正常儿童158例血清胱蛋白酶C测定小儿肾小球滤过率的临床意义

目的 :探讨血清胱蛋白酶C(CysC)在小儿肾小球滤过率 (GFR)检测中的临床意义。方法 :正常儿童 1 58例 ,年龄从新生儿至 1 4a。根据年龄分5组。酶联免疫吸附测定法 (ELISA法 )测定血清CysC浓度。结果 :1a以下小儿血清CysC浓度与血清肌酐 (Scr)呈正相关 (r =0 .44 ,P <0 .0 1 ) ,与内生肌酐清除率 (Ccr)呈负相关 (r =- 0 .62 ,P <0 .0 1 )。 1a以上小儿血清CysC浓度与Scr无相关 (r=0 .0 73 ,P >0 .0 5) ,与Ccr呈负相关 (r =- 0 .1 2 ,P <0 .0 1 )。各组间差异性小 ,1a以上小儿血清CysC浓度范围 0 .72～ 1 .48mg·L-1 。结论 :1a以后小儿血清CysC浓度稳定 ,在肾小球滤过率检测方面优于Scr。

侵袭性牙周炎家系组织蛋白酶C基因的突变分析

目的研究侵袭性牙周炎家系组织蛋白酶C基因(CTSC)的突变及其突变类型。方法应用聚合酶链反应PCR和DNA测序的方法,对一例7岁侵袭性牙周炎患儿及其父母进行基因突变的分析。结果在患儿CTSC基因的第7外显子存在1015C＞T,R339C和1040A＞G,Y347C的杂合突变,测序图表现为两个杂合双峰,其中1015C＞T碱基突变来自父亲,1040A＞G碱基的突变来自母亲。结论本研究在一例青春前期的侵袭性牙周炎患儿检测到组织蛋白酶C基因的突变,该突变产生异常的组织蛋白酶C,导致疾病表型的发生。

罕见双胞胎侵袭性牙周炎家系组织蛋白酶C基因突变分析

目的:对患有侵袭性牙周炎双胞胎病人,进行家系组织蛋白酶C(CTSC)基因的突变和突变类型分析。方法:应用聚合链酶反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和DNA测序的方法对1例双胞胎同时患有侵袭性牙周炎的病人、家系进行基因突变分析。结果:两名双胞胎病人CTSC基因的第三外显子存在c.394C→G的单碱基突变,测序图表现为单峰(G)。其父母、胞弟存在同一位点的突变,测序图表现为杂合双峰。结论:双胞胎侵袭性牙周炎的发病与遗传因素密切相关,组织蛋白酶C基因的突变可能是造成病人临床表型的重要原因之一。

日本囊对虾卵母细胞发育过程中组织蛋白酶C比活性测定

组织蛋白酶C是一种溶酶样半胱氨酸蛋白酶,近年报道了组织蛋白酶C的表达与日本囊对虾卵母细胞最后成熟阶段密切相关。对卵母细胞发育主要不同时相特别是卵母细胞最后生理成熟过程进行了连续观察,测定了组织蛋白酶C在卵母细胞发育过程中的比活性。结果显示,日本囊对虾卵母细胞发育可划分为9个时相,即卵原细胞时相、核仁时相、周边核仁时相、初级卵黄发生时相、次级卵黄发生时相、皮质棒早期时相、皮质棒中期时相、皮质棒晚期时相、排卵期时相,生发泡的破裂是在排卵之前就已经发生;免疫印迹实验结果显示,组织蛋白酶C蛋白只在卵母细胞最后成熟阶段即皮质棒发生时期表达,但酶活性测定结果显示,组织蛋白酶C比活力在皮质棒发生前后没有变化,酶活性较低。以上数据提示组织蛋白酶C可能与受精时皮质棒的释放以及受精卵外胶膜的形成有关。

新生儿高胆红素血症血清胱蛋白酶C测定及其临床意义

目的 :观察新生儿高胆红素血症血清胱蛋白酶C(CysC)水平的变化 ,评价其对肾功能影响的临床价值。方法 :应用酶联免疫法对 76例新生儿高胆红素血症 (轻度 2 5例 ,中度 2 4例 ,重度 2 7例 )及对照组 30例新生儿血CysC水平测定。结果 :高胆红素血症组CysC(1.8±s 0 .3)mg·L- 1,对照组CysC(1.5 1± 0 .18)mg·L- 1,P <0 .0 1,且血胆红素含量与血CysC水平呈正相关 (r =0 .5 5 6 7,P <0 .0 1)。中、重度高胆红素血症新生儿的CysC水平明显高于对照组 ,P <0 .0 1。中、重度高胆红素血症新生儿高胆红素消退后复查CysC水平明显下降(P <0 .0 1)。肾功能正常。结论 :新生儿高胆红素血症CysC水平升高 ,随着胆红素消退 ,CysC水平下降。血CysC是肾功能敏感的检测指标。

