抗环瓜氨酸肽抗体与基质金属蛋白酶-3联合检测在类风湿关节炎患者中的诊断价值及与疾病活动度的相关性

目的研究抗环瓜氨酸肽(anti-CCP)抗体与基质金属蛋白酶-3(MMP-3)联合检测在类风湿关节炎(RA)患者中的诊断价值及与疾病活动度的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2023年1月入淮南新华医疗集团新华医院的92例RA患者作为RA组。同时,选取同一时期入院的92例非RA自身免疫病患者与92名体检健康者分别作为非RA组、对照组。参考28个关节疾病活动度评分(DAS28)将RA组划分为4个亚组:高活动组(DAS28>5.1分,n=23)、中活动组(3.2<DAS28<5.1分,n=23)、低活动组(2.6<DAS28<3.2分,n=23)和稳定组(DAS28<2.6分,n=23)。比较RA组、非RA组、对照组研究对象的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平和不同关节疾病活动度RA患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析anti-CCP抗体联合MMP-3检测在RA中的诊断价值,并通过Spearman相关分析法分析血清anti-CCP抗体、MMP-3水平与RA患者疾病活动度的相关性。结果RA组、非RA组的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均明显高于对照组,RA组的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均明显高于非RA组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高活动组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平明显高于稳定组、低活动度组、中活动度组,中活动度组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均高于稳定组、低活动度组,低活动度组患者的血清anti-CCP抗体、MMP-3水平均高于稳定组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示,单一anti-CCP抗体诊断RA的ROC曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度依次为0.780、0.499、0.945,单一MMP-3诊断RA的AUC、敏感度、特异度依次为0.769、0.749、0.949,anti-CCP抗体联合MMP-3诊断RA的AUC、敏感度、特异度依次为0.890、0.882、0.962。Spearman相关分析显示,血清anti-CCP抗体、MMP-3水平与RA患者疾病活动度呈正相关(r=0.836、0.688,P<0.05)。结论anti-CCP抗体与MMP-3联合检测在RA诊断中效果显著,可提升RA诊断精准性,且RA患者疾病活动度与anti-CCP抗体、MMP-3呈正相关性,可为临床药物使用提供参考。

富血小板血浆关节腔注射治疗慢性膝关节骨性关节炎对患者疼痛情况及血清基质金属蛋白酶-3、软骨寡聚基质蛋白水平的影响研究

目的:探究富血小板血浆(PRP)关节腔注射治疗慢性膝关节骨性关节炎(KOA)对患者疼痛情况及血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平的影响。方法:选取86例慢性KOA患者,按随机信封法分为透明质酸(HA)组和PRP组,每组43例。HA组予以关节腔注射HA治疗,每次2 ml, PRP组以相同操作注射PRP,每次3.5 ml,两组均每周1次,连续治疗3周。比较两组治疗前后疼痛评分、症状严重程度、膝关节评分、血清炎症因子水平及不良反应发生情况。结果:治疗后3、6个月PRP组疼痛评分低于HA组(均P<0.05);治疗后3、6个月PRP组疼痛不适、步行能力及日常生活受累程度改善情况均优于HA组(均P<0.05);治疗后3、6个月PRP组膝关节评分显著低于HA组(均P<0.05);治疗后3个月PRP组血清中MMP-3及COMP水平低于HA组(均P<0.05);两组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:注射PRP对慢性KOA的远期疗效明显,可减轻其关节疼痛,改善关节功能,减轻膝关节炎症,安全性高。

