hCG单克隆抗体的蛋白A亲和色谱纯化

建立了亲和色谱法从小鼠腹水中纯化人绒毛膜促性腺激素(hCG)单克隆抗体。将含hCG单克隆抗体的小鼠腹水经离心、过滤预处理后,采用蛋白A亲和色谱柱纯化,考察了上样缓冲液的pH和离子强度、洗脱液的pH和流速对抗体纯度及回收率的影响。用间接ELISA法测定纯化后单克隆抗体生物学活性。结果显示,以20mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0,含3mol/L氯化钠)为上样缓冲液,0.1mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH3.0)为洗脱液,流速为5ml/min时,hCG单抗的纯度大于98%,回收率为75%。纯化后的单抗效价没有下降。