蛴螬肽提取物对铅致小鼠肾中毒的解毒保护作用机制研究

目的本实验通过构建醋酸铅致小鼠肾中毒模型,探讨蛴螬肽提取物对小鼠的解毒保护作用机制,为机体铅性肾病的防治提供试验依据。方法随机取小鼠分为对照组、模型组、阳性药组以及不同剂量蛴螬肽组(80、160、320 mg/kg),除对照组外所有组小鼠隔天腹腔注射醋酸铅20 mg/kg,连续15 d。此时对照组和模型组小鼠同时灌服生理盐水而阳性药组小鼠灌服二巯基丁二酸(DMSA 70 mg/kg)混悬液,蛴螬肽组小鼠灌服不同剂量蛴螬肽提取物,每天1次连续15 d,采用HE染色显微镜观察肾组织状态;检测肾功能指标(BUN、Cr)和肾组织中抗氧化酶水平(SOD、GSH-Px)及过氧化物(MDA)含量;RT-PCR、Western Blot技术检测分析Ⅱ相解毒酶(NQO1)、抗氧化酶(HO-1)和信号分子(Nrf2)基因和蛋白表达水平。结果蛴螬肽组与模型组小鼠相比,体重增加但低于对照组,肾组织形态显著改善,血清中BUN、Cr水平显著降低(P<0.05),肾组织中抗氧化酶(SOD、GSH-Px)水平显著提高(P<0.05),MDA含量显著减少,Ⅱ相解毒酶基因(NQO1)、抗氧化酶(HO-1)及信号分子(Nrf2)mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P<0.01)。结论蛴螬肽提取物激活Nrf2-ARE信号通路,增强铅中毒小鼠的抗氧化功能和提高解毒酶基因表达而发挥其解毒保护作用。

蛴螬多肽对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的观察蛴螬多肽提取物对免疫抑制小鼠的免疫功能的影响。方法采取蛋白酶水解提取蛴螬多肽,电泳确定相对分子质量大小,然后每天给小鼠灌服不同剂量多肽连续20 d,除对照组外其余小鼠在实验结束前连续3 d腹腔注射环磷酰胺,试验结束小鼠称体质量、采血、无菌操作制备脾脏细胞,体外培养添加脂多糖和刀豆蛋白A诱导细胞分化,采用MTT和Griess法检测细胞增殖率和NO分泌量;分光光度法和流式技术检测血清溶血素及巨噬细胞吞噬功能,迟发型超敏反应分析免疫原性。结果酶解提取蛴螬多肽质量浓度为37.01 mg/ml,提取率为31.63%,Mr在8 000～9 000。模型组小鼠脾脏肝脏胸腺指数显著低于对照组和蛴螬组,小鼠脾脏和骨髓T、B淋巴细胞存活率及NO分泌量明显低于对照组和蛴螬组,其中骨髓B淋巴细胞存活率显著高于T淋巴细胞,但脾脏和骨髓T淋巴细胞NO分泌量高于B淋巴细胞;对照组和蛴螬多肽组小鼠溶血素吸光度值显著高于模型组,随着蛴螬多肽剂量增加溶血素含量逐渐提高,但不存在剂量效应关系;蛴螬组小鼠血液白细胞数均高于模型组,随着剂量增加白细胞数提高;中高剂量蛴螬多肽组小鼠耳肿胀度高于模型组,随着蛴螬剂量增加耳肿胀度显著增加,存在剂量效应关系;蛴螬组小鼠腹腔骨髓脾脏巨噬吸光度值高于模型组,随着蛴螬多肽剂量增加吸光度值提高,存在剂量效应关系;流式细胞技术检测结果蛴螬组巨噬细胞吞噬鸡红细胞荧光强度强于模型组,巨噬细胞吞噬鸡红细胞阳性细胞数不明显高于模型组,结果提示巨噬细胞吞噬能力强。结论蛴螬多肽具有明显增强免疫抑制小鼠免疫功能的作用。