温度在柑橘凤蝶蛹滞育解除中的作用

调查温度在柑橘凤蝶Papillio xuthus L.滞育蛹解除中的作用。结果显示,羽化温度在15,20,25和30℃时,滞育蛹最早羽化分别在第45,16,11和第5天,发育历期分别为60.3,26.0,15.2和11.6d,羽化持续时间分别为35,19,14和15d。同时低温处理(10℃)显示,25℃时,低温处理0,20和40d后,滞育蛹分别在处理后第38,第14和第13天开始羽化,羽化时间持续分别为40,71和16d,发育历期分别为60.9,28.5和19.0d。结果表明,随着羽化温度升高和低温处理时间延长,滞育蛹羽化时间提前,发育历期缩短。但当羽化温度超过25℃后,滞育蛹发育历期差异已不显著。

葱蝇非滞育蛹的全长cDNA文库构建

葱蝇具有兼性滞育的特性且与果蝇近缘，是昆虫滞育分子机理和冬滞育和夏滞育专化基因比较研究的理想模式种，本研究目的在于构建葱蝇非滞育蛹的全长cDNA文库，为进一步的滞育专化基因筛选、克隆和表达分析奠定基础。利用RNAiso试剂提取葱蝇非滞育蛹的总RNA，采用SMART技术合成全长cDNA，将限制性内切酶Sfi I消化后的cDNA克隆到质粒载体pDNR－LIB，转化入大肠杆菌（DH10B），获得原始文库。经过涂平板测定表明，原始文库的库容量为2．3×10^7个单克隆；随机挑取15个单克隆，通过PCR快速鉴定，插入片段大小在0．4～1．2kb之间，平均大小在0．9kb，重组率达100％。这些结果表明本研究所构建文库的代表性和重组片段的序列完整性达到了用于目的基因的分离筛抗和克隆表达的建库要求。

葱蝇夏滞育蛹的全长cDNA文库构建

葱蝇具有夏滞育的特性且与果蝇近缘.为构建葱蝇夏滞育蛹的全长cDNA文库,并为进一步的夏滞育专化基因筛选、克隆和表达分析奠定基础,利用RNAiso试剂盒提取葱蝇夏滞育蛹的总RNA,采用SMART技术合成全长cDNA,限制性酶切消化后将cDNA克隆到质粒载体pDNR-LIB.经鉴定原始文库的滴度为2.4×107cfu/mL.随机挑取克隆,经PCR快速鉴定,插入片段大小在0.35～2.2kb之间,平均大小约为0.9kb,重组率达100%,获得了高质量的葱蝇夏滞育蛹cDNA文库.

光照对柑橘凤蝶滞育蛹发育历期的影响

为消除滞育对蝴蝶产业的不利影响,利用人工气候箱,对光周期与光脉冲对柑橘凤蝶(Papilio xuthus)滞育蛹发育历期的影响进行了研究。结果显示,20℃LD12:12时,滞育蛹第14 d开始羽化,持续86 d,平均历期39.6 d;LD15:9时第18天开始羽化,持续7 d,平均历期40.7 d。25℃时,LD12:12和LD15∶9:00时开始羽化时间相同,均为第8 d;LD12∶12时羽化持续30 d,平均历期21.9 d,LD15∶9时持续27 d,平均历期为19.8 d。在25℃时,断光后间隔2 h进行2 h光脉冲处理,羽化提前1 d,在第10 d开始羽化,平均历期缩短1.4 d,为12.8 d;断光4 h后进行2 h光脉冲处理,羽化延迟7 d,第10 d开始羽化,平均历期延长1.3 d,为13.1 d。结果表明,光周期和光脉冲对滞育蛹发育历期均有一定影响,但影响不显著。光照不是影响柑橘凤蝶滞育蛹发育的主要因素。

昆虫蛹滞育的神经内分泌调控

从神经内分泌的角度,分别介绍了脑、前胸腺和咽侧体在昆虫蛹滞育中所起的作用。脑主要是通过对促前胸腺激素的合成和释放的控制来参与滞育调节的;而前胸腺的活性过低,分泌的蜕皮激素远远低于启动成虫发育所需要的量,是导致蛹滞育的最根本原因;咽侧体在某些虫种中对蛹滞育可能起到间接的调控作用。

