TWIST1通过激活自噬促进肺动脉高压大鼠模型肺血管重塑作用及机制的实验研究

目的探讨Twist相关蛋白1(Twist-related protein 1,TWIST1)对野百合碱(Monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)大鼠肺血管重塑的影响及机制。方法将50只健康雄性SD大鼠,随机分为5组,即对照组、模型组、二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)溶剂处理的模型组、TWIST1抑制剂Harmine组、自噬抑制剂羟氯喹组。检测右心室收缩压(RVSP),右心室肥厚指数(RVHI)和内膜厚度百分比(MT%)以评估大鼠PAH的发展。采用免疫印迹法检测TWIST1,自噬相关蛋白LC3B以及RND3的蛋白质水平。结果与对照组比较,MCT诱导的PAH大鼠中TWIST1和LC3B表达增加,分别为对照组的2.32±0.22倍和0.87±0.19倍,差异具有统计学意义(t=15.812,11.227,均P<0.001);同时RND3表达下调,为对照组的0.32±0.07倍,差异具有统计学意义(t=-13.003,P<0.001)。给与TWIST1抑制剂Harmine或自噬抑制剂羟氯喹可显著抑制MCT诱导的自噬激活和RND3表达下调,同时降低了MCT诱导的PAH大鼠的RVSP,RVHI和MT%,差异具有统计学意义(t=-24.277~16.636,均P<0.001)。结论TWIST1通过诱导自噬激活促进肺血管重塑,促进PAH的发生发展。

Twist、N-cadherin蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨Twist、N-cadherin蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及临床意义。方法选择喉鳞癌标本80例,同时选择癌旁组织标本30例,应用免疫组化SP法检测Twist、N-cadherin蛋白表达情况。结果Twist、N-cadherin蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.01);Twist、N-cadherin蛋白的表达在低度分化、Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移和有远处转移的喉鳞癌组织中分别明显高于高、中度分化、Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移和无远处转移的喉鳞癌组织(P<0.05,P<0.01),而与性别、年龄无关(P>0.05);Twist与N-cad-herin蛋白在喉鳞癌组织中的表达呈明显正相关(r=0.402,P<0.01)。结论 Twist、N-cadherin蛋白高表达可作为喉鳞癌发生浸润转移的重要生物学指标,预示肿瘤的侵袭性较高,预后不良。

原发性乳腺癌恶性钙化乳腺钼靶摄片征象特征与TWIST蛋白、VEGF及E-cadherin的表达相关性研究

背景与目的:现阶段国内女性群体中原发性乳腺癌发生率呈逐渐提升趋势,对女性身心健康造成极大影响。因此对原发性乳腺癌恶性钙化钼靶摄片征象特征及与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)以及上皮钙黏蛋白(E-cadherin,E-Cad)表达相关性进行系统分析,以便于为临床诊治提供针对性指导。方法:运用回顾性分析法对常州市第二人民医院2015年3月—2019年4月收治的经手术后病理学检查证实的243例原发性乳腺癌患者的资料进行研究,均于术前接受乳腺钼靶摄片检查,并在术后接受了病理、免疫组织化学检测,以手术后病理学检查结果为金标准,分析本组诊断结果。结果:本组243例患者中,恶性钙化118例,无恶性钙化125例;通过分析,Twist蛋白和乳腺癌恶性钙化的发生、形态以及数量存在显著相关性,且乳腺癌组织内Twist蛋白阳性表现与VEGF阳性表达呈正相关(P<0.05),Twist蛋白阳性表现与E-Cad阳性表达呈负相关(P<0.05)。结论:Twist蛋白、VEGF、E-Cad表达可为乳腺癌恶性钙化钼钯摄片诊断提供生物学基础,有着重要临床意义。