组织蛋白酶C特异性荧光底物的合成和血清学分析应用

组织蛋白酶C是溶酶体半胱氨酸蛋白酶,源于免疫颗粒细胞。组织蛋白酶C作为近年来的研究热点,在于其为颗粒细胞炎症性丝氨酸蛋白酶的上游活化酶,在生理和病理过程中有着重要作用。通过研究设计并合成基于香豆素的荧光底物(CatC-AFC)来评估血清组织蛋白酶C的活性。结果表明,在特异性底物CatC-AFC与组织蛋白酶C反应后,荧光强度在非常短的时间内显著增加。酶动力学研究显示组织蛋白酶C以稳健的,线性的和时间依赖性的方式水解CatC-AFC。通过梯度稀释方法验证基于血清中组织蛋白酶C的活性测定,并且没有观察到干扰或自发荧光。基于血清中组织蛋白酶C活性的方差系数表明了良好的重现性。

组织蛋白酶C和肿瘤坏死因子α在人冠脉组织中的表达及其与冠心病的相关性研究

目的:检测组织蛋白酶C(CTSC)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在人冠状动脉组织中的表达,并探讨两者在冠心病中的可能作用机制。方法:收集贵州医科大学法医司法鉴定中心2018年10月~2019年12月的52例冠心病死亡案例的冠状动脉作为冠心病组,以同期25例无任何心脏疾病的意外死亡案例作为对照组。通过病理组织学检查冠状动脉管腔狭窄情况和血管内膜斑块形成情况;采用Western blot法检测CTSC和TNF-α的蛋白表达;免疫组织化学染色方法检测CTSC及TNF-α在细胞内的表达及定位。结果:HE染色见对照组冠状动脉内膜光滑平整、无增厚,管腔未见狭窄;冠心病组中血管内膜不规则增厚、粥样硬化斑块形成,中膜明显受压变薄,管腔呈不同程度偏心性狭窄(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,CTSC和TNF-α在冠心病组中的表达显著升高(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,CTSC和TNF-α均在泡沫细胞胞质中表达,且其阳性表达均显著高于对照组(P<0.05)。Pearson积矩相关分析结果显示,CTSC和TNF-α在冠心病中的表达呈正相关(r2=0.743,P<0.05)。结论:CTSC在冠状动脉组织中的表达上调可能促进了TNF-α的表达,从而影响冠心病的发生发展。

掌跖角化-牙周破坏综合征个案患者家系组织蛋白酶C的基因突变分析

目的通过研究一例掌跖角化-牙周破坏综合征(PLS)患者及其家系组织蛋白酶C(CTSC)基因突变的特点,提供PLS分子致病机制的理论依据,丰富PLS基因诊断和治疗的科学资料。方法取得临床发现的一例PLS先证者及其家属知情同意,分别提取先证者及其父母、姐姐的基因组DNA,应用聚合酶链反应和DNA直接测序技术,分析先证者及其直系血亲CTSC基因的突变情况。结果 PLS先证者CTSC基因存在复合型杂合突变,突变位点是c.754C>T和c.1040A>G,其父母均为携带者,姐姐未发现突变。结论 PLS先证者的临床表征是由CTSC基因突变引起。

