柯萨奇病毒B3蛋白酶2A干扰核因子κB p65的二聚体形成和核转移

为探讨柯萨奇病毒B3(CVB3)蛋白酶2A是否通过干扰核因子κB(NF-κB)的核定位而影响细胞因子表达,构建CVB3蛋白酶2A的表达载体pcDNA3.1-2A。将此表达载体与核转录因子NF-κB基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-NF-κB promotor-Luc共转染细胞,经肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激,检测荧光素酶表达;通过免疫荧光和蛋白免疫印迹检测CVB3蛋白酶2A对NF-κB核定位和二聚体形成的影响。结果显示,CVB3蛋白酶2A可减少NF-κB二聚体形成,并干扰其核转移。本研究证实,CVB3蛋白酶2A可通过干扰NF-κB二聚体形成和核转移而影响细胞因子分泌。

CDDO-Me对三阴性乳腺癌细胞泛素特异性蛋白酶2a活性及细胞增殖的抑制作用

目的·在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞中研究筛选得到的泛素特异性蛋白酶2a(ubiquitin-specific protease 2a,USP2a)抑制剂甲基巴多索隆(bardoxolone methyl,CDDO-Me)对USP2a活性及细胞增殖的影响。方法·利用泛素特异性蛋白酶抑制剂筛选系统筛选得到USP2a抑制剂CDDO-Me,采用分子对接分析技术预测CDDO-Me与USP2a的结合情况,采用细胞热迁移实验(cellular thermal shift assay,CETSA)检测CDDO-Me与3种TNBC细胞株内USP2a蛋白的结合情况。通过Western blotting检测USP2a的底物β连环素(β-catenin)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)蛋白水平以及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(caspase3)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase1,PARP1]的变化。利用细胞活性检测试剂盒8(cell counting kit-8,CCK8)检测CDDO-Me对TNBC细胞增殖的影响。MDA-MB-468细胞瞬时转染pLVX(pLVX组)或pLVX-USP2a(pLVX-USP2a组)质粒,经CDDO-Me处理后,采用Western blotting检测β-catenin和TRAF6的蛋白水平,流式细胞术检测细胞周期以及台盼蓝拒染法检测活细胞数。结果·CDDO-Me在体外可以抑制USP2a活性,50%抑制浓度为3.84μmol/L。分子对接分析结果显示,CDDO-Me可以和USP2a的His456残基之间形成氢键,和Phe409、Tyr514残基之间具有疏水相互作用。CETSA实验结果显示,CDDO-Me能够和3种TNBC细胞中的USP2a蛋白结合。Western blotting结果显示,CDDO-Me可以下调USP2a底物β-catenin和TRAF6的蛋白水平,而相同浓度的CDDO-Me处理USP2a过表达的MDA-MB-468细胞,发现β-catenin和TRAF6蛋白水平未出现明显降低。CDDO-Me呈剂量依赖性抑制TNBC细胞的增殖,使细胞发生caspase3活化和PARP1的剪切并且导致细胞出现S期和G2/M期阻滞。与pLVX组相比,pLVX-USP2a组活细胞数目更多,细胞也未出现周期阻滞。结论·CDDO-Me可以抑制TNBC细胞中USP2a的活性,并且抑制TNBC细胞的增殖,诱导其凋亡。

泛素特异性蛋白酶2a的表达及催化机制

研究USP2a在肿瘤发生发展中的催化机制,设计引物对USP2a的关键氨基酸残基Asn218,Cys223,His464和Asn482进行点突变,分析突变后对USP2a催化活性以及底物特异性的影响。利用荧光检测方法测定USP2a-WT和USP2a-Ms的酶促动力常数,并采用LC-MS/MS与SDS-PAGE方法分析USP2a-WT和USP2a-Ms的异肽酶活性,获得了可溶性表达的USP2a-WT和USP2a-Ms重组蛋白。结果表明,氨基酸残基Cys223和His464突变后酶失去活性,其余突变体分解底物Ub-AMC的催化效率与野生型无显著差异,氨基酸残基Asn218和Asn482单独突变后对酶活性没有显著影响,但双突变体USP2a-N218A/D482A则显著降低酶活性。USP2a的氨基酸残基Cys223和His464直接参与酶的催化反应;氨基酸残基Asn218和Asn482可能通过形成Asn218-Asn482电子对在催化过程中起到稳定氨基酸残基His464的作用。