Twist蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及其与预后关系

目的观察Twist蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)及其癌旁组织中的表达情况,探讨Twist蛋白在喉鳞癌发生、发展过程中的意义。方法收集我院病理科2005～2010年喉鳞癌手术标本80例,应用免疫组织化学法检测Twist蛋白,同时从中选择30例检测癌旁组织Twist蛋白作为对照。结果①80例喉鳞癌标本中,Twist蛋白阳性率为66.3%,高于其癌旁组织Twist蛋白阳性率30.0%,二者比较差异有统计学意义(χ2=11.657,P<0.01)。②Twist蛋白在低度分化、Ⅲ～Ⅳ期、T3～T4、淋巴结和远处转移的喉鳞癌患者中的表达明显高于在高、中度分化、Ⅰ～Ⅱ期、T1～T2、无淋巴结和远处转移的喉鳞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且均与性别、年龄无关(P>0.05)。③获随访的75例喉鳞癌中5年总生存率为42.7%,其中Twist蛋白阳性表达者的生存率为32.1%,阴性表达者的生存率为55.6%。Kaplan-Meier生存分析结果示Twist蛋白阳性表达的喉鳞癌患者生存率明显低于阴性表达者,差异有统计学意义(χ2=6.219,P<0.05)。结论 Twist蛋白高表达可能为喉黏膜恶性转变及喉鳞癌发生浸润转移的重要生物学标志,预示肿瘤侵袭性较高和预后不良。

Twist蛋白在非小细胞肺癌中的表达水平及其与VEGF的关系

目的探讨转录调节因子Twist在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平及其与血管内皮生长因子(VEGF)关系。方法采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组织化学方法检测50例NSCLC及15例癌旁正常肺组织中Twist蛋白、VEGF的表达,并分析两者与临床病理特征的关系。结果 NSCLC组织中Twist阳性率44%,明显高于癌旁正常肺组织,其表达与肿瘤分化程度有关。VEGF在肺癌、癌旁正常肺组织中的阳性率分别为50%和26.67%(P<0.05),其表达与肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关。Twist蛋白与VEGF的表达之间存在显著正相关(r=0.560 2,P<0.01)。结论在NSCLC中Twist蛋白、VEGF表达明显增高,其表达与肿瘤分化、分期有关。NSCLC组织中Twist与VEGF表达的上调对肿瘤的发生、发展起着重要作用。

Twist1蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测Twist1蛋白在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生、发展过程中的作用及其临床病理学意义。方法:采用免疫组织化学法检测Twist1蛋白在199例胃癌、25例高级别上皮内瘤变、24例低级别上皮内瘤变、46例肠上皮化生、17例慢性萎缩性胃炎和23例正常胃黏膜组织中的表达水平,分析Twist1蛋白表达与胃癌临床病理学特征之间的关系。结果:Twist1蛋白在胃癌组织中的表达明显高于上皮内瘤变、肠上皮化生、慢性萎缩性胃炎和正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.001)。胃癌组织中Twist1蛋白的表达水平在肿瘤直径≥4cm组明显高于肿瘤直径<4cm组(P<0.01);有淋巴结转移组明显高于无转移组(P<0.01);死亡组明显高于生存组(P<0.01)。但Twist1蛋白的表达水平与胃癌类型、患者年龄、肿瘤发生部位、T分级、肿瘤分化、临床分期和肿瘤组织学类型无统计学关联(P>0.05)。结论:Twist1蛋白在胃癌组织中高表达,并与肿瘤大小、转移情况和患者预后有关,其可能是胃癌发生的一个重要因素。

Twist蛋白在结直肠癌中的表达水平及其促进癌症发展的机制研究

目的研究Twist蛋白在结直肠癌中的表达水平,其对结直肠癌细胞的增殖以及侵袭能力的影响,并探讨其促进癌症发展具体的机制。方法经结肠镜活检取20例患者组织和20例正常人的标本,采用实时定量PCR的方法检测了Twist的m RNA表达水平。采用脂质转染法对结直肠癌细胞系CT-26细胞进行RNA干扰,采用CCK-8法及transwell法观察干扰Twist后对结直肠癌细胞的增殖以及侵袭能力的影响;采用RT-PCR以及Western blot检测了CT-26细胞中MMP-9的m RNA及蛋白水平。结果 Twist在结直肠癌组织中的m RNA水平显著高于对应癌旁组织以及对照组(P<0.05);在伴有淋巴结转移的癌组织中Twist m RNA的表达水平显著高于无淋巴结转移的组织(P<0.05);与转染对照组比较,Twist si RNA转染的CT-26细胞增殖水平及迁徙能力均显著降低(P<0.05);干扰Twist的CT-26细胞能够显著降低金属蛋白酶MMP-9m RNA及蛋白的水平。结论 Twist蛋白能够增加结直肠癌癌细胞的增殖及迁徙能力,其影响机制可能与金属蛋白酶MMP-9有关。