掌跖角化-牙周破坏综合征(一家系)组织蛋白酶C基因突变及功能分析

目的:对一家系中2名掌跖角化-牙周破坏综合征(Papillon-Lefèvre syndrome,PLS)患者及父母进行CTSC基因突变检测,并对突变的组织蛋白酶C进行简要功能分析。方法:(1)针对一个PLS综合征家系,对其进行CTSC基因测序筛查。(2)对研究中发现的CTSC基因突变位点,采用蛋白质结构预测服务器I-TASSER进行组织蛋白酶C蛋白结构预测分析。(3)提取患者及父母外周静脉血中白细胞,测定组织蛋白酶C的活性,并与正常组对比。结果:(1)本家系中2名PLS患者均发现第六、七外显子的c.774 C>G(p.C258W)和c.1033 T>A(p.Y345N)杂合错义突变,其中c.1033 T>A为首次报道。(2)以上两位点突变后蛋白构象与野生型对比,整体结构并未发生明显改变。(3)2名PLS患者的组织蛋白酶C活性较正常对照组平均降低约77%,父亲及母亲的组织蛋白酶C活性降低约23%及63%。结论:本研究中2例PLS患者均存在CTSC基因的复合型杂合子突变,突变位点为c.774 C>G(p.C258W)和c.1033 T>A(p.Y345N),其中c.1033 T>A为新发现的突变位点。该复合型杂合突变并未造成组织蛋白酶C蛋白结构改变,但会造成组织蛋白酶C活性减低。

一个掌跖角化-牙周破坏综合征患者家系组织蛋白酶C基因突变分析

目的对一个掌跖角化-牙周破坏综合征(PLS)患者及其家系组织蛋白酶C基因(CTSC)突变位点进行分析,探讨PLS的分子致病机制。方法提取1例PLS先证者及其直系血亲(父母、弟弟)的基因组DNA,应用聚合酶链反应和DNA直接测序技术分析先证者及其直系血亲CTSC基因的突变情况。结果 PLS先证者CTSC基因存在复合型杂合突变。先证者位于外显子6的第800位碱基发生了一个杂合错义突变,该碱基对中的碱基T被C取代(c.800T>C),其编码的氨基酸由亮氨酸改变为脯氨酸(p.L267P);位于外显子7的第1015位碱基发生了一个杂合错义突变,该碱基对中的碱基C被T取代(c.1015C>T),其编码的氨基酸由精氨酸改变为半胱氨酸(p.R339C)。其中,c.800T>C来自母亲,c.1015C>T来自父亲,弟弟的CTSC基因未见突变。结论 PLS的临床表征与CTSC基因突变有关。

西南地区汉族人群慢性胰腺炎糜蛋白酶C基因突变分析

目的分析西南地区汉族人群慢性胰腺炎(CP)糜蛋白酶C(CTRC)基因突变情况,从基因层面探讨西南地区汉族人群CP发病的机制。方法收集108例西南地区汉族CP患者(CP组)和150例健康对照者(对照组)的外周血,提取白细胞核DNA进行CTRC基因全外显子测序,在线分析比较测序结果,分析CTRC基因突变情况。建立显性遗传模型,根据临床资料分析遗传与吸烟、饮酒的相关性。结果 CP组CTRC基因外显子检出c. 611G> A、c. 703G> T、c. 736C> T杂合错义突变各1例,对照组外显子区域未检出CTRC基因突变。另外发现5个单核苷酸多态性(SNP)位点,均位于内含子区域,分别为c. 40+92T> A、c. 40+133G> A、c. 493+49G> C、c. 493+51C> A、c. 793-137A> G,其中CP组上述位点发生频率分别为0、12. 96%、19. 44%、7. 41%、16. 67%,对照组上述位点发生频率分别为2. 67%、5. 33%、7. 33%、6. 67%、16. 00%,CP组c. 40+133G> A、c. 493+49G> C位点发生频率高于对照组(P均<0. 05)。CP组SNP位点c. 40+133G> A、c. 493+49G> C基因型频率和等位基因频率均高于对照组(P <0. 05或<0. 01)。在显性模型下,CP组与对照组携带c. 40+133G> A位点或c. 493+49G> C位点改变的人群,CP患病风险均增加(P均<0. 05)。在吸烟因素存在的情况下,c. 493+49G> C位点改变的组间分布差异有统计学意义(OR=4. 667,95%CI为1. 341～16. 239,P <0. 05)。结论 c. 611G> A、c. 703G> T、c. 736C> T杂合错义突变可能与西南汉族人群CP发病有关,SNP位点c. 40+133G> A和c. 493+49G> C可能为西南地区汉族人群CP易感位点,有SNP位点c. 493+49G> C改变的吸烟者可能有CP发病倾向。