泛素特异性蛋白酶2a的原核表达纯化及酶活性分析

目的为了探讨泛素特异性蛋白酶2a(USP2a)在肿瘤发生发展中的催化机制,构建USP2a C末端催化结构域原核表达质粒p ET28a-USP2a-C,分析USP2a C末端催化结构域的活性情况。方法利用荧光检测方法测定USP2a-C的酶促动力常数,并采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)分析USP2a的肽酶和异肽酶活性。结果结果表明获得了可溶性表达的USP2a-C融合蛋白,酶促动力学分析USP2a-C水解底物Ub-AMC的催化效率Kcat/Km=2.53×105mol/(L·s);LC-MS/MS分析结果表明USP2a-C能有效分解Di-Ub和Ub-V77两种不同性质的底物,并且两者之间的催化活性差异无统计学意义。结论获得了可溶性表达的USP2a-C蛋白,并且分析证明其具有完整的去泛素化酶的活性。

替吉奥联合奥沙利铂对老年胃癌患者胃动力相关激素及基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9的影响

目的探讨替吉奥联合奥沙利铂对老年胃癌患者胃动力相关激素及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法选取128例老年胃癌患者为研究对象,随机分成对照组(n=64)与观察组(n=64)。对照组给予替吉奥治疗,观察组给予替吉奥联合奥沙利铂治疗。观察2组的胃动力相关激素[胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)]、MMP-2与MMP-9、肿瘤标志物[癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原19-9(CA19-9)]、临床疗效以及不良反应发生情况。分析胃动力相关激素与MMP-2、MMP-9及肿瘤标记物水平的相关性。结果治疗后,2组MTL低于治疗前,VIP高于治疗前,且观察组MTL低于对照组,VIP高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组MMP-2、MMP-9及CEA、CA125、CA19-9低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组总有效率为70.31%,高于对照组的53.13%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。MTL与MMP-2、MMP-9、CEA、CA125、CA19-9呈负相关(P<0.05);VIP与MMP-2、MMP-9、CEA、CA125、CA19-9呈正相关(P<0.05)。结论替吉奥联合奥沙利铂治疗老年胃癌患者的效果较好,且安全性较高。MTL、VIP与MMP-2、MMP-9及CEA、CA125、CA19-9在老年胃癌患者的疾病发展中起相互关联作用。

鳖甲煎丸辅助治疗对慢性乙型肝炎早期肝硬化患者肝功能、基质金属蛋白酶-2及血管紧张素-Ⅱ水平的影响

目的:探讨慢性乙型肝炎早期肝硬化患者应用鳖甲煎丸辅助治疗的效果及对其肝功能、血管紧张素-Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)、基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloprpteinase-2,MMP-2)水平的影响。方法:抽签法将我科2021年7月至2023年7月间124例慢性乙型肝炎早期肝硬化患者分2组,各62例,常规组行恩替卡韦片等常规疗法,研究组加服鳖甲煎丸辅助治疗,4 w作1疗程,共3疗程,治疗3疗程后比较其临床疗效及期间不良反应情况,采用肝功能、炎症因子、血液指标评价其对患者肝功能、AngⅡ、MMP-2等有关指标的影响。结果:与常规组相比,研究组总有效率高,研究组3疗程末凝血酶原活动度及白蛋白水平较高,总胆红素及丙氨酸转移酶水平较低,肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β较低,血清AngⅡ、MMP-2较低,差异有统计学意义(P<0.05),期间患者均无药物有关不良反应出现。结论:慢性乙型肝炎早期肝硬化患者应用鳖甲煎丸辅助治疗效果显著且安全,能有效降低患者炎症因子及AngⅡ、MMP-2水平,并显著改善其肝功能。