子宫内膜异位症患者异位内膜组织中Twist蛋白、E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白表达变化

目的观察子宫内膜异位症患者异位子宫内膜组织中Twist蛋白、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达变化,探讨三者与子宫内膜异位症的关系。方法采用免疫组化SP法检测30例子宫内膜异位症患者在位内膜组织(在位内膜组)、异位内膜组织(异位内膜组)及30例非子宫内膜异位症患者的正常内膜组织(正常对照组)中的Twist蛋白、E-cadherin、N-cadherin,计算各组蛋白高表达(强阳性表达)率;分析异位内膜组织中Twist蛋白、E-cadherin、N-cadherin表达的相关性。结果异位内膜组、在位内膜组、正常对照组中Twist蛋白高表达率分别为70.0%、30.0%、6.7%,E-cadherin高表达率分别为6.7%、23.3%、73.3%,N-cadherin高表达率分别为66.7%、30.0%、3.3%,Twist蛋白及N-cadherin高表达率在异位内膜组、在位内膜组、正常对照组依次升高,Ecadherin高表达率依次减小(P均<0.05)。异位内膜组织中Twist蛋白表达与E-cadherin表达呈负相关关系(r=-0.463,P<0.01),与N-cadherin表达呈正相关关系(r=0.616,P<0.01);E-cadherin表达与N-cadherin表达呈负相关关系(r=-0.502,P<0.01)。结论子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织中Twist蛋白和N-cadherin表达上调,E-cadherin表达下调,三者相互作用,共同参与了子宫内膜异位症的发生发展。

Twist蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的 观察Twist蛋白在胃癌中的表达情况及其与预后的关系.方法 采用免疫组化PV-900法对110例患者的胃癌组织和癌旁组织分别进行检测.结果 Twist蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的表达率分别为67.3％和9％;Twist蛋白的表达与肿瘤浸润深度（T）（P=0.03）、淋巴结转移（N）（P=0.02）、TNM分期（P=0.009）及肿瘤的复发或远处转移（P=0.009）有关;Twist蛋白阳性是胃癌患者术后预后不良的指征（P=0.003）,且是独立预后因素,具有比其他临床指标更强的预测作用（HR：2.893,95％CI：1.385～6.044）.结论 Twist蛋白是胃癌患者的独立预后因素,提示预后不良,并可应用于临床,以助于胃癌患者的早期诊断、有效治疗和预后判断.

顺铂联合香菇多糖对肺腺癌合并胸腔积液后患者Twist蛋白表皮生长因子受体癌胚抗原水平的影响

目的观察顺铂联合香菇多糖治疗肺腺癌合并胸腔积液的临床疗效,并探讨其与患者血清、胸腔积液Twist蛋白、表皮生长因子受体(EGFR)、癌胚抗原(CEA)水平的关系。方法2016年9月至2018年7月我院诊治的74例肺腺癌合并胸腔积液患者,根据胸腔内化疗方法不同分为治疗组(40例,顺铂联合香菇多糖胸腔内注射治疗)、对照组(34例,顺铂胸腔内注射治疗),3周后复查CT与胸部X线片,评价临床疗效及分析生存情况,评估血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平与化疗效果进行分级及生存指标的关系。结果治疗组临床疗效明显优于对照组,2组临床疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗前血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平均明显下降(P<0.05),而治疗组血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平显著低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,治疗后血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平与化疗效果等级呈正相关(P<0.05)。治疗组中位无进展生存时间(PFS)、中位总生存时间(OS)均较对照组长(P<0.05)。Cox分析显示治疗后血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平与中位PFS、中位OS有关(P<0.05)。2组化疗毒副反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论顺铂联合香菇多糖胸腔内注射治疗可有效地提高肺腺癌合并胸腔积液的临床疗效及改善预后,调节血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平,且血清、胸腔积液Twist蛋白、EGFR、CEA水平与临床疗效、预后密切相关,对临床治疗及评估有一定参考价值。