四川地区汉族人群慢性胰腺炎糜蛋白酶C基因突变的影响因素

目的慢性胰腺炎(CP)是胰腺实质不可逆损伤性疾病,糜蛋白酶C(CTRC)基因改变可能与CP发病有关。文章分析四川地区汉族CP人群CTRC基因的突变情况,探讨其与临床关系。方法采集106例CP患者以及148例健康对照者外周血,提取DNA进行CTRC基因全外显子测序,并分析临床相关性。结果发现1例c.611G>A杂合错义突变; 3个单核苷酸多态性(SNP)位点改变,包括1个新的SNP位点c.40+133G>A及2个已知的SNP位点改变(rs6679763和rs555015)。c.40+133G>A和rs6679763位点突变在病例组与对照组间分布差异有统计学意义(P=0.029、P=0.011)。临床基线资料表示吸烟(P=0.042)、胆道疾病(P=0.013)、血糖(P=0.017)组间差异有统计学意义。消除混杂因素,吸烟具有组间差异性(OR=2.817,95%CI:1.016～7.811,P=0.047),rs6679763突变位点分布病例组高于对照组(OR=4.893,95%CI:1.152～20.781,P=0.031)。未发现基因位点突变与环境存在相乘交互作用。结论吸烟、胆道疾病、血糖、c.611G>A,rs6679763和c.40+133G>A位点变异可能与CP有关,考虑吸烟及rs6679763位点变异是CP的独立危险因素;并初步验证了CTRC基因SNP位点rs6679763和c.40+133G>A以及点突变位点c.611G>A是四川地区汉族人群的易感基因位点。

糜蛋白酶C基因在胰腺疾病中的研究进展

胰腺是人体重要的消化器官,同时具有内分泌和外分泌功能,胰腺疾病包括炎症,肿瘤等,会导致胰腺内/外分泌功能的紊乱,严重危害人体健康,影响病人生活质量。糜蛋白酶C(CTRC)是胰腺一种消化酶,以酶原形式由胰腺腺泡细胞分泌,在肠道激活后参与胰蛋白酶/酶原的活化与降解等生理过程,CTRC的失活或降解等病理生理过程等在胰腺疾病发生发展过程中具有一定临床意义。近年来,其编码基因已被证实是慢性胰腺炎(CP)的易感基因,且与胰腺癌(PC)的恶性行为有一定关系。本文就CTRC基因结构,功能及其在胰腺疾病中的各种突变与表达谱进行综述。

胃蛋白酶C基因在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞内的表达

目的研究胃蛋白酶原基因C在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞的表达。方法采用地高辛标记的RNA探针,用原位杂交的方法研究了大鼠胃底腺中胃蛋白酶C产生细胞的个体发育。结果大鼠胃腺在胚胎18.5天开始出现,但没有形态分化,胃蛋白酶的mRNA在出生后3.5天首次被原位杂交法检出,其蛋白酶产生细胞在出生后8周发育成熟,胃蛋白酶的mRNA表达在主细胞和颈黏液细胞内,其发育可分为4个阶段①胚胎18.5天至出生后0.5天;②出生后3.5天至2周;③出生后3周至4周;④出生后8周。在胃底腺发育过程中,胃蛋白酶mRNA的表达至局限于某种特定的细胞,这些细胞的分布具有明确的阶段特异性。结论认为在发育生物学的研究中,胃蛋白酶C可作为胃上皮细胞分化的分子标志。

小鼠创伤/感染皮肤中组织蛋白酶C的表达变化

目的:研究小鼠创伤/感染皮肤中组织蛋白酶C的表达及意义。方法:15只C57BL/6J小鼠随机分为健康对照组、单纯创伤组和创伤合并感染组(n=5);除对照组外,其他两组均在各小鼠的脚掌皮肤表面制备创伤及感染模型,采用苏木精-伊红染色技术、免疫组化染色观察小鼠皮肤中组织蛋白酶C的表达情况;所得结果用SPSS 20.0统计软件进行统计分析。结果:在小鼠创伤或感染的皮肤中组织蛋白酶C的表达量明显上调,主要表达于炎性免疫细胞、上皮细胞以及血管内皮细胞,对照组上皮内无阳性表达,仅结缔组织内有少量阳性细胞;半定量分析显示:单纯创伤组和创伤合并感染组的组织蛋白酶C表达强度相似(P>0.05),且均明显高于对照组(P<0.05)。结论:组织蛋白酶C与上皮局部的炎症或免疫防御有着密切的联系。