血清胃泌素、胃蛋白酶1和胃蛋白酶2联合癌胚抗原检测在胃癌早期筛查中的价值

目的探讨血清胃泌素、胃蛋白酶1和胃蛋白酶2联合癌胚抗原检测在胃癌早期筛查中的价值。方法选取在我院就诊的70例早期胃癌患者为观察组,同时选取同期胃良性疾病患者80例为对照组,健康体检者80例为正常组,对比三组血清胃泌素、胃蛋白酶1、胃蛋白酶2和癌胚抗原水平,以及不同风险人群人数,不同风险人群血清胃泌素、胃蛋白酶1、胃蛋白酶2和癌胚抗原水平,不同检测指标的诊断效能。结果观察组胃蛋白酶1水平显著低于对照组和正常组(P<0.05);血清胃泌素、胃蛋白酶2和癌胚抗原水平均显著高于对照组和正常组(P<0.05)。低风险人群胃蛋白酶1水平显著高于中风险和高风险人群(P<0.05);血清胃泌素、胃蛋白酶2和癌胚抗原水平显著低于中风险和高风险人群(P<0.05)。观察组高风险人群显著多于对照组和正常组(P<0.05)。联合检测的灵敏度、特异度和准确度均显著高于单一检测(P<0.05)。结论血清胃泌素、胃蛋白酶1和胃蛋白酶2联合癌胚抗原可用于胃癌早期筛查且准确率更高,需定期对高风险人群行胃镜检查。

乳腺癌组织中紧密连接蛋白CLDN6、基质金属蛋白酶2和Snail的表达及临床意义

目的分析乳腺癌组织及癌旁正常乳腺组织Claudin6、MMP2及Snail的蛋白水平,三者在乳腺癌组织中表达的相关性,上述三种蛋白表达与患者病理分期、淋巴结转移、肿瘤大小和年龄的相关性。方法选取2021年8月—2022年7月本院病理中心的38例乳腺癌和24例癌旁正常乳腺组织标本,采用免疫组化Sp法进行实验研究,检测Claudin6、MMP2及Snail的表达情况;分析乳腺癌组织上述三种蛋白表达及其与临床病理特征的相关性。结果癌组织中Claudin6阳性率较正常组织低,差异显著(P<0.01);癌组织中MMP2和Snail阳性表达率较正常组织高,差异具有统计学意义(P<0.05)。癌组织中Claudin6与MMP2表达呈负相关(P<0.01),Claudin6与Snai表达呈负相关(P<0.001),MMP2与Snail表达呈正相关(P≤0.001)。Claudin6、MMP2和Snail的表达水平与病理分期、肿瘤大小和患者年龄均不相关(P>0.05);淋巴结转移病例Claudin6阳性率显著低于无淋巴结转移病例(P<0.01);相反,淋巴结转移病例MMP2和Snail阳性率明显高于无淋巴结转移病例(P<0.05)。结论Claudin6蛋白在乳腺癌组织中低表达、MMp2及Snail蛋白在乳腺癌组织中高表达,在乳腺癌组织中Claudin6与MMP2蛋白、Claudin6与Snail蛋白表达均呈负相关;MMP2和Snail蛋白表达呈正相关。淋巴结转移病例CLDN6阳性率显著低于无淋巴结转移病例;淋巴结转移病例MMP2和Snail阳性率高于无淋巴结转移病例;推测紧密连接蛋白6可能通过阻断Snail/MMP2信号轴,抑制乳腺癌的上皮间质转化和转移。

