不同发酵菌种及发酵时间对蛋酪风味成分的影响

为了研发一种以鸡蛋为主要原料良好风味的蛋酪产品,利用感官评价、电子鼻和顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用技术对毛霉、米根霉、酵母菌及乳酸菌发酵的蛋酪样品进行风味成分分析。结果表明,米根霉复配酵母菌发酵20 h时蛋酪风味最佳;电子鼻分析发现,判别因子能够很好地区分不同菌种发酵的蛋酪样品;通过GC-MS分析检出98种不同的挥发性风味物质,主要挥发性风味物质是由醛类、酯类、醇类、酮类以及酸类等化合物组成,其中米根霉复配酵母样品组中呈现良好风味的醇类和酯类物质含量最多,而呈现不良风味的成分如壬醛、烯醛、苯甲醛、辛醛等含量低或者没有检出。因此,米根霉复配酵母菌发酵可以成为蛋酪研发的良好发酵剂。

离子交换树脂法规模化生产乳源酪蛋白糖巨肽及其对流感病毒的血凝抑制活性

目的:优化规模化生产乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)的工艺条件,并探讨其对流感病毒的血凝抑制能力。方法:以阴离子交换树脂为分离介质,唾液酸含量为产品的活性检测指标,分别从上样体积、上样流量、洗脱液浓度、洗脱液体积和树脂使用周期5个工艺条件,在前期小试和中试的基础上,考察从乳清粉中规模化生产CGMP;同时利用血球凝集抑制试验验证产品CGMP对流感病毒的抑制活性。结果:优化的CGMP产品技术路线为上样体积3BV、上样流量0.8 L/min、洗脱体积1BV、洗脱液浓度0.6 mol/L、树脂适宜使用周期4次。该工艺条件下处理乳清粉溶液体积为108 L(2160 g)、树脂36 L,得到CGMP产品21.183 g,得率为0.981 g/100 g,产品纯度为89.032%,回收率为51.972%,唾液酸含量为21.503 g/100 g,蛋白CGMP产品对流感病毒A(H1N1)和流感病毒B的最低抑制质量浓度分别为1.0000,1.2500 mg/mL。结论:利用优化的技术路线生产获得CGMP产品的纯度和唾液酸含量均优于市售商品CGMP,且对流感病毒有明显的抑制作用。

酪蛋白糖巨肽对花生过敏原免疫反应性的影响

目的 探究酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptides,CGMP)与花生过敏原相互作用并降低其免疫反应性的潜力。方法 通过蛋白-蛋白分子对接技术探讨CGMP与Ara h1、Ara h2是否有相互作用的潜力。进一步通过混合水浴加热制备CGMP与花生蛋白的混合溶液(mixed solution of casein glycomacropeptides and peanut proteins,MCGP),建立MCGP致敏、花生蛋白激发的BALB/c小鼠模型,研究MCGP对花生过敏反应的影响。最后使用圆二色谱法研究酪蛋白糖巨肽与Ara h1、Ara h2的相互作用力及对其结构的影响。结果 CGMP与Ara h1、Ara h2间存在次级键(盐桥、氢键、范德华力),部分作用于过敏原表位;与花生蛋白过敏组相比, MCGP致敏组血清中的花生蛋白特异性免疫球蛋白E (specific immunoglobulin E, sIgE)、sIgG1、sIgG2a含量显著下降,白介素-4 (interleukin-4, IL-4)、IL-5、组胺水平显著下降,转化生长因子-β (transforming growth factor-β, TGF-β)、γ干扰素(interferon-gamma, IFN-γ)水平显著升高, MCGP中Ara h2的α-螺旋与β-折叠的比例改变。结论 CGMP能够改变Ara h2的结构,遮蔽花生过敏原表位,抑制sIgE、sIgG结合Ara h1、Ara h2,降低部分花生过敏原的免疫反应性。

乳来源的酪蛋白糖巨肽(CGMP)的开发概况

酪蛋白糖巨肽 (CGMP)主要是κ 酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽 ,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性 ,可广泛地应用于保健食品和医药品。文章综述了CGMP的一些生理功能进展以及其生产制备工艺的现状 ,同时也介绍了它在食品和医药品中的应用前景。

