疾病中的作用和治疗进展进行综述。

复方地黄颗粒通过泛素-蛋白酶体系统治疗PD阴虚动风证大鼠的分子机制研究

目的探讨复方地黄颗粒通过调节泛素-蛋白酶体系统相关蛋白变化治疗帕金森病(PD)阴虚动风证的分子机制。方法随机选取26只SPF级雄性SD大鼠作为正常对照组、假手术组,每组13只,其余大鼠采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)脑部偏侧注射损毁黑质法制备PD阴虚动风证大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,美多芭组(150 mg·kg^(-1)),复方地黄颗粒低、中、高剂量组(1.75、3.5、7 g·kg^(-1)),每组13只。各组连续灌胃给药28 d。观察各组大鼠一般情况及神经行为学表现;免疫组化法、Western blot及qPCR法检测各组大鼠脑部损毁侧纹状体组织中泛素(UB)、泛素激活酶(UBE1)、泛素结合酶(UBE2A)、泛素羧基末端水解酶(UCH-L1)阳性细胞表达、蛋白及mRNA表达水平;ELISA法检测各组大鼠脑部损毁侧纹状体中多巴胺(DA)含量变化。结果正常对照组与假手术组一般情况无明显差异,旋转圈数、悬挂时间及移动格数差异无统计学意义,与假手术组比较,模型组大鼠精神差,易激惹,肢体震颤,行动迟缓,毛色黯黄,饮食少,体质量减轻,旋转圈数增加、悬挂时间及移动格数减少(P<0.01),损毁侧纹状体中UB、UBE1、UBE2A、UCH-L1阳性细胞表达、mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),DA含量明显减少(P<0.01);与模型组比较,美多芭组及复方地黄颗粒各剂量组大鼠一般情况有所改善,旋转圈数减少、悬挂时间及移动格数增加(P<0.05,P<0.01),UB、UBE1、UBE2A、UCH-L1阳性细胞表达、mRNA及蛋白表达水平提高(P<0.05,P<0.01),DA含量增加(P<0.01);行为学检测及各指标表达水平以美多芭组和复方高剂量组改善最明显(P<0.05,P<0.01),此二者无统计学意义(P>0.05)。结论复方地黄颗粒可能通过调控泛素-蛋白酶体系统相关蛋白的表达,减少异常蛋白聚集,从而减轻DA含量缺失,发挥治疗PD阴虚动风证的作用,并以复方地黄颗粒高剂量效果最佳。

血清基质金属蛋白酶-3、-9的检测及其与系统性红斑狼疮活动性的关系

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9以及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1在系统性红斑狼疮(SLE)发病机制中的作用和意义。方法:采取双抗体夹心ELISA法检测45例SLE患者及30名正常对照者血清MMP-3、MMP-9及TIMP-1水平。结果:①与正常对照者相比,患者血清MMP-3水平明显增高(P<0.01),而血清MMP-9水平明显降低(P<0.01);经糖皮质激素治疗后血清MMP-3水平下降(P<0.01),血清MMP-9水平升高(P<0.01);②SLE患者活动组、抗ds-DNA抗体阳性组、低C3血症者、低血清白蛋白血症者血清MMP-3水平高于对照组(P<0.05),而MMP-9水平低于对照组(P<0.05);SLE患者肾损害组、肺炎组患者血清MMP-3水平高于无上述表现者(P<0.01),而MMP-9水平低于无上述表现者(P<0.01);③血清TIMP-1水平在SlE组与对照组、SLE相关各组间差异均无统计学意义;④SLE患者血清MMP-3水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(P<0.01),MMP-9水平与SIEDAI呈负相关(P<0.01)。结论:MMP-3及MMP-9可能参与SLE发病机制。