LRP蛋白、Twist蛋白表达与结直肠癌化疗耐药及预后的关系

目的探究肺耐药蛋白(LRP)、Twist蛋白表达与结直肠癌化疗耐药及预后的关系。方法体外培养结直肠癌SW480,使用siRNA敲低LRP和Twist的表达;并分为正常对照组、干扰LRP组和干扰Twist组;使用蛋白质印记法分别检测各组细胞LRP蛋白和Twist蛋白表达情况;使用MTT检测各组细胞对化疗药物的敏感性,并检测其增殖蛋白Ki67表达情况;使用Transwell检测各组细胞侵袭能力;收集2012年1月至2014年1月于武警宁夏总队医院治疗的结直肠癌患者37例,取其肿瘤样本和癌旁组织,使用蛋白质印记法检测癌组织和癌旁组织LRP蛋白及Twist蛋白表达情况;将患者根据LRP蛋白和Twist蛋白表达情况分为LRP阳性组(25例)、LRP阴性组(12例)和Twist蛋白阳性组(22例)、Twist蛋白阴性组(15例),分别统计各组患者3年生存率。结果相比正常对照组,干扰LRP组LRP蛋白相对表达水平、Ki67蛋白相对表达水平、单位面积侵袭细胞数目显著降低(P<0.05),Twist蛋白相对表达无显著差异(P>0.05);相比正常对照组,干扰Twist组Twist蛋白相对表达水平、Ki67蛋白相对表达水平、单位面积侵袭细胞数目显著降低(P<0.05),LRP蛋白相对表达无显著差异(P>0.05);MTT实验发现干扰LRP组和干扰Twist组细胞耐药性显著降低(P<0.05);LRP阳性组3年生存率为60.00%显著低于LRP阴性组的91.60%(2=3.892,P=0.049);Twist蛋白阳性组3年生存率为54.55%显著低于Twist蛋白阴性组的93.33%(2=6.423,P=0.011)。结论结直肠癌患者癌组织LRP蛋白和Twist蛋白相对表达水平升高;降低LRP蛋白和Twist蛋白表达可以有效抑制直肠癌癌细胞的耐药性,延长患者生存期。

Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的探讨Twist和Vimentin蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达情况及其临床意义。方法收集85例OSCC标本和15例正常口腔黏膜组织标本,应用免疫组化SP法检测在标本中Twist和Vimentin蛋白的表达水平,分析其与口腔鳞癌患者临床病理因素的相关性。结果 Twist蛋白在正常组织中的阳性率为13.3%(2/15),在OSCC组织的阳性率为80.0%(68/85),两组相比差异具有统计学意义(χ~2=26.98,P <0.001),同时其在OSCC中的表达与性别(χ~2=0.23,P=0.63)、年龄(χ~2=0.31,P=0.58)、部位(χ~2=1.46,P=0.23)、组织学分化(χ~2=1.52,P=0.47)等因素无关,与临床分期(χ~2=5.40,P=0.02)、淋巴结转移(χ~2=8.35,P=0.006)等因素有关;Vimentin蛋白在正常组中的阳性率为6.7%(1/15),在OSCC组中为74.1%(63/85),两组差异有统计学意义(χ~2=20.71,P <0.001),同时其表达与性别(χ~2=0.40,P=0.53)、年龄(χ~2=0.17,P=0.68)、部位(χ~2=0.74,P=0.39)、组织学分化(χ~2=4.58,P=0.10)等因素无关,与临床分期(χ~2=4.51,P=0.034)、淋巴结转移(χ~2=6.75,P=0.009)等因素有关。Spearman等级相关分析显示,Twist与Vimentin蛋白存在正相关(r=0.578,P<0.05)。结论在OSCC中Twist和Vimentin蛋白表达增加,并且两者存在正相关关系,提示在OSCC中两者可能共同参与肿瘤的发生和发展。

Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达及细胞迁移的影响

目的探讨Hedgehog信号通路关键蛋白Gli1对人肝癌细胞中Twist1蛋白表达和细胞迁移的影响。方法应用蛋白免疫印迹技术在Huh7、Hep G2、PLC、SMMC-7721、Bel-7404五种人肝癌细胞中筛选Gli1高表达细胞系,根据Gen Bank数据库设计并合成3条Gli1-siRNA经质粒转染到已筛选出Gli1高表达的人肝癌细胞中,分别为p GCsi-U6-GLi1siRNA-1(siRNA-1组)、p GCsi-U6-GLi1siRNA-2(siRNA-2组)、p GCsi-U6-GLi1siRNA-3(siRNA-3组),而空白对照组(N组)不转染任何序列,阴性对照组转染阴性对照序列(NC组)。转染48 h后分别使用实时荧光定量PCR和Western blotting法检测各组Gli1mRNA和蛋白表达,筛选出最佳siRNA序列。对筛选出的最佳siRNA序列组的细胞,采用细胞划痕实验观察其迁移能力,用Western blotting检测该组细胞中Twist1、E-Cadherin蛋白表达。结果Western blotting检测结果提示,与另外4种人肝癌细胞比较,Bel-7404细胞株中Gli1表达量增加(P均<0.05);与其他组比较,siRNA-2组中的Gli1表达量最低(P均<0.05);与N组比较,siRNA-2组中的Twist1蛋白表达下调,E-cadherin表达上调,N-Cadherin和Vimentin表达下调,迁移能力下降(P均<0.05)。结论 Gli1可上调肝癌Bel-7404细胞中Twist1蛋白表达,促进人上皮-间质细胞转化及迁移。

Twist、Snail蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Twist、Snail蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学法检测60例喉鳞癌组织、30例癌旁组织中Twist、Snail蛋白的表达情况。结果喉鳞癌组织中Twist的阳性表达为68.3%(41/60),Snail的阳性表达为71.7%(43/60),均显著高于癌旁组织中的表达率;在喉鳞癌组织中Twist、Snail蛋白的表达之间存在显著正相关,相关系数(r)为0.529(P<0.01)。结论喉鳞癌组织中存在Twist、Snail蛋白的高表达,两者的联合表达能增加肿瘤细胞侵袭力,促进喉鳞癌的浸润、转移。

宫颈癌组织中Twist与E-cadherin蛋白的表达及其意义

目的观察分析Twist蛋白(Twist)与E-钙黏蛋白(E-cadherin)在宫颈癌组织中的表达水平,并探讨其临床意义。方法分别选取实施手术治疗的宫颈炎、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌患者各50例,取手术切除组织采用免疫组化法检测Twist蛋白与E-cadherin蛋白的表达情况。结果在宫颈癌组织中Ⅱb~Ⅲa期、低/未分化、淋巴血管间隙有浸润、有淋巴结转移者Twist蛋白阳性表达率较高,E-cadherin蛋白表达率更低(P<0.05)。结论在宫颈癌组织中Twist蛋白异常高表达而E-cadherin蛋白异常低表达,且与病理学特征均存在有一定的关联,推测两种蛋白在宫颈癌的发生和发展过程中很可能起着重要的作用。

Twist在涎腺腺样囊性癌中的表达及其临床意义

目的探讨转录因子Twist在涎腺腺样囊性癌中的表达水平及其与各临床病理因素的关系。方法采用免疫组化方法检测48例涎腺腺样囊性癌、18例多形性腺瘤和10正常腮腺组织中Twist蛋白的表达情况,分析Twist表达与腺样囊性癌临床病理因素的关系。结果Twist在涎腺腺样囊性癌组织中的表达水平明显高于多形性腺瘤和正常腮腺组织(P<0.05)。Twist表达与腺样囊性癌的病理分型、嗜神经侵袭、术后复发及远位转移有相关性(P<0.05)。结论Twist蛋白表达可能与涎腺腺样囊性癌的分化调节、嗜神经侵袭及远位转移有关。检测Twist的表达水平对判断腺样囊性癌患者的预后有一定的参考价值。