乳源酪蛋白糖巨肽对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群多样性的影响

研究乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠肠道菌群多样性的影响,从肠道菌群角度探讨乳源CGMP改善溃疡性结肠炎与肠道菌群变化关系的可能机制。恶唑酮(oxazolone,OXZ)诱导小鼠UC模型,设立正常对照组、模型对照组、乳源CGMP组(50 mg/(kg·d))和柳氮磺胺吡啶(salazosulfapyridine,SASP)治疗组(40 mg/(kg·d)),其中正常对照组和模型对照组灌胃相应剂量的生理盐水,连续灌胃7 d。利用Ion Torrent PGM技术检测实验期间小鼠肠道菌群多样性的变化。UC小鼠肠道菌群结构失调,其肠道菌群多样性降低以及优势菌群比例下降。对测序序列通过主成分分析(principal component analysis,PCA)、Uni Frac等统计分析发现,UC小鼠肠道中厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)的丰度降低而放线菌门(Actinobacteria)和变形菌门(Proteobacteria)的丰度升高。乳源CGMP干预后UC小鼠肠道菌群多样性增加,厚壁菌门和拟杆菌门的相对比例高于模型组,提示乳源CGMP可通过调节失衡的肠道菌群来改善UC。

酪蛋白糖巨肽的生理功能及发展前景

酪蛋白糖巨肽(Casein Glycomacropeptide,简称CGMP)是一种含有唾液酸的糖肽,用凝乳酶或酸性蛋白酶水解牛乳酪蛋白(主要是κ-酪蛋白),乳清中含有CGMP。简述CGMP的化学结构、制备、检测方法、生物活性、研究现状及应用前景。

采用盐析及Q Sepharose FF分离纯化酪蛋白胃蛋白酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

本文探讨了利用了(NH4)2SO4分级沉淀、透析脱盐及Q-SepharoseFF层析分离纯化酪蛋白的胃蛋白酶水解物中的CGMP的工艺。结果表明:采用60%饱和度的(NH4)2SO4盐析,可从上清液中直接回收高纯度CGMP,得率为0.71%。低饱和度的(NH4)2SO4可有效脱除杂蛋白。脱盐粗提物CGMPQ-SepharoseFF层析条件为:pH8.5、20mmol/LTris缓冲液平衡上样,用含0.3mol/LNaCl、20mmol、pH7.1的Tris缓冲液洗脱;浓缩物最大上样量为34.2mg蛋白/ml树脂。利用优化的工艺对水解液层析纯化,纯化产物得率约为2.19%(以酪蛋白计),总结合态唾液酸回收率为87.4%(以酶解液中的唾液酸计),糖基化度可提高到0.472以上。整个工艺路线简便、快捷、成本较低,适合工业化生产。

酪蛋白糖巨肽对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响

采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)分析不同剂量酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响,揭示乳源CGMP是否有增殖肠道关键益生菌的功能。选用50只健康BALB/c小鼠,随机分为对照组,安慰组(灌胃生理盐水0.2 m L),乳源CGMP低、中、高剂量组(灌胃等体积不同质量浓度的乳源CGMP),灌胃周期为2周。于灌胃后第0、3、5、7、9、11、15天及停止灌胃后1周(第21天)采集的小鼠新鲜粪便,并进行粪便菌体基因组DNA抽提。依据双歧杆菌的16S rRNA基因序列设计5对种属特异性引物,以两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)CICC6071的基因组DNA作为标准品,进行梯度稀释制作标准曲线;分析样品PCR扩增产物的熔解曲线,评价反应的特异性。结果表明:Real-time PCR可准确定量小鼠肠道内双歧杆菌数量;且灌胃中剂量乳源CGMP可以促进小鼠肠道内双歧杆菌的增殖,在灌胃第11天时小鼠肠道内双歧杆菌数量达到最高值,即乳源CGMP对小鼠肠道双歧杆菌的增殖作用存在剂量选择性。

干酪乳清中酪蛋白糖巨肽的分离纯化研究

以酶凝干酪乳清为原料,通过硫酸铵沉淀、透析、超滤和离子交换层析等操作,分离提取酪蛋白糖巨肽。通过单因素分析和正交试验,优化出最佳提取工艺条件,同时采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。实验结果表明:采用20%硫酸铵终浓度来沉淀乳清中的杂蛋白,沉淀率达到55%;超滤法纯化糖巨肽的最佳工艺条件为:温度45℃,压力0.2MPa,时间35min;采用D201GF树脂进行离子交换层析处理后制得的酪蛋白糖巨肽的纯度为83.97%;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳条件:浓缩胶浓度为3%,分离胶浓度15%,电泳电压为80V,电泳结果显示,酪蛋白糖巨肽在16kDa附近有清晰条带。

超滤法纯化酪蛋白凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

酪蛋白糖巨肽(CGMP)是蛋白酶酶解κ-酪蛋白得到的C末端亲水性糖肽,具有多种生理功能。研究了超滤法分离纯化CGMP的条件,得到超滤的最佳条件是在室温下,压差为0.02MPa,浓缩比为8。通过此方得到了比较纯的CGMP,蛋白回收率为1.77%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为70.1 mg/g,并且此方法适用于工业化生产。

乳清中酪蛋白糖巨肽的制备及纯化研究

研究了凝乳酶对酪蛋白的最佳酶解条件,确定了其最佳酶解参数为:酶解温度50℃,pH6.5,酶和底物比3%,酶解时间90 m in.酶解后通过12%TCA沉淀法得到纯度为85.25%的酪蛋白糖巨肽.