退行性腰椎管狭窄症患者血清基质金属蛋白酶-3、网膜素-1表达水平及其与Oswestry功能障碍指数评分的相关性分析

目的探讨血清基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、网膜素-1(Omentin-1)表达水平与退行性腰椎管狭窄症(DLSS)患者Oswestry功能障碍指数(ODI)评分的相关性。方法选取2020年9月至2022年3月在该院骨科接受治疗的94例DLSS患者作为试验组,并选取同期90例体检健康者作为对照组。检测血清MMP-3、Omentin-1表达水平。采用磁共振检测总无脂肪多裂肌横截面积(TFCSA)、总多裂肌横截面积(TCSA),并计算TFCSA/TCSA。采用Pearson相关分析DLSS患者血清MMP-3、Omentin-1表达水平与ODI评分的关系。通过多因素Logistic回归分析患者发生重度功能障碍的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MMP-3、Omentin-1对重度功能障碍的预测价值。结果试验组血清MMP-3表达水平为(45.84±7.97)ng/mL,明显高于对照组的(32.57±6.24)ng/mL(P<0.05),血清Omentin-1表达水平为(56.46±12.20)ng/mL,明显低于对照组的(76.85±14.32)ng/mL(P<0.05)。试验组TFCSA、TFCSA/TCSA[(0.98±0.10)cm^(2)和0.66±0.12]明显低于对照组[(1.26±0.14)cm^(2)和0.82±0.16],差异均有统计学意义(P<0.05);试验组和对照组TCSA[(1.52±0.24)cm^(2)和(1.56±0.20)cm^(2)]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。DLSS患者血清MMP-3表达水平与ODI评分呈正相关(r=0.426,P<0.05),Omentin-1表达水平、TFCSA、TCSA、TFCSA/TCSA均与ODI评分呈明显负相关(r=-0.339、-0.514、-0.517、-0.429,P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,Omentin-1表达水平、TFCSA升高是DLSS患者发生重度功能障碍的保护因子(P<0.05),MMP-3表达水平升高是DLSS患者发生重度功能障碍的危险因素(P<0.05)。血清MMP-3、Omentin-1联合检测评估DLSS患者重度功能障碍的曲线下面积优于任何一项单独检测(Z两项联合-MMP-3=2.036,Z两项联合-Omentin-1=2.113;均P<0.05)。结论DLSS患者血清MMP-3表达水平上调,血清Omentin-1表达水平下调,且二者联合检测对DLSS患者发生重度功能障碍有一定的预测价值。

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、微小RNA-431和可溶性血管细胞黏附分子-1在突发性耳聋患者血清中的水平变化及其与耳蜗功能相关性研究

目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、微小RNA-431(miR-431)、可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)在突发性耳聋患者血清中的水平变化及其与耳蜗功能的相关性。方法:选取收治的突发性耳聋患者100例为疾病组,另选同期体检健康者50例为对照组。根据是否存在耳蜗性听力下降或损失分别判定疾病组患者为耳蜗功能异常(35例)或耳蜗功能正常(65例)。比较两组以及疾病组不同耳蜗功能患者血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平。采用Spearman法分析血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平与患者耳蜗功能的相关性。采用Logistic回归分析突发性耳聋患者耳蜗功能异常的影响因素。结果:疾病组血清Caspase-3、miR-431及sVCAM-1水平高于对照组(均P<0.05)。耳蜗功能异常患者血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平高于耳蜗功能正常患者(均P<0.05)。血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1水平与患者耳蜗功能呈负相关(均P<0.05)。耳蜗功能异常患者有上呼吸道感染史、有心血管合并症、重度和极重度听力损失的占比高于耳蜗功能正常患者(均P<0.05)。血清Caspase-3、miR-431、sVCAM-1是突发性耳聋患者耳蜗功能异常的独立影响因素(均P<0.05)。结论:突发性耳聋患者血清Caspase-3、miR-431及sVCAM-1水平升高,与耳蜗功能有关,是突发性耳聋患者耳蜗功能异常的影响因素。