尿胰蛋白酶原-2在急性重症胰腺炎早期分型时效性中的价值研究

目的 探究尿胰蛋白酶原-2在急性重症胰腺炎早期分型中的价值。方法 选取2019年9月至2021年10月深圳市石岩人民医院收治的急性胰腺炎患者48例急性胰腺炎患者(AP组)。根据病情严重程度将48例患者分为急性轻症胰腺炎(MAP)组以及急性重症胰腺炎(SAP)组;另选12例非急性胰腺炎患者作为非AP组。三组尿胰蛋白酶原-2(TPS-2)、血清C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)水平。并对AP组患者的尿胰蛋白酶原-2、血清C反应蛋白、降钙素原(PCT)、淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)等进行动态监测,分析尿胰蛋白酶原-2在急性重症胰腺炎早期分型时效性的价值。结果 AP组的CRP、PCT、AMS、LPS水平明显高于非AP组,差异对比有统计学意义(P<0.05)。SAP组的CRP、PCT、AMS、LPS水平明显高于MAP组,差异对比有统计学意义(P<0.05)。AP组TPS-2、AMS、LPS的阳性例数明显高于非AP组,差异对比有统计学意义(P<0.05)。TPS-2、AMS、LPS检测的敏感度分别为93.33%、90.91%、93.48%,特异度分别为60.00%、50.00%、64.29%,准确率分别为85.00%、80.00%、86.67%,Kappa值分别为(Kappa=0.571、0.444、0.609)。SAP组入院4 h、8 h、24 h、48 h的TPS-2阳性例数均高于MAP组,差异对比有统计学意义(P<0.05)。MAP组与SAP组入院时及入院后1 h、2 h、4 h、8 h、24 h、48 h的TPS-2阳性出现时间早晚(时效性)的对比,差异有统计学意义(P<0.05)。SAP组入院时及入院后1 h、2 h、4 h、8 h的TPS-2、AMS、LPS、CRP、PCT阳性病例出现的时间(时效性)对比,差异有统计学意义(P<0.05)。TPS-2检测出SAP阳性时间早于AMS、LPS、CRP、PCT检测。结论 尿胰蛋白酶原-2在评估急性重症胰腺炎早期分型时效性中具有较高的应用价值,且尿胰蛋白酶原-2检测出急性重症胰腺炎阳性时间早于淀粉酶、脂肪酶、血清C反应蛋白和降钙素原的检测,可作为疾病诊断的重要生化指标。

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在动脉粥样硬化中的研究进展

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)是一类可降解细胞外基质的蛋白水解酶。其中,MMP-2和MMP-9与动脉粥样硬化的发生发展密切相关,在动脉粥样硬化相关疾病的诊断和预后中起重要作用。本文就MMP-2和MMP-9在动脉粥样硬化及其相关疾病中的最新研究进展作一综述,以期为动脉粥样硬化及其相关疾病的诊疗提供帮助。

妇炎舒胶囊治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎的临床效果及对炎症因子、细胞间黏附分子-1、基质金属蛋白酶-2的影响

目的探讨妇炎舒胶囊治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎的临床效果及对炎症因子、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响。方法选取永州市中心医院2021年3月至2024年2月收治的100例湿热瘀结型慢性盆腔炎患者作为研究对象,按照随机数字表法分为西医组(n=50)与中西医组(n=50)。西医组予以左氧氟沙星治疗,中西医组予以左氧氟沙星联合妇炎舒胶囊治疗。比较两组中医证候积分、炎症因子水平、ICAM-1与MMP-2水平、临床疗效及不良反应发生情况。结果治疗后,中西医组主证、次证评分低于西医组(P<0.05)。中西医组白介素-6、白介素-26、肿瘤坏死因子-α水平低于西医组(P<0.05)。中西医组ICAM-1水平低于西医组,MMP-2水平高于西医组(P<0.05)。中西医组临床总有效率高于西医组(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论妇炎舒胶囊治疗湿热瘀结型慢性盆腔炎的临床效果较好,可减轻症状及炎症反应,改善ICAM-1与MMP-2水平,且不增加不良反应,值得推行。

哺乳动物双杂交技术验证HBV表面抗原大蛋白与胰腺弹性蛋白酶2A的相互作用

目的验证乙型肝炎病毒（hepatitisBvires，HBV）表面抗原大蛋白（hepatitisBvireslargesurfaceprotein，LHBs）与人胰腺弹性蛋白酶2A（elastase2A）蛋白在细胞内是否存在明确的相互作用关系。方法构建真核表达质粒pACT—Elastase2A，设立阳性对照组、实验组、阴性对照组和空细胞组，用哺乳动物双杂交技术验证LHBs与人胰腺Elastase2A蛋白之间的相互作用。结果实验组与3个阴性对照组之间，均数都存在统计学差异（其P值分别为0．031、0．006和0．007）。结论哺乳动物双杂交技术证实了从慨与人胰腺Elastase2A蛋白在Capan2细胞内存在相互作用关系。