温度对美凤蝶滞育蛹发育的影响

[目的]消除滞育对蝴蝶产业的不利影响。[方法]利用人工气候箱,研究了温度对美凤蝶滞育蛹发育的影响。[结果]研究结果显示,羽化温度在15、20、25和30℃时,滞育蛹最早羽化分别在第63、33、11和14天,发育历期分别为71.2、40.5、22.0和16.8 d,羽化持续时间分别为16.0、16.0、14.0和6.0 d。同时,低温处理(10℃)显示,25℃时,长光照下,低温处理0、20和40 d后,滞育蛹分别在处理后第24、19和17天开始羽化,羽化时间持续分别为22.0、12.0和9.0 d,发育历期分别为35.8、24.5和21.3 d。[结论]随着羽化温度升高和低温处理时间的延长,滞育蛹羽化时间提前,发育历期缩短,温度越高或低温处理时间越长,羽化越早,发育历期越短。25℃和低温处理20.0 d滞育蛹的羽化率最高,是促进美凤蝶滞育发育的较适合条件。

光照对美凤蝶滞育蛹发育的影响

[目的]为消除滞育对蝴蝶产业的不利影响。[方法]利用人工气候箱,对光周期与光脉冲对美凤蝶滞育蛹发育影响进行了研究。[结果]结果表明,20℃LD12:12时,滞育蛹第31天开始羽化,持续36 d,平均历期46.9 d;LD15:9时第37天开始羽化,持续22 d,平均历期47.7 d。25℃时,LD12:12开始羽化时间为第18天,持续23 d,平均历期25.9 d;LD15:9为第19 d,持续14 d,平均历期为26.4 d。在25℃时,断光后间隔2 h进行2 h光脉冲处理,羽化推迟4 d,在第19天开始羽化,平均历期延长1.2 d,为21.8 d;断光4 h后进行2 h光脉冲处理,羽化提早2 d,第15天开始羽化,平均历期缩短1.9 d,为18.8 d。[结论]光周期和光脉冲对滞育蛹发育均有一定影响,但影响不显著。

棉铃虫滞育蛹的抗寒力

通过观察棉铃虫滞育蛹在低温０℃和５℃下的死亡率，比较其不同发育时期的抗寒力差异。结果表明，滞育蛹在眼点移动前抗寒力较强。

影响美凤蝶滞育蛹发育的主要因素

[目的]对影响美凤蝶滞育蛹发育的主要因素进行研究。[方法]通过正交试验,研究在人工培养条件下培养温度、光周期与低温处理3个因素对美凤蝶滞育蛹发育的影响。[结果]结果显示,培养温度、光周期与低温处理3个因素对滞育蛹影响大小R2值分别为1 621.3、143.2和11.6。培养温度是影响自然发育至12月下旬美凤蝶滞育蛹发育的最主要因素;其次是光周期;低温处理对滞育蛹发育历期影响较小。[结论]培养温度、光周期和低温处理对美凤蝶滞育蛹发育不同阶段的影响存在差异。

两种寄主植物对烟夜蛾滞育蛹耐寒性影响

对烟叶和辣椒饲养的烟夜蛾滞育蛹过冷却点、结冰点和低温存活率进行了比较,以探究不同寄主对烟叶蛾滞育蛹耐寒性的影响。结果表明:2日龄时,2种寄主植物饲育下滞育蛹的过冷却点和结冰点差异不显著;5日龄和9日龄时2种寄主植物饲育的滞育蛹的过冷却点和结冰点,除5日龄的雄蛹的结冰点差异不显著外,其它均达显著水平;低温条件下,不同的处理时间滞育蛹存活率变化幅度较大,处理10d和20d,2种寄主植物饲育下滞育蛹存活率差异不显著;处理60d,无论何种寄主、土壤深度以及雌雄蛹,滞育蛹基本上全部死亡;处理30、40、50d,用烟叶饲育的滞育蛹存活率显著高于辣椒,且雌蛹的存活率略高于雄蛹;从耐寒性来考虑,烟叶是较为理想的寄主植物。