正五聚蛋白3、基质金属蛋白酶-9及网膜素-1在急性缺血性脑卒中介入前后水平变化及联合预测预后价值

目的探讨正五聚蛋白3(PTX3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、网膜素-1(omentin-1)在急性缺血性脑卒中(AIS)介入治疗前后水平变化及联合预测预后价值。方法选取武汉市江夏区中医医院2019年12月至2021年12月收治的82例AIS患者为研究对象。依据血管内介入治疗后3个月的改良Rankin量表(mRS)评分将患者分为预后不良组21例、预后良好组61例。收集两组临床资料,并测定介入治疗前后血清PTX3、MMP-9、omentin-1水平。分析AIS患者介入治疗前后血清PTX3、MMP-9、omentin-1水平与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性。应用Logistic回归分析AIS患者预后有关影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线探讨介入治疗前后血清PTX3、MMP-9、omentin-1水平对AIS患者预后不良的预测价值。结果预后不良组年龄、入院至介入治疗时间、入院时NIHSS评分、介入治疗后NIHSS评分均高于预后良好组(t=4.037、10.940、5.345、17.502,P<0.05)。预后不良组介入治疗前后血清PTX3、MMP-9水平均高于预后良好组,omentin-1水平均低于预后良好组(t=3.931、6.998、8.002、10.237、3.780、4.892,P<0.05)。Pearson相关性分析发现,介入治疗前后血清PTX3、MMP-9水平与NIHSS评分呈正相关,omentin-1水平与NIHSS评分呈负相关(r=0.623、0.704、0.758、0.793、-0.526、-0.607,P<0.01)。Logistic回归分析显示,矫正了年龄、入院至介入治疗时间、入院时NIHSS评分、介入治疗后NIHSS评分的影响后,血清PTX3、MMP-9、omentin-1水平仍为预后不良的影响因素(P<0.05)。绘制ROC曲线显示,介入治疗前后血清PTX3、MMP-9、omentin-1对预后预测均有一定价值,尤以治疗后联合预测价值最佳,治疗后联合预测的曲线下面积为0.966。结论AIS介入治疗前后PTX3、MMP-9、omentin-1水平可产生明显变化,且其水平与患者神经功能缺损程度有关,联合检测各指标可为患者预后预测提供依据,利于指导临床做出早期针对性干预。

蠲痹汤联合塞来昔布治疗风寒湿痹型膝骨性关节炎的疗效及对血清基质金属蛋白酶-3骨桥蛋白水平的影响

目的探讨蠲痹汤联合塞来昔布治疗风寒湿痹型膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的疗效。方法选取2020年7月—2022年6月就诊于咸宁麻塘中医医院的100例KOA患者作为研究对象,以随机数字信封法分为对照组和中药组,每组50例。对照组予以塞来昔布治疗,中药组在对照组用药基础上服用蠲痹汤,2组均连续治疗12周。对比2组治疗效果、治疗前后疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、骨关节炎指数评分(Western Ontario and McMaster Universities,WOMAC)、怕冷程度和肿胀程度评分、血清基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)水平。结果中药组治疗总有效率为92.00%,显著高于对照组的76.00%(P<0.05)。治疗后,中药组VAS评分、WOMAC评分、怕冷程度和肿胀程度评分均显著低于对照组(P<0.05)。治疗后,中药组血清MMP-3、OPN水平均显著低于对照组(P<0.05)。结论蠲痹汤联合塞来昔布KOA能够有效缓解疼痛、肿胀等症状,改善膝关节功能,保护软骨损伤,提高疗效。

α-细辛醚上调细胞色素C及Caspase-3表达影响食管癌Eca-109细胞的生物学行为

目的:分析α-细辛醚上调细胞色素C(cytochrome C,cytC)及Caspase-3表达对食管癌Eca-109细胞生物学行为的影响。方法:将食管癌Eca-109细胞随机等量分为4组,即低、中及高剂量(分别给予25、50及100 mg/L的α-细辛醚),另随机取等量细胞加入等体积培养液作为空白组,培养48 h后通过平板克隆实验检测4组细胞增殖情况,Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况,RT-qPCR及Western Blot法检测细胞中cytC及Caspase-3 mRNA及蛋白表达。结果:(1)细胞克隆数在空白组最高,低剂量组显著高于高剂量组;凋亡率在空白组最低,低剂量组显著低于高剂量组。(2)4组细胞迁移至小室下的细胞数空白组>低剂量组>中剂量组>高剂量组。(3)CytC及Caspase-3蛋白在高剂量组表达显著高于空白组及低剂量组,且中剂量组表达高于空白组。(4)CytC及Caspase-3 mRNA的表达:高剂量组>中剂量组>低剂量组>空白组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:α-细辛醚抑制Eca-109细胞增殖及侵袭,并且可能通过上调cytC及Caspase-3表达促进调亡。