RNA干扰HIF-1α降低宫颈癌细胞基质金属蛋白酶-2的表达

背景与目的:缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1alpha,HIF-1α)是普遍存在于实体瘤组织中的缺氧应答调控因子,在维持细胞能量代谢、肿瘤血管生成及转移、细胞增殖与凋亡等诸多方面起着重要作用。本研究探讨RNA干扰HIF-1α对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在宫颈癌HeLa细胞中表达的影响,初步探讨其机理。方法:①将15只裸鼠随机分为3组,分别用HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞和HIF-1α-HeLa细胞接种。②用免疫组化法检测各组移植瘤组织中HIF-1α、上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、钙紧张素(β-catenin)和MMP-2的表达。③将HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞,HIF-1α-HeLa细胞分别在乏氧(1%O2)及常氧条件下培养48h,用Western blot检测各组细胞中HIF-1α、E-cadherin、β-catenin和MMP-2的表达。结果:①免疫组化法检测结果显示,接种HeLa细胞、pGenesil-1-HeLa细胞和HIF-1α-HeLa细胞的裸鼠移植瘤组织中HIF-1α的表达分别为(69.0±12.1)%、(62.8±12.3)%、(17.4±8.8)%,E-cadherin的表达分别为1.00±0.07、1.00±0.10、3.21±0.25,β-catenin的表达分别为4.21±0.92、4.31±0.87、1.29±0.72,MMP-2的表达分别为4.84±0.67、4.50±0.71、1.00±0.83。②HIF-1α和MMP-2的表达呈正相关(r=0.521,P=0.035)。③Western blot分析结果显示,在抑制HIF-1α表达的HIF-1α-HeLa细胞中,乏氧与常氧条件下HIF-1α、β-catenin和MMP-2蛋白低表达,E-cadherin蛋白高表达;而在HeLa细胞和pGenesil-1-HeLa细胞中得到相反的结果。结论:在人宫颈癌HeLa细胞中干扰HIF-1α后MMP-2的表达下降。

血清基质金属蛋白酶2与骨代谢标志物水平对女童特发性中枢性性早熟的诊断价值研究

目的探讨血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)与骨代谢标志物水平对女童特发性中枢性性早熟(ICPP)的诊断价值。方法选取2012年10月—2013年8月在温州医科大学附属第二医院就诊的ICPP女性患儿49例(ICPP组)为研究对象,另选择同期在本院诊断为单纯性乳房早发育(PT)的女性患儿40例(PT组)和体检健康女童35例(健康组)为对照。入选儿童均清晨空腹采血,测定血清MMP-2、Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(P1NP)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)、N端骨钙素(N-MID)、25(OH)D3水平。结果各组MMP-2、P1NP、N-MID水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中ICPP组MMP-2、P1NP、N-MID水平高于PT组和健康组,PT组MMP-2水平高于健康组(P<0.05)。相关分析显示,MMP-2水平分别与P1NP、β-CTX及N-MID呈正相关(r=0.438、0.260、0.347,P<0.01);P1NP水平与N-MID呈正相关(r=0.657,P<0.01)。MMP-2及骨代谢标志物对ICPP诊断价值的ROC曲线显示,MMP-2曲线下面积最大,取临界值为186μg/L时,约登指数最大,为0.800,灵敏度为0.848,特异度为0.952,阳性预测值为0.966,阴性预测值为0.800,OR=110.65。MMP-2及骨代谢标志物对PT诊断价值的ROC曲线显示,MMP-2曲线下面积最大,取临界值为164μg/L时,约登指数最大,为0.542,灵敏度为0.590,特异度为0.952,阳性预测值为0.958,阴性预测值为0.556,OR=28.75。MMP-2及骨代谢标志物对ICPP与PT鉴别诊断的ROC曲线显示,N-MID曲线下面积最大,取临界值为113μg/L时,约登指数最大,为0.322,灵敏度为0.758,特异度为0.564,阳性预测值为0.585,阴性预测值为0.709,OR=3.45。结论 MMP-2及骨代谢标志物对ICPP的诊断及与PT的鉴别诊断均有一定的临床价值。