Twist、E-cadherin在胆管细胞癌中的表达及意义

目的:探讨转录因子Twist及上皮黏附分子E-cadherin在人肝内外胆管细胞癌、癌旁和正常胆管中的表达及其意义.方法:收集2008-01/2009-03华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科和胰腺外科中心手术切除的胆管细胞癌患者49例,其中肝内胆管细胞癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)29例,肝外胆管细胞癌(extrahepatic cholangiocarcinoma,ECC)20例;另取24例癌旁组织(ICC与ECC各12例)、20例正常的胆管组织作为对照.免疫组织化学法检测Twist及E-cadherin的表达,分析其临床病理意义.结果:Twist蛋白在ICC及ECC中表达明显强于癌旁组织或正常胆管(79.31%,80.0%vs20.83%,15.0%,均P<0.05);E-cadherin在ICC及ECC中表达明显弱于癌旁组织或正常胆管组织(44.83%,40.0%vs95.24%,100%,均P<0.05),组间表达差异有显著性;Twist和E-cadherin在胆管细胞癌中表达呈高度负相关(r=0.67,P<0.01);Twist蛋白表达水平与年龄、性别及组织病理分级无关(P>0.05),而与CA19-9水平、肿瘤浸润及淋巴结转移有关(P<0.01).结论:Twist与E-cadherin的异常表达与胆管细胞癌的发生发展相关;Twist可能参与了胆管细胞癌浸润转移的过程.

Twist介导上皮间质转化参与胃癌干样细胞的形成及其相关机制的研究

目的研究Twist蛋白在胃癌干样细胞向上皮间质转化过程中的作用机制。方法采用免疫组化检测方法对42例胃癌标本中的Twist蛋白、人低氧诱导因子1α(HIF-1α)水平进行检测;并对同期体检健康人群胃黏膜组织中的Twist蛋白、HIF-1α水平进行检测。比较两组研究对象的Twist蛋白、HIF-1α阳性率,分析其与胃癌干样细胞转化上皮间质的关系。结果胃癌组Twist蛋白阳性率(59.52%)明显高于对照组(16.67%),胃癌组HIF-1α阳性率(64.29%)亦明显高于对照组(21.43%),差异均有显著性(P<0.05)。胃癌患者Twist、HIF-1α的表达与淋巴转移、分化程度、浸润深度、淋巴结转移和远处转移有密切关系(P<0.05),但与年龄、性别和肿瘤大小无明显相关性(P>0.05)。结论 Twist蛋白的表达参与胃癌干样细胞向上皮间质转化的过程,其表达与胃癌的转移和侵犯相关,对胃癌的诊断、治疗和预后具有一定的指导意义。

转录因子Twist、Snail在宫颈鳞癌中的表达及其与血管生成的关系

目的探讨Twist、Snail蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达情况及其与微血管密度的关系。方法采用免疫组织化学方法对60例宫颈鳞癌组织Twist及Snail蛋白的表达进行检测,分析其与临床病理特征的关系。CD34抗体标记癌组织内血管内皮细胞数量,计算微血管密度(MVD)。结果宫颈鳞癌组织中Twist及Snail的阳性表达均与患者的组织学分级及临床分期无关(P>0.05),与淋巴结转移有关(P<0.05)。Twist及Snail阳性表达组MVD显著高于Twist、Snail阴性组。在宫颈鳞癌组织中Twist及Snail蛋白的表达之间存在显著正相关(r=0.529,P<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中存在Twist及Snail蛋白的高表达,两者的联合表达可能增加肿瘤细胞的侵袭力,并且可以通过微血管生成在宫颈鳞癌的浸润、转移过程中发挥促进作用。

miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1的调节作用

目的:探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对于Twistl的调节。方法:本实验利用生物信息学方法预测Twistl的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后,利用RT-PCR、Western blot、t检验分析Twistl的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580通过结合在Twistl的3'UTR调节其表达。结果:1)在MCF-10A细胞系中Twist1与miR-580的表达呈负相关;2)在MCF-10A细胞系中转染miR-580类似物后,Twist1的表达下调;在MCF-10A细胞系中转染miR-580抑制物后Twistl的表达上调;3)在MCF-10A细胞系中引人miR-580类似物后细胞迁移能力降低;4)miR-580直接结合在Twistl的3'UTR。结论:miRNA-580在MCF-10A细胞系中通过结合在Twistl的3'UTR负向调节Twist1的表达从而克制细胞的迁移。