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨苓桂气化方改善射血分数保留心力衰竭早期舒张功能的分子机制

目的观察苓桂气化方对射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期模型大鼠心脏舒张功能的干预效应,基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine-containing aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)/消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)通路探讨其潜在的分子作用机制。方法40只自发性高血压大鼠高盐高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素溶液建立HFpEF早期大鼠模型,分为HFpEF组、恩格列净组(1.8 mg/kg)、苓桂气化方低剂量组(4.96 g/kg)、苓桂气化方高剂量组(9.92 g/kg),予相应药物灌胃;正常血压组、空白组予等剂量生理盐水灌胃,连续干预9周。采用超声心动图检测大鼠左心房内径(left atrial diameter,LAD)、舒张早期二尖瓣血流速度(left ventricular early diastolic filling peak velocity,E)与舒张晚期二尖瓣血流速度(atrial systolic left ventricular filling peak velocity,A)比值、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF);酶联免疫吸附测定法检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)含量;苏木精—伊红染色观察心肌组织病理变化;蛋白质印迹(Western Blot,WB)法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD和白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果与正常血压组相比,HFpEF组LAD和E/A增加(P<0.05),LVEF无明显变化(P>0.05);血清ANP含量升高(P<0.05);病理观察显示心肌炎症浸润;WB结果示NLRP3、Caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白含量升高(P<0.05),表明建模成功。与HFpEF组比,恩格列净组和苓桂气化方低、高剂量组的LAD和E/A减小(P<0.05),血清ANP含量降低(P<0.05),病理观察显示心肌炎症浸润减轻,WB结果示恩格列净组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方低剂量组NLRP3、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方高剂量组NLRP3、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),其余蛋白含量有下降趋势。结论苓桂气化方能改善HFpEF早期模型大鼠心脏舒张功能,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路、减轻心肌炎症浸润、抑制心房重构相关。

基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨清化饮对慢性萎缩性胃炎大鼠胃上皮细胞焦亡的影响

目的观察清化饮对慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠胃上皮NOD样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)细胞焦亡通路的影响,探讨清化饮治疗CAG的可能机制。方法随机将大鼠分为空白对照组(n=8)及造模组(n=28),采用“氨水+去氧胆酸钠+乙醇法灌胃+高脂高糖饮食+人工气候箱饲养”复合法建立病证结合CAG大鼠模型,造模成功后将其随机分为模型组、维酶素治疗组和清化饮治疗组(n=8)。采用HE染色观察大鼠胃黏膜病变情况,Real-time PCR法检测胃组织NLRP3、Caspase-1、β-catenin、GSDMD mRNA表达情况,ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、IL-18水平。结果与空白对照组相比,模型组大鼠炎症细胞浸润明显,胃黏膜固有腺体萎缩,胃黏膜组织中NLRP3、Caspase-1、β-catenin mRNA表达水平显著升高(P<0.01),GSDMD mRNA表达水平显著降低(P<0.01);血清IL-1β、IL-6、IL-18含量显著上升(P<0.01)。与模型组比较,清化饮治疗组胃黏膜固有腺体萎缩情况及炎症程度明显改善,NLRP3、Caspase-1、β-catenin mRNA表达蛋白表达水平均显著下降(P<0.01),GSDMD mRNA表达水平上升(P<0.01);血清IL-1β、IL-6、IL-18含量显著下降(P<0.01)。结论清化饮可有效改善CAG大鼠胃黏膜组织病理改变,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路,抑制细胞焦亡,从而降低胃黏膜炎症水平有关。