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2在女性盆底功能障碍中的表达及意义

目的:研究女性盆底功能障碍(PFD)患者尿道中段阴道壁组织中MMP-2与TIMP-2表达及其意义。方法:用免疫组化S-P法检测20例正常对照、22例盆腔器官脱垂(POP)、24例压力性尿失禁(SUI)及25例SUI&POP患者尿道中段阴道壁组织中MMP-2与TIMP-2的表达。结果:MMP-2在POP组、SUI组、SUI&POP组的表达均明显高于无POP组、无SUI组、正常对照组(P<0.01)。TIMP-2在POP组、SUI组、SUI&POP组表达均低于无POP组、无SUI组、正常对照组(P<0.05)。MMP-2与POP、SUI严重程度呈正相关(r分别为0.508,0.430,P<0.01)。TIMP-2与POP、SUI严重程度呈负相关(r分别为-0.411,-0.348,P<0.01)。结论:MMP-2和TIMP-2与PFD发生发展密切相关;MMP-2/TIMP-2比例失衡可能是PFD发生发展的重要机制。

乳腺癌组织中基质金属蛋白酶2、9活性的测定

目的 :探讨乳腺癌及乳腺纤维腺瘤组织中基质金属蛋白酶 2、9( MMP2、MMP9)的活性与乳腺癌浸润、转移的关系。方法 :利用明胶酶谱分析法测定乳腺癌及乳腺纤维腺瘤组织中 MMP2、MMP9的活性 ,并采用统计学方法分析 MMP2、MMP9活性与乳腺癌临床病理参数的关系。结果 :乳腺癌组中 MMP2 (分子量 62 0 0 0 )、MMP9(分子量 82 0 0 0 )活性显著高于乳腺纤维腺瘤组( P<0 .0 1 ) ;而两组 MMP2 ( 62 0 0 0 + 72 0 0 0 )、MMP9( 82 0 0 0 + 92 0 0 0 )活性差异不显著( P>0 .0 5 )。转移组及浸润组 MMP2 ( 62 0 0 0 )、MMP9( 82 0 0 0 )活性显著高于非转移组及非浸润组( P<0 .0 1 )。结论 :MMP2、MMP9的活性部分与乳腺癌的浸润、转移有关。

红芪多糖对模型小鼠糖尿病心肌病心肌纤维化和基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达的影响

目的观察红芪多糖(HPS)对模型小鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制剂(TIMP-2)表达的影响,探讨其防治糖尿病心肌病心肌纤维化的作用机制。方法将60只实验小鼠随机分为模型组、罗格列酮组和HPS高、中、低剂量组,正常组为12只同周龄同背景的非转基因雄性BKS.Cg-Dock7~m+/+Lepr^(d)b/JNju小鼠。各组给予相应药物灌胃,连续8周。给药前及给药2、4、6、8周末检测小鼠血糖;Masson染色观察心肌纤维化程度;蛋白印迹法检测心肌组织MMP-2、TIMP-2的蛋白表达。结果与模型组比较,HPS高、中剂量组和罗格列酮组小鼠血糖明显下降。Masson染色结果显示,模型组小鼠心肌间质中亮绿色纤维较正常组明显增多,HPS高剂量组、罗格列酮组较模型组有所减少。蛋白质印迹检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠MMP-2表达明显降低,TIMP-2表达明显升高,MMP-2/TIMP-2比值下降;与模型组比较,HPS高、中剂量组和罗格列酮组小鼠MMP-2表达明显升高,TIMP-2表达明显降低,MMP-2/TIMP-2比值上升。结论 HPS可减轻模型小鼠糖尿病心肌病心肌纤维化程度,其治疗作用可能是通过升高MMP-2/TIMP-2比值,从而使模型小鼠心肌纤维化有所减轻。

基质金属蛋白酶2在胃癌组织中的表达及意义

应用流式细胞术检测54例胃癌及11例正常胃黏膜中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达。结果MMP-2在胃癌组织中的表达量明显高于正常胃黏膜组织,不同浸润深度、有无淋巴结转移的胃癌组织之间MMP-2表达差异有统计学意义(P<0.05)。认为MMP-2在胃癌发展及转移中起重要作用。