酪蛋白生物活性肽的特性及应用前景

酪蛋白是一种营养蛋白,不仅具有营养功能,而且还具有重要的生理功能,是生物活性肽的重要来源。到目前为止已有数十种生物活性肽从酪蛋白中水解并得到确认。酪蛋白糖巨肽（Caseino Glycomacro peptide,CGMP）是从乳清中κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的含有糖链的多肽片段,具有独特的营养特性和生理功能,可广泛地应用于功能性食品和生物医药领域。

壳聚糖法分离纯化酪蛋白糖巨肽

探索壳聚糖法分离乳清粉中酪蛋白糖巨肽的工艺条件,通过单因素试验考察混合液pH值、壳聚糖添加量、吸附时间、氯化钠浓度和pH值对酪蛋白糖巨肽分离效果的影响。结果表明最佳分离工艺条件为:在混合液pH4.6时,采用质量浓度2g/L的壳聚糖吸附60min,再用2mol/L、pH9的氯化钠溶液进行洗脱。洗脱液经过超滤除盐、浓缩和冷冻干燥后可获得酪蛋白糖巨肽干粉。采用上述工艺进行放大实验,酪蛋白糖巨肽和唾液酸的回收率分别为83.3%和70.64%,每克酪蛋白糖巨肽含有10mg唾液酸。电泳检测结果显示制备的酪蛋白糖巨肽主要是分子质量约22ku和30ku的酪蛋白糖巨肽多聚体。

乳源酪蛋白糖巨肽改善小鼠溃疡性结肠炎的研究

利用恶唑酮复制小鼠溃疡性结肠炎(UC)以研究乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎的影响。空白对照组小鼠仅饲喂普通鼠食,模型对照组与3个CGMP组灌注恶唑酮诱导溃疡性结肠炎,诱导建模后对3个CGMP组小鼠分别灌胃低、中、高剂量的CGMP(剂量分别为5、50、500mg/(kgbw·d)),连续灌胃5d。期间记录小鼠每天体质量变化,末次灌胃后检测小鼠血清中二胺氧化酶(DAO)活性以及结肠中髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)含量,并观察结肠组织形态。结果表明:低、中、高剂量CGMP均可在一定程度上改善恶唑酮诱导的小鼠溃疡性结肠炎病症,尤其以中剂量CGMP的作用较为明显,因此证实CGMP作为一种营养手段调理溃疡性结肠炎具有很好的前景。

凝乳酶水解酪蛋白生产酪蛋白糖巨肽工艺条件的研究

酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,简称CGMP)是κ-酪蛋白经酶解后生成的一类含有糖链的多肽,具有许多功能特性。本文研究了凝乳酶水解酪蛋白生产CGMP的工艺条件,通过正交实验得到最佳工艺条件是底物浓度10mg/mL、酶的添加量为0.6%、酶解时间为2.5h。唾液酸回收率为80.7%,蛋白质回收率为3.03%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为77.6μg/mg。

乳源酪蛋白糖巨肽对溃疡性结肠炎小鼠MUC2表达的影响

目的:研究酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠黏蛋白MUC2表达的影响,从而进一步探讨CGMP对UC的改善效果。方法:Balb/c实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、CGMP组和SASP(柳氮磺胺吡啶)治疗组。对模型对照组、CGMP组和SASP组利用OXZ灌肠方法建立UC模型,诱导建模后同时给予CGMP组灌胃CGMP溶液(剂量为50mg/(kg.d))以及SASP组灌胃SASP溶液(剂量为40mg/(kg.d)),连续灌胃5d。期间记录小鼠每天体质量变化,进行疾病活动指数(DAI),末次灌胃后处死小鼠,分离结肠进行组织损伤评分并制作石蜡切片,分别进行HE染色和MUC2免疫组化染色。结果:CGMP可有效缓解溃疡性结肠炎小鼠的一般状态,同时显著降低小鼠结肠的大体形态损伤指数,HE染色结果表明CGMP可以维持小鼠肠黏膜上皮细胞的完整,免疫组化结果证实了CGMP可以显著促进小鼠肠黏膜MUC2的分泌。结论:CGMP可以显著促进小鼠结肠MUC2的表达,通过维系肠黏膜的屏障作用来减缓炎症。