子宫内膜异位症患者异位子宫内膜组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达变化观察

目的 观察子宫内膜异位症(EMs)患者异位子宫内膜组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、IL-1β、IL-18表达变化,分析NLRP3、Caspase-1与EMs患者临床病理特征的关系,以探讨炎症与EMs发生发展中的作用。方法 取80例EMs患者(EMs组)异位子宫内膜组织及80例同期住院子宫肌瘤患者(非EMs组)正常子宫内膜组织,采用免疫组织化学染色法检测组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18;收集上述受试对象中的30例EMs患者和30例子宫肌瘤患者腹腔冲洗液,采用酶联免疫吸附法检测腹腔冲洗液中IL-1β、IL-18。结果 EMs组异位子宫内膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达阳性者分别为46(57.50%)、52(65.00%)、59(73.75%)、55例(68.75%),非EMs组正常子宫内膜组织中分别为32(40.00%)、36(45.00%)、44(55.00%)、42例(52.50%)。两组比较,P均<0.05。EMs组腹腔冲洗液中IL-1β、IL-18水平高于非EMs组(P均<0.01)。不同临床分期及是否存在痛经的EMs患者异位子宫内膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达阳性率比较,P均<0.05。结论 EMs患者异位子宫内膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18高表达,NLRP3、Caspase-1表达水平与患者病情有关。

迷迭香吸嗅通过SIRT1、NLRP3、Caspase-1信号通路介导细胞焦亡改善血管性认知障碍作用机制

目的:探讨迷迭香吸嗅调控沉默信息调节因子1(SIRT1)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)和半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路介导细胞焦亡改善血管性认知障碍(VCI)的作用机制。方法:选取雄性SD大鼠50只,随机分为正常组、假手术组、模型组、迷迭香组和迷迭香+SIRT1抑制剂组,每组10只。给予正常组、假手术组、模型组蒸馏水吸嗅,给予迷迭香组迷迭香精油吸嗅,迷迭香+SIRT1抑制剂组在迷迭香组基础上腹腔注射SIRT1抑制剂EX527。评价各组大鼠的学习记忆能力,海马神经元中SIRT1表达,海马组织中SIRT1、NLRP3和Caspase-1通路相关蛋白[剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)]表达情况。结果:相较于正常组和假手术组,模型组逃避潜伏期更长、过站台次数更少(P<0.05);相较于模型组,迷迭香组和迷迭香+SIRT1抑制剂组逃避潜伏期缩短,过站台次数增加,但迷迭香组变化更为显著(P<0.05)。相较于正常组和假手术组,模型组海马神经元中SIRT1水平更低(P<0.05);相较于模型组,迷迭香组和迷迭香+SIRT1抑制剂组海马神经元中SIRT1有所升高,且迷迭香组升高更明显(P<0.05)。与正常组和假手术组比较,模型组海马组织中剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素(IL)-18和IL-1β明显升高,SIRT1明显降低(P<0.05);相较于模型组,迷迭香组、迷迭香+SIRT1抑制剂组海马组织中cleaved Caspase-3、NLRP3、ASC、IL-18和IL-1β有所降低,SIRT1有所升高,其中迷迭香组变化更大(P<0.05)。结论:迷迭香吸嗅可改善VCI大鼠的空间记忆和学习能力,保护海马组织,减少神经元凋亡,其作用机制与SIRT1、NLRP3和Caspase-1信号通路介导的细胞焦亡有关。

血清NLRP3、Caspase-1对脓毒症患者疾病转归的评估价值

目的分析血清核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)对脓毒症患者疾病转归的评估价值。方法选择2021年8月至2023年8月承德医学院附属医院重症监护病房收治的106例脓毒症患者,并根据入院后疾病转归情况分为生存组(n=65)与死亡组(n=41)。所有研究对象入院24 h内检测血清NLRP3、Caspase-1水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清NLRP3、Caspase-1对脓毒症患者疾病转归的评估价值。结果死亡组脓毒症患者血清NLRP3、Caspase-1均高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清NLRP3、Caspase-1评估脓毒症患者疾病转归的AUC为0.844(95%CI:0.794~0.894)、0.858(95%CI:0.808~0.908),血清NLRP3联合Caspase-1评估脓毒症患者疾病转归的AUC为0.903(95%CI:0.853~0.953)。多因素回归分析显示,血清C-反应蛋白≥136.65 mg/L[OR(95%CI)=3.047(1.852~5.012)]、N末端脑利钠肽原≥986.39 ng/L[OR(95%CI)=2.591(1.703~3.941)]、NLRP3≥425.63 ng/mL[OR(95%CI)=4.536(2.263~9.096)]、Caspase-1≥7.84 ng/mL[OR(95%CI)=4.055(2.162~7.608)]及APACHEⅡ评分≥32.17分[OR(95%CI)=2.872(1.773~4.651)]、SOFA评分≥7.84分[OR(95%CI)=3.459(1.918~6.240)]均为影响脓毒症患者疾病转归的独立危险因素(P<0.05)。结论血清NLRP3、Caspase-1水平与脓毒症患者疾病转归密切相关,二者有望作为评估脓毒症患者疾病转归的有效指标,且联合评估价值更高。