2型糖尿病患者血清基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶2组织抑制剂及超敏C反应蛋白与大血管病变的关系研究

目的探讨血清基质金属蛋白酶2(MMP-2)、金属蛋白酶2组织抑制剂(TIMP-2)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)与2型糖尿病(T2DM)患者大血管病变的关系。方法选取2010年9月—2011年4月在我科住院的T2DM患者60例,根据颈动脉内膜中层厚度(CIMT)将患者分为无CIMT增厚组(CIMT≤0.9 mm)和CIMT增厚组(CIMT>0.9 mm),各30例。另选取同期在本院体检中心体检的健康者30例为对照组。采用酶联免疫吸附法测定3组受检者血清MMP-2、TIMP-2水平,采用全自动生化分析仪测定血清hs-CRP水平,比较3组受检者这3个指标的差异,并将这3个指标与临床及生化指标进行Pearson相关分析和多元逐步线性回归分析。结果 (1)对照组、无CIMT增厚组、CIMT增厚组血清MMP-2〔分别为(547±130)、(986±104)和(1 346±204)μg/L〕、TIMP-2〔分别为(67.3±9.4)、(87.2±6.5)和(102.6±14.5)μg/L〕、hs-CRP水平〔分别为(0.92±0.28)、(2.72±1.12)、(4.29±2.59)mg/L〕比较,差异均有统计学意义(P<0.01),且组间两两比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。(2)相关分析显示,血清MMP-2、TIMP-2及hs-CRP均与收缩压、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、糖化血红蛋白(HbA1c)呈正相关(P<0.05),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关(P<0.01);此外,血清MMP-2还与三酰甘油(TG)、空腹血糖(FPG)、TIMP-2、hs-CRP呈正相关(P<0.05),血清TIMP-2还与舒张压、TG、hs-CRP呈正相关(P<0.05),hs-CRP还与FPG呈正相关(P<0.01)。回归分析显示,TIMP-2、hs-CRP是影响MMP-2的主要因素(标准化偏回归系数分别为0.829和0.166,P均<0.05);MMP-2、舒张压是影响TIMP-2的主要因素(标准化偏回归系数分别为0.904和0.147,P均<0.05);MMP-2、收缩压是影响hs-CRP的主要因素(标准化偏回归系数分别为0.488和0.317,P均<0.05)。结论 T2DM患者血清MMP-2、TIMP-2、hs-CRP水平较健康者显著升高,尤其是T2DM合并大血管病变的患者;MMP-2和TIMP-2可能与炎症密切相关;检测血清MMP-2、TIMP-2及hs-CRP水平,对监测T2DM大血管病变的发生、发展有重要的临床意义。

ARK5和基质金属蛋白酶2在小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨ARK5和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在小细胞肺癌(SCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测106例SCLC癌组织(SCLC组)及40例正常肺组织(对照组)中ARK5和MMP-2的表达,分析ARK5、MMP-2的表达与患者病情分期及预后的关系。结果 SCLC组ARK5和MMP-2阳性率分别为67.9%(72/106)和65.1%(69/106),对照组中分别为5.0%(2/40)和7.5%(3/40),差异均有统计学意义(χ2值分别为46.004和38.540,P<0.05)。ARK5和MMP-2的阳性率与肿瘤直径、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及肿瘤分期有关(P<0.05)。Spearman秩相关分析显示,SCLC癌组织中ARK5与MMP-2呈正相关(r=0.878,P<0.001)。Kaplan-Meier生存曲线显示,ARK5阳性组5年生存率为12.9%,阴性组为59.6%,差异有统计学意义(χ2=30.077,P<0.001);MMP-2阳性组5年生存率为16.3%,阴性组为62.3%,差异有统计学意义(χ2=24.405,P<0.001)。Cox多因素分析显示,ARK5、分化程度、肿瘤分期对SCLC患者预后的影响有统计学意义(P<0.05)。结论 ARK5和MMP-2的表达与SCLC的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤分期密切相关,它们都对SCLC患者的生存率产生重大影响,同时ARK5是SCLC患者预后的独立危险因素。