柞蚕滞育蛹的体液防卫反应

本文对柞蚕Ａｎｔｈｅｒａｅａｐｅｒｎｙｉ滞育蛹体液防卫的某些特性做了报道。结果表明：（１）经注射大肠杆菌诱导６ｈ后，体液中出现了抗菌活性物质。诱导７ｄ后，抗菌活力达到峰值，１５ｄ后活力消失。用生理盐水诱导的反应较快，４ｄ后达到峰值，１０ｄ后活力消失。（２）经大肠杆菌诱导后的体液对苏芸金杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌及金黄葡萄球菌均有杀菌效应。在最初５ｍｉｎ内杀菌效率较高。注射生理盐水诱导的体液较大肠杆菌诱导的杀菌效果低。（３）用昆虫病原菌苏芸金杆菌及非病原菌大肠杆菌作不同的诱导源，诱导１ｄ后的体液对大肠杆菌的抗菌活力差别不显著，但对柞蚕蛹的生活力及发育有明显影响；用苏芸金杆菌诱导的柞蚕滞育蛹３ｄ后死亡，用大肠杆菌诱导的蛹能正常羽化。（４）在一定范围内用不同剂量的大肠杆菌进行诱导，其抗菌活力不受影响，但超过一定限度，既使是非病原菌也可以突破昆虫的防卫功能。

柞蚕幼虫、嫩蛹及滞育蛹营养成分的比较研究

为进一步开发柞蚕的可利用价值,对柞蚕幼虫、嫩蛹(神仙蛹)及滞育蛹的营养成分进行了分析比较,结果表明:蛋白质和脂肪含量均以滞育蛹最高,分别为59.2g/100g和12.1g/100g;总糖和粗多糖含量则以嫩蛹最高,分别为3.0g/100g和5.4g/100g,其中,嫩蛹的粗多糖比柞蚕幼虫高58.8%,比滞育蛹高74.2%;氨基酸总量嫩蛹最高为44.94g/100g,而且其天门冬氨酸和谷氨酸含量也高于柞蚕幼虫和滞育蛹,分别占氨基酸总量的10.68%和12.84%。柞蚕嫩蛹是营养价值较高的昆虫食品,具有较高的开发利用价值。

黑纹粉蝶滞育蛹体内超氧化物歧化酶活力的初步研究

比较了滞育蛹与非滞育蛹体内超氧化物歧化酶（SOD）活力水平，表明滞育蛹体内SOD活力比同时期的非滞育蛹低；探讨了温度对滞育蛹SOD活力的影响，表明低温下的滞育蛹SOD活力明显比高温下的滞育蛹高，说明滞育蛹SOD活力水平与环境温度关系密切。

柑橘凤蝶非滞育蛹、滞育蛹与滞育蛹羽化成虫蛋白质含量比较

为了进一步了解柑橘凤蝶滞育机理,利用比色法,测定了非滞育蛹、滞育蛹和滞育蛹羽化成虫不同发育阶段蛋白质含量。结果表明,非滞育蛹蛋白质含量在138.735 0～176.775 7mg/g,在整个非滞育蛹期间呈上升趋势,蛋白质含量变化较大,差异明显。在整个越冬期间,蛋白质含量在147.975 0～196.997 3mg/g,呈现一定规律波动;12月下旬至翌年1月下旬,含量有较大幅度上升,上升达49.022 3mg/g,可能与气温下降抗冻蛋白产生有关。滞育解除后羽化成虫蛋白质含量为313.247mg/g,羽化成虫初期的高蛋白质含量可能与生殖系统的发育有关。蛋白质代谢在柑橘凤蝶不同发育过程中有着不同的代谢特征。

不同诱导源对柞蚕滞育蛹酯酶蛋白的诱导效应

用不同的诱导源如E .coliK12 D31、TritonX 10 0、脂多糖 (LPS)及其混合物诱导柞蚕滞育蛹 ,并以SDS PAGE和A4 50nm处蛋白吸收值作为测定指标 ,研究其血液上清液脂酶蛋白的变化。结果表明 ,在SDS PAGE凝胶上可观察到不同的诱导源诱导的新酯酶蛋白 ,同时也导致酯酶蛋白吸收值的不规则变化。单位体积的氨基酸浓度表明有些氨基酸在酯酶蛋白和抗菌肽蛋白的合成中起着重要的作用。亮氨酸是抗菌肽组成中最重要的组分 ,但是在柞蚕滞育蛹免疫血液中含量并不高。证明诱导产物不仅仅是具有杀菌作用的抗菌肽 。