芪地糖肾方调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导高糖刺激肾小球内皮细胞焦亡的研究

目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,分别予完全培养基、30 mmol/L高糖培养基、30 mmol/L高糖培养基+芪地糖肾方100μg/mL培养48 h,采用细胞免疫荧光染色法观察细胞中NLRP3表达情况及细胞骨架情况,采用Western blot法检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、消皮素D蛋白(GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)表达情况。结果 与正常组比较,高糖组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号增强,细胞骨架损伤明显;与高糖组比较,芪地糖肾方组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号减弱,细胞骨架损伤状态改善。结论 芪地糖肾方可通过抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡相关通路激活改善高糖诱导的肾小球内皮细胞损伤。

黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植术后兔软骨细胞凋亡及Bax、caspase-3/9表达的影响

目的 通过观察黄芪-当归对软骨细胞凋亡的干预作用,探讨黄芪-当归对新鲜同种异体骨软骨移植成活的影响。方法 4月龄新西兰白兔48只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、阳性组、黄芪当归5:1组。除假手术组外,其余组雌雄互为供体与受体,进行膝关节骨软骨交叉移植造模。药物干预8周后取材,进行大体观察、HE染色、番红-O染色、免疫组化染色、qPCR及Western blot检测。结果 与模型组相比,黄芪当归5:1组、阳性组移植修复部位愈合较好,软骨细胞形态趋于正常,分裂增殖明显;蛋白多糖沉积增多,Ⅱ型胶原含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05);qPCR及Western blot结果显示,与模型组相比,其余组Bax、caspase-3、caspase-9 mRNA及蛋白表达量均明显降低(P <0.05)。结论 黄芪-当归可促进新鲜同种异体骨软骨移植成活,其机制可能与促进胶原蛋白的产生、促进软骨细胞增殖与抑制软骨细胞凋亡有关。

澳洲茄碱通过调控Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路促进非小细胞肺癌发生凋亡

目的 探讨龙葵活性成分澳洲茄碱对非小细胞肺癌细胞PC9增殖、凋亡的影响。方法 体外培养PC9细胞,设对照组(0μmol/L)及澳洲茄碱不同剂量组(0、2、5、10、15、20、25μmol/L),CCK-8试剂盒检测澳洲茄碱对PC9细胞的增殖抑制作用;TMRE检测线粒膜电位;caspase3/7活性试剂盒联合GreenNuc?Caspase-3/Annexin V-mCherry染色检测caspase-3活性;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;给药处理或者使用PTEN抑制剂后,Western blot检测细胞中相关蛋白的表达量。结果 与对照组相比,经澳洲茄碱干预24、48、72 h后,PC9细胞的活力均明显降低(P<0.05);经澳洲茄碱干预24 h后,细胞线粒体膜电位明显降低,而细胞凋亡比例明显升高(P<0.05);caspase-3/7活力、活细胞Caspase-3活性及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.01);PI3K和Akt磷酸化水平降低(P<0.05);而PTEN、Bax蛋白表达上调(P<0.05);抗凋亡蛋白Bcl-2蛋白的表达下调(P<0.05)。结论 澳洲茄碱可通过调控Bcl-2/Bax/caspase-3通路及其上游蛋白活性而抑制PC9细胞增殖,促进其凋亡。

血清3-硝基酪氨酸、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1水平对老年急性缺血性卒中患者静脉溶栓预后的预测价值