泛素蛋白酶体系统在消化系统肿瘤中的研究进展

泛素蛋白酶体系(UPS)是真核细胞中降解蛋白质的重要途径,它几乎参与每一个细胞过程,并在维持体内平衡中发挥重要作用。越来越多的证据表明UPS的改变与消化道恶性肿瘤有关,包括肝癌、胃癌和结直肠癌等。研究结果发现在UPS中E2、E3和DUBs的失调在肿瘤的发生和发展中起着最显著的作用,包括促进细胞增殖、迁移、侵袭、细胞周期阻滞、提高干细胞特性以及在调控相关信号通路中发挥重要作用等。在此,我们总结了近五年关于UPS在肝癌、胃癌和结直肠癌等消化系统肿瘤中的作用,强调其在肿瘤发生发展中的意义,为治疗靶点研究和抗胃肠道肿瘤药物设计提供信息。

蛋白酶/抗蛋白酶系统与慢性阻塞性肺疾病

慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种具有气流受限特征的疾病,气流受限不完全可逆、进行性发展,与肺部对有害气体或颗粒的异常炎症反应有关。气道炎症、氧化/抗氧化失衡、蛋白酶/抗蛋白酶失衡均在COPD发病中起重要作用,但其气流受限的分子机制仍未阐明。近年来,蛋白酶/抗蛋白酶失衡与COPD发病机制的研究有很大进展,本文就此作一综述。

小鼠脑外伤模型中Nrf2与泛素-蛋白酶体系统的关系

目的 Nrf2是重要的神经保护因子,泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin proteasome system,UPS)作为一种高度特异性的细胞内蛋白降解途径,在维持基因和蛋白正常功能上发挥着重要的作用。文中初步研究脑外伤模型中Nrf2与UPS的关系。方法 42只健康雄性ICR小鼠随机数字表法分为3组:对照组,外伤+溶剂组,外伤+莱菔硫烷组,每组14只;12只Nrf2基因敲除小鼠为外伤+敲除组。外伤组采用自由落体法制备闭合性小鼠脑损伤模型,对照组仅切开头皮。外伤+莱菔硫烷组于造模后5 min予以腹腔注射莱菔硫烷5 mg/kg;外伤+溶剂组于造模后5 min予以腹腔注射同等体积的10%玉米油;造模24 h后取脑皮层,Western blot检测Nrf2、泛素化蛋白含量,同时用免疫组化、电镜分别观察Nrf2和泛素化蛋白的变化。结果与对照组相比,外伤+溶剂组中Nrf2核蛋白与泛素化蛋白表达含量均增高[(0.66±0.09)vs(0.09±0.02),(10.58±0.75)vs(3.27±0.21)],差异均有统计学意义(P<0.05);与外伤+溶剂组相比,外伤+莱菔硫烷组中核蛋白Nrf2表达明显增高[(1.22±0.14)vs(0.66±0.09)],泛素化蛋白含量则明显降低[(6.97±0.86)vs(10.58±0.75)],差异均有统计学意义(P<0.05);而外伤+敲除组中核蛋白Nrf2表达明显低于外伤+溶剂组[(0.17±0.02)vs(0.66±0.09)],泛素化蛋白含量则显著高于外伤+溶剂组[(14.35±0.65)vs(10.58±0.75)],差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化和电镜也观察到相应的泛素化蛋白的变化。结论脑外伤模型中Nrf2可能通过调节UPS来发挥保护作用。

血浆基质金属蛋白酶-9与缺血性卒中出血转化关系的系统评价

目的了解血浆基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)与缺血性卒中出血转化的关系,以便为患者选择恰当的溶栓治疗和临床应用基质金属蛋白酶抑制剂,扩大溶栓治疗时间窗以及进一步临床研究提供参考依据。方法纳入血浆MMP-9与缺血性卒中出血转化关系的临床研究,根据血浆MMP-9水平是否高于界值、随访发生出血转化的情况,或者根据是否有出血转化比较血浆MMP-9水平的临床研究,发表语种不限。按照缺血性脑血管病、MMP-9和出血转化的同义词和不同的拼写形式组成检索式分别在MEDLINE(1966～2006.4)和EMBASE(1966～2006.4)以及汉语检索工具CNKI(1977～2006.2)和万方数据库(1989～2005)检索,并根据选出文章的参考文献目录追踪检索。根据研究类型,按照预后研究方法学评价的主要标准,由两位研究者独立评价研究质量,意见不一致时请第三方协助评价。提取出血转化组和非出血转化组病例数相应的MMP-9值和logistic回归分析的OR。使用RevMan4.2和SPSS11.0进行统计学处理。结果共纳入6个研究,包括558例缺血性卒中患者,出血转化者130例(23.3%)。纳入研究的方法学质量较高。各研究间异质性较大(P<0.0001)。组间血浆MMP-9水平没有进行Meta分析,多数研究认为出血转化组血浆MMP-9水平高于无出血转化组,或某型出血转化组血浆MMP-9水平高于无出血转化组。亚组分析发现血浆MMP-9水平与出血转化独立相关,OR合并=14.45,95%CI(4.90,43.65)。结论出血转化或某亚型患者血浆MMP-9水平高于无出血转化者;MMP-9可能是出血转化的独立危险因素;但现有的研究病例数较少,上述发现还需要更多的研究予以证实。