血清肌酐/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C比值对胰腺癌患者的早期诊断与预后价值

目的探讨血清肌酐/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(sCr/CysC)比值对胰腺癌早期诊断和预后评估的价值。方法回顾性分析苏州大学附属第一医院2020年1月至2021年12月收治的60例初诊胰腺癌患者、30例胰腺良性肿瘤患者和30例健康对照者的临床资料。比较三组间sCr/CysC比值、C反应蛋白(CRP)、L3骨骼肌指数(L3-SMI)、Alb和CA199水平的差异。采用ROC曲线分析sCr/CysC比值对胰腺癌的诊断效能。根据sCr/CysC比值中位数将胰腺癌患者分为高比值组和低比值组,应用Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析sCr/CysC比值对胰腺癌预后的预测价值。结果与胰腺良性肿瘤组和健康对照组相比,胰腺癌组的sCr/CysC比值和Alb水平显著降低,而CRP水平明显升高(均P<0.05)。与低sCr/CysC比值组相比,高比值组患者的性别构成、年龄和L3 SMI水平差异有统计学意义(均P<0.05)。sCr/CysC比值对胰腺癌的诊断ROC曲线下面积为0.640(95%CI:0.524~0.756,P<0.05),在cut-off值为0.69时敏感性为46.7%,特异性为83.3%。相关分析显示,sCr/CysC比值与L3-SMI呈正相关(r=0.425,P<0.01)。生存分析表明,高sCr/CysC比值组患者的中位生存期显著长于低比值组(379 d vs 210 d,P<0.01)。Cox回归分析确认sCr/CysC比值是胰腺癌预后的独立危险因素(HR=0.151,95%CI:0.028~0.826,P<0.05)。结论sCr/CysC比值可能是胰腺癌早期诊断和预后评估的有效指标,有望为胰腺癌的临床诊疗提供参考。

血清碱性磷酸酶、同型半胱氨酸及半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与糖尿病足下肢动脉粥样硬化的关系

目的分析糖尿病足患者血清碱性磷酸酶(ALP)、同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys-C)水平与糖尿病足及下肢动脉粥样硬化(AS)的关系。方法收集2021年1月至2021年12月于山东中医药大学附属医院住院治疗的80例糖尿病足患者和36例同期健康体检者的临床资料,分别设为观察组和对照组。根据彩色多普勒超声测定的下肢股动脉内-中膜厚度(FAIMT)测定结果将观察组患者分为FAIMT增厚组(n=39)和斑块组(n=41)。比较各组患者的临床特征、血液指标[ALP、Hcy、Cys-C、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及空腹血糖(FBG)],采用多因素Logistic回归模型分析糖尿病足发生的危险因素,通过受试者操作特征(ROC)曲线确定ALP、Hcy、Cys-C对糖尿病足的诊断价值。结果观察组的年龄大于对照组,ALP、Hcy、Cys-C、FBG水平均高于对照组,TC、HDL-C水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。斑块组患者的Hcy水平高于FAIMT增厚组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。多因素分析结果显示,年龄、FBG、ALP、Hcy、Cys-C均是糖尿病足发生的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线分析结果显示,ALP、Hcy、Cys-C诊断糖尿病足的AUC分别为0.724、0.640、0.895,对糖尿病足均具有较好的诊断价值。结论ALP、Hcy、Cys-C与糖尿病足的发生密切相关,且与下肢AS程度有关,对糖尿病足患者病情的诊断具有重要临床意义。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C与糖尿病肾病的相关性

目的探讨半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)与糖尿病肾病(DKD)的相关性。方法收集2019年1月至12月陕西省人民医院内分泌科住院的122例2型糖尿病(T2DM)患者的临床资料,按尿白蛋白与肌酐比值(UACR)分为单纯糖尿病(DM)组(UACR<30 mg/g,89例)、DKD组(UACR≥30 mg/g,33例)。比较两组临床资料,采用logistic回归分析T2DM患者发生DKD的危险因素,绘制受试者操作特征(ROC)曲线评价Cys C对DKD的预测价值。结果DKD组收缩压、碱性磷酸酶、总蛋白、球蛋白、血清肌酐、尿微量白蛋白、尿α_(1)微球蛋白、UACR、Cys C均高于单纯DM组,病程长于单纯DM组(P<0.05)。logistic回归分析显示,Cys C是DKD的危险因素(OR=28.369,95%CI:1.208~666.129,P=0.038)。ROC曲线分析显示,Cys C预测DKD的曲线下面积为0.757(P<0.05)。结论Cys C与T2DM合并DKD密切相关,检测Cys C可用于评估DKD病情进展。