目的探讨及研究血清3-硝基酪氨酸(3-nitrotyrosine,3-NT)、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1(serine protease inhibitors B1,SerpinB1)水平对老年急性缺血性卒中患者静脉溶栓预后的预测价值。方法前瞻性连续纳入2019年1月—2021年1月延安大学附属医院神经内科收治的老年(≥65岁)急性缺血性卒中静脉溶栓患者,根据患者90 dmRS评分分为预后良好组(0~2分)和预后不良组(>2分)。收集患者基线临床资料、溶栓前血清3-NT和SerpinB1水平,采用多因素logistic回归分析不良预后的危险因素。结果共纳入80例接受静脉溶栓治疗的老年急性缺血性卒中患者,其中预后良好组45例,预后不良组35例。预后不良组SerpinB1水平高于预后良好组[(75.24±8.54)ng/mL vs.(57.32±5.68)ng/mL,P<0.001];预后不良组3-NT水平高于预后良好组[(75.67±11.22)ng/mL vs.(61.68±11.54)ng/mL,P<0.001]。ROC分析显示,当3-NT截断值为70.23 ng/mL时,评估老年急性缺血性卒中患者静脉溶栓预后不良的敏感度为72.54%,特异度为73.28%;SerpinB1截断值为68.17 ng/mL时,评估老年急性缺血性卒中患者静脉溶栓不良预后的敏感度为66.55%,特异度为78.64%。多因素回归分析显示,高NIHSS评分(OR=6.404,95%CI 3.993~10.271,P<0.001)、SerpinB1高水平(OR=26.154,95%CI 11.460~59.690,P<0.001)、3-NT高水平(OR=12.769,95%CI 4.635~35.174,P<0.001)是老年急性缺血性卒中患者静脉溶栓预后不良的危险因素。结论基线血清3-NT、SerpinB1水平在老年急性缺血性卒中患者静脉溶栓的预后评估中具有一定价值。

VEGFR-3、MMP-9、nm23-H1蛋白在口腔癌组织中的表达及其临床价值研究

目的:探讨血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、nm23-H1蛋白在口腔癌组织中的表达及其临床价值。方法:选取行手术治疗的口腔鳞状细胞癌患者70例,收集癌组织标本。另选取同期体检健康者70例,采集口腔黏膜组织。采用免疫组织化学染色法检测样本组织VEGFR-3、MMP-9、nm23-H1蛋白表达,分析其与患者临床病理特征的相关性。术后随访5年,记录患者生存情况。分析VEGFR-3、MMP-9、nm23-H1蛋白表达与患者术后5年预后的关系。结果:口腔癌组织VEGFR-3、MMP-9蛋白阳性表达率高于口腔黏膜组织,nm23-H1蛋白阳性表达率低于口腔黏膜组织(均P<0.05)。VEGFR-3、MMP-9蛋白阳性表达患者淋巴结转移比例较高(均P<0.05)。nm23-H1蛋白阳性表达患者淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期-Ⅳ期及肿瘤浸润深度>5 mm比例较低(均P<0.05)。口腔癌组织VEGFR-3、MMP-9蛋白表达与淋巴结转移呈正相关(均P<0.05)。m23-H1蛋白表达与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤浸润深度呈负相关(均P<0.05)。VEGFR-3、MMP-9蛋白阳性表达患者5年生存率低于阴性表达患者(均P<0.05)。m23-H1蛋白阳性表达患者5年生存率高于阴性表达患者(P<0.05)。结论:口腔癌组织VEGFR-3、MMP-9蛋白高表达,nm23-H1蛋白低表达,三者与淋巴结转移以及口腔癌患者预后有关。