蛋白酶-抗蛋白酶失衡在兔肺挫伤中的作用

目的 研究蛋白酶 -抗蛋白酶失衡在兔创伤性肺挫伤中的作用。方法 家兔随机分为 2组 ,创伤组 (n =8)和对照组 (n =8) ,采用兔单侧肺挫伤生物撞击模型 ,动态观察血浆中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、α1 抗胰蛋白酶 (α1 AT)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)及白介素 8(IL 8)含量变化 ;活杀动物后取肺组织比较湿 /干重比值 (W/D)、丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶 (MPO)的变化 ,观察支气管肺泡灌洗液 (BALF)中上述细胞因子和炎症介质的变化 ,进行肺组织的病理学光镜检查。结果 创伤组与对照组相比较 ,血浆和BALF中NE的活性升高、血浆α1 AT含量先降低后升高、TNF α、IL 8含量均明显升高 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,兔肺组织损伤以肺出血、水肿和中性粒细胞 (PMN)浸润为主要表现。结论 肺挫伤后 ,PMN激活并释放NE ,使蛋白酶 -抗蛋白酶失衡 ,在创伤性急性肺损伤中有重要的作用。

尿胰蛋白酶原-2对急性胰腺炎早期诊断价值的系统评价

目的评价尿胰蛋白酶原-2早期诊断急性胰腺炎的诊断价值。方法检索MEDLINE、EMBASE、中国生物医学文献数据库(CBMdisc)、中国生物医学期刊文献数据库(CMCC)、中文期刊全文数据库(CNKI)等数据库,收集关于尿胰蛋白酶原-2诊断急性胰腺炎的相关文献,进行质量评价,利用MetaDisc软件进行异质性分析、Meta分析并绘制综合受试者工作特征曲线。结果纳入符合要求的文献55篇,采用QUADAS量表进行严格的文献质量评价,Meta分析显示55篇文献结果存在轻度异质性(P=0.0987,I2=20.3%);合并敏感度为92.2%(95%可信区间91.1%～93.2%),合并特异度为94.1%(95%可信区间93.4%～94.7%),综合受试者工作特征曲线下面积为0.9784(标准误0.0023),表明其平均漏诊率和平均误诊率均较低(分别为7.8%和5.9%),检测结果为阴性时病人患急性胰腺炎的概率为0.69%。结论免疫层析法检测尿胰蛋白酶原-2是一项灵敏而特异的急性胰腺炎早期筛查指标,阴性结果基本可以排除急性胰腺炎的可能。

泛素-蛋白酶体系统与缺血性脑血管病关系的研究进展

泛素-蛋白酶体系统（ubiquitin proteasome system,UPS）是真核生物细胞内高度保守的多肽,是三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）依赖性的细胞内非溶酶体途径蛋白降解通路,在生物体内负责大多数细胞周期过程中的蛋白降解,包括凋亡、基因转录、细胞信号通路和溶酶体消化过程等[1]。蛋白酶体系统主要降解胞质和胞核内可溶性蛋白质,其特点：中性环境,无需钙离子。