响应面法优化酶法制备酪蛋白糖巨肽的工艺条件

采用Minitab方法设计实验,对影响酪蛋白糖巨肽制备的酶解因素进行优化,发现酶解时间、酶解温度、酶解pH、酶与底物比是影响酶解酪蛋白的主要因素.由于唾液酸是酪蛋白糖巨肽的特征性组分,本文以唾液酸的含量表征酶解上清液中酪蛋白糖巨肽的含量.根据Minitab分析的结果,采用Design Expert软件中水平设计和响应面分析法对影响酪蛋白糖巨肽产量的主要因素进行优化,建立唾液酸含量A580对酶解主要条件的二次回归模型,其回归方程的决定系数达到了0.962,9.得到的最佳酶解条件为:酶解时间80,min,酶解温度42.5,℃,酶解pH 6.28,酶与底物比270,U/g.唾液酸含量A580最高为0.653,此时酪蛋白糖巨肽的得率为17.91 mg/g.

凝胶过滤分离纯化酪蛋白糖巨肽的研究

酪蛋白糖巨肽具有重要生理功能,可广泛地应用于保健食品和药品。以Superdex 75 10/300 GL为分离介质,对酪蛋白的凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽进行分离纯化研究,结果表明,分离纯化CGMP的适宜条件为:0.1M醋酸铵平衡上样、洗脱,洗脱流速0.5ml/min;酶解上清液浓缩25倍上样,上样体积0.5ml。分离所得的CGMP由分子量分别为43000Da、30000Da和25000Da,糖基化程度分别为71.6μg/mg、99.1μg/mg和44.4μg/mg的三个组分组成,其平均糖基化程度为76μg/mg,总蛋白回收率为1.45%。

酪蛋白糖巨肽对小鼠肠道免疫系统的影响

研究酪蛋白糖巨肽(CGMP)对正常小鼠肠相关淋巴组织的免疫应答反应的影响,对阐述CGMP的生物学功能具有重要意义。本实验将BALB/c雌性小鼠28只随机分为4组,每组7只,分别为0.9%生理盐水对照组(0.2mL/d),低、中、高3种剂量组(30、120、300μg/d)。连续灌胃16d后,取脾脏、PP结(peyers patches)和肠系膜淋巴结(mesenteric lymph node,MLN),制备细胞悬液,进行三色荧光标记后,用流式细胞仪检测CD3+、CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞亚群的变化。结果表明:CGMP各剂量组均能够促进脾脏和PP结中CD3+和CD3+CD4+细胞的显著增加(P<0.05),高剂量能引起脾脏CD3+CD8+淋巴细胞的显著增多(P<0.05),低剂量能引起脾脏CD3+CD4+/CD3+CD8+的显著增加(P<0.05);低剂量CGMP能使MLN中CD3+CD8+淋巴细胞显著增减少(P<0.01)。研究证实长期灌胃CGMP会诱导肠黏膜产生获得性的免疫应答,并且不会引起机体产生口服耐受。,

酪蛋白糖巨肽对二甲肼干预的大鼠细胞因子网络变化的研究

目的:探讨不同剂量酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)干预二甲肼处理的大鼠时,外周血和结肠组织内细胞因子水平的变化情况,从而推断CGMP对二甲肼处理的大鼠细胞因子网络的影响。方法:60只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、CGMP低剂量组、CGMP中剂量组和CGMP高剂量组。除正常组外,对每只大鼠每周腹腔注射二甲肼,剂量为30 mg/(kg?周),同时,3个剂量CGMP组注射二甲肼的同时每天灌胃CGMP,剂量分别为10、50、100 mg/(kg?d)。15周后,处死大鼠,取其结肠组织和血清,首先检测结肠末端异型隐窝灶个数,然后利用液相芯片法检测结肠组织和血清中的细胞因子的表达水平。结果:乳源CGMP对大鼠体质量影响没有显著性差异,乳源CGMP对大鼠内毒素和活性氧簇的水平具有显著的抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖趋势。乳源CGMP可显著抑制异型隐窝灶的形成,且异型隐窝灶个数呈剂量依赖性降低。乳源CGMP可以显著抑制大鼠体内Th1/Th2类细胞因子的失衡,且呈剂量依赖趋势。结论:乳源CGMP具有改善二甲肼处理的大鼠结肠组织损伤的功能,其机制为乳源CGMP可以有效抑制二甲肼处理的大鼠体内异型隐窝灶的形成,并呈剂量依赖性,研究显示乳源CGMP可以下调大鼠体内IL-4等Th2类细胞因子的异常升高,促进IL-2等Th1类细胞因子的分泌,改善大鼠体内处于失衡状态的细胞因子网络。