弱精子症患者精浆炎症相关细胞因子Chemerin、Caspase-1、NLRP3、IL-18及IL-1β水平变化观察

目的观察弱精子症(AS)患者精浆炎症相关细胞因子趋化素(Chemerin)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-18的水平变化。方法81例AS患者根据病情严重程度分为轻度AS组36例、中度AS组25例和重度AS组20例,另选择46例健康体检者为对照组,留取各组精液标本,采用ELISA法检测精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18采用Pearson相关分析或Spearman相关分析法分析精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平与精液质量的相关性,采用单因素及二元Logistic多因素回归分析法分析AS发生的危险因素。结果与对照组相比,轻中重AS组患者精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平高(P均<0.05)。与轻度AS相比,中度AS患者精浆Chemerin、Caspase-1、IL-18水平(P均<0.05)与中度AS者相比,重度AS患者精浆Chemerin及NLRP3水平高(P均<0.05)。精浆中Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平与AS患者前向运动精子比例(PR)及精子总活力呈负相关(P均<0.05)。精浆中Chemerin、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平升高是AS发生的危险因素(P均<0.05)。结论AS患者精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β升高,且随病情加重,精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β升高更明显。精浆Chemerin、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平升高可能促进AS的发生发展。

经血管内介入栓塞治疗对脑动脉瘤破裂患者血清肽素、IL-6、SOD、Caspase-3水平的影响

目的 探讨血管内介入栓塞治疗脑动脉瘤破裂的效果.方法 选取我院2021年4月至2023年4月收治的脑动脉瘤破裂患者78例,采用随机数字表法将其分为研究组(n=39)、对照组(n=39).对照组予以开颅夹闭手术治疗,研究组采用经血管内介入栓塞治疗,统计比较两组围术期指标、并发症发生率及治疗前后血清肽素(CPP)、超氧化物歧化酶(SOD)、白介素-6(IL-6)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)水平.结果 研究组术中出血量少于对照组,手术时间、住院时间短于对照组(P<0.05);治疗后7 d,研究组血清IL-6、CPP、Caspase-3水平较对照组低,血清SOD水平较对照组高(P<0.05);研究组并发症发生率为5.13%,低于对照组的20.51%(P<0.05).结论 经血管内介入栓塞治疗脑动脉瘤破裂患者效果显著,可调节血清CPP、IL-6、SOD、Caspase-3表达水平,安全性良好.

β-紫罗兰酮通过Caspase-3信号通路对乳腺癌细胞生物学行为的调控作用

目的研究β-紫罗兰酮通过Caspase-3信号对乳腺癌细胞生物学行为的调控作用。方法将人乳腺癌MCF-7细胞分为空白对照组与实验组,实验组按照β-紫罗兰酮的不同浓度,又分为25μmol/L组、50μmol/L组、100μmol/L组及200μmol/L组。分别采用CCK-8及台盼蓝计数法检测β-紫罗兰酮对MCF-7细胞增殖及生长曲线的影响,Hoechst 33258荧光染色法观察β-紫罗兰酮对MCF-7细胞凋亡形态的影响,RT-PCR及Western Blot法检测β-紫罗兰酮对Caspase-3 mRNA及蛋白表达的影响。结果与空白对照组相比,经不同浓度β-紫罗兰酮处理后的乳腺癌MCF-7细胞OD值均显著下降(P<0.05),实验组中经β-紫罗兰酮浓度25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L及200μmol/L处理后的MCF-7细胞增殖抑制率分别为7.92%、28.96%、45.22%和56.83%。不同浓度β-紫罗兰酮处理过的MCF-7细胞从第2天开始,较空白对照组的细胞计数显著降低(P<0.05),空白组对照组及β-紫罗兰酮浓度为25μmol/L组MCF-7细胞计数在7 d内随时间迁移呈上升趋势,经β-紫罗兰酮浓度为50、100及200μmol/L处理后的MCF-7细胞7 d内细胞计数呈下降趋势。Hoechst 33258荧光染色法检测发现,与空白对照组相比,给予β-紫罗兰酮处理过的人乳腺癌MCF-7细胞伴有不同程度的凋亡现象,而经β-紫罗兰酮浓度为200μmol/L处理后的细胞凋亡现象最明显。与空白对照组相比,经不同浓度β-紫罗兰酮处理过的MCF-7细胞Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均显著上升(P<0.05),且随β-紫罗兰酮浓度的升高,其Caspase-3 mRNA及蛋白表达呈上升趋势(P<0.05)。结论β-紫罗兰酮可能通过激活Caspase-3信号通路,抑制乳腺癌细胞增殖与生长,促进其凋亡,发挥抑癌作用。