泛素-蛋白酶体系统与帕金森病

目前帕金森病（PD）的病因和发病机制尚不完全清楚,可能是遗传和环境因素相互作用的结果。泛素-蛋白酶体系统（UPS）在许多与细胞周期性增殖和凋亡相关的蛋白质的降解中起重要作用。UPS可清除真核细胞内突变、损伤及异常折叠的蛋白质，起到调控蛋白质和维持细胞内环境稳定的作用。

淫羊藿苷对基因转染PC12细胞α-突触核蛋白过表达和泛素-蛋白酶体系统的影响

目的观察淫羊藿苷在体外试验中对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)及相关蛋白表达的影响及其作用机制。方法 不同浓度的淫羊藿苷与转染α-Syn基因PC12细胞共孵育24h,应用RT-PCR法检测各组细胞α-Syn mRNA含量,Western免疫印迹法检测细胞中α-Syn、泛素化蛋白羧基端水解酶(Ubiquitin C-terminal hydrolase protein,UCH-L1)和Parkin蛋白的表达,观察淫羊藿苷对它们的影响。结果 淫羊藿苷浓度40～80μmol/L与转染α-Syn基因细胞孵育24h,能够明显减少模型细胞中α-SynmRNA含量,抑制Syn蛋白表达和聚集,增强UCH-L1和Parkin蛋白表达。结论 淫羊藿苷在体外对基因转染细胞的α-Syn过表达和聚集有明显抑制作用,其作用机制与抑制α-Syn合成和增强α-Syn降解有关。

泛素-蛋白酶体系统对Aβ生成与代谢调控作用的研究进展

阿尔茨海默症(AD)是中枢神经系统退行性疾病,目前其确切发病机制未明,也无有效的治疗手段。淀粉样蛋白级联假说认为,β淀粉样蛋白(Aβ)是AD形成的关键因素。泛素-蛋白酶体系统(UPS)是胞内主要蛋白质质量控制系统,最近研究发现其可调控Aβ的生成和代谢,进而参与AD的发生。UPS可通过调控泛素化APP、β-分泌酶及γ-分泌酶各成分的代谢参与Aβ生成;同时UPS也是Aβ主要降解途径之一;而Aβ也可抑制UPS系统蛋白酶体活性。本文对此进行了综述。

基质金属蛋白酶9与神经系统疾病发展研究进展

基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9,MMP-9)是一种锌依赖性内肽酶,在神经系统生理发育及病理损伤过程中起重要作用,一方面可以降解和重塑细胞外基质(Extracellular Matrix,ECM),破坏血脑屏障(Blood brain barrier,BBB),使其通透性增加引起炎症反应,导致脑组织损伤;另一方面又可以促进血管生成,有利于神经功能的恢复。

泛素-蛋白酶体系统与精子DNA损伤修复的研究进展

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是体内广泛存在的一种蛋白酶体系统,由泛素(Ub)、泛素激活酶(E1)、泛素结合酶(E2)、泛素连接酶(E3)、26S蛋白酶体和去泛素化酶(DUBs)组成,能够调控体内蛋白降解。研究发现UPS除了蛋白降解功能以外,还参与细胞周期调控、免疫应答、信号传导以及DNA损伤修复等过程。精子发生要经历染色体联会、同源重组等过程,精子DNA在这些过程中易受干扰而出现损伤。近年来研究发现,UPS与精子发生当中的DNA损伤修复有关。UPS参与DNA损伤的修复机制包括:泛素化调节DNA损伤修复相关酶类、协助识别DNA损伤位点、募集损伤修复相关蛋白、启动DNA损伤修复途径、维持染色体稳定,从而保证精子发生正常进行。

泛素-蛋白酶体系统在心肌肥厚中的研究进展

泛素-蛋白酶体系统(UPS)是真核细胞内蛋白质降解的主要途径之一。UPS参与真核细胞的许多生物学功能(如炎症、细胞信号转导、转录调控以及细胞凋亡等)。心肌肥厚是导致多种心血管疾病发病率和病死率升高的独立危险因素之一。心肌肥厚的发生机制极其复杂,蛋白酶体可在心肌肥厚模型中被激活,而蛋白酶体抑制剂能阻止或逆转心肌肥厚。