人工饲料饲育烟夜蛾滞育蛹的耐寒性

为探究人工饲料对烟夜蛾滞育蛹耐寒性的影响,将人工饲料和烟叶分别饲养烟夜蛾幼虫,比较了烟夜蛾滞育蛹的过冷却点和结冰点、低温存活率、糖原及脂肪含量。结果表明,低温预处理条件下,2种饲料饲育的预蛹和3日龄蛹的过冷却点和结冰点无显著性差异,5日龄蛹差异达显著水平;两种饲料饲育的滞育蛹存活率无显著性差异;人工饲料饲养有助于预蛹期糖原的积累,而不利于预蛹期脂肪的贮备,3日龄和5日龄时,蛹体糖原和脂肪含量差异不显著。结论:试验所配人工饲料可以满足烟夜蛾滞育的需要,有助于提高滞育蛹的耐寒性,增强其对不良低温环境的适应能力。

不同品种家蚕滞育蛹抗菌活性物质的抗菌性能研究

对家蚕滞育蛹抗菌活性物质的性质进行研究,并对不同家蚕品种滞育蛹之间的抗菌肽的性能进行比较。结果表明:家蚕滞育蛹血淋巴抗菌活性物质具有较强的热稳定性和较好的耐酸性。诱导雄蛹产生的抗菌活性物质的抗菌活性要高于雌蛹,家蚕滞育蛹对柞蚕链球菌(1212)的抵御性较其他诱导源强,不同品种家蚕滞育蛹诱导后产生的抗菌活性物质的抑菌活性可能与其品种的特有属性有关。

大分舌蜂不同龄期幼虫及滞育预蛹肠道细菌群落多样性及其差异

【目的】基于昆虫肠道微生物在宿主健康与调控宿主生长发育中发挥着重要作用,本研究旨在对大分舌蜂Colleles gigas不同龄期幼虫及滞育预蛹肠道细菌群落多样性及其差异进行初步探究。【方法】利用野外采集的大分舌蜂1-5龄幼虫及滞育预蛹,提取肠道内容物细菌DNA进行16S rRNA的V3-V4基因片段PCR扩增,利用IlluminaMiseq二代高通量测序技术进行测序。依据获得的序列数据,利用生物信息学方法分析大分舌蜂幼虫和滞育预蛹肠道细菌的组成、丰度和多样性。【结果】大分舌蜂幼虫肠道细菌菌群共检测到15门,23纲,43目,80科,128属的细菌,其中最主要的门是变形菌门(Proteobacteria)(占93.74%),最主要的目是立克次氏体目(Rickettsiales)(占68.68%),最主要的科是无形体科(Anaplasmataceae)(占68.64%),最主要的属是沃尔巴克氏体属Wolbachia(占68.64%)。Beta多样性分析结果显示,细菌群落变化与幼虫发育有关,显示出低龄组(1-3龄幼虫)、高龄组(4-5龄幼虫)和滞育预蛹组3个水平。Alpha多样性分析显示,滞育预蛹组细菌多样性与高龄组和低龄组的存在显著差异,而高龄组与低龄组间差异不显著。线性判别分析结果显示,滞育预蛹组与低龄组都存在显著优势菌纲,分别是α-变形菌纲(Alphaproteobacteria)和γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria),而高龄组不存在显著优势纲。在目水平,肠杆菌目(Enterobacteriales)和假单胞菌目(Pseudomonadales)为低龄组优势目,立克次氏体目(Rickettsiales)为滞育预蛹组的优势目。在科水平,肠杆菌科(Enterobacteriaceae)和莫拉氏菌科(Moraxellaceae)为低龄组的优势科,无形体科(Anaplasmataceae)为滞育预蛹组的优势科。在属水平,低龄组优势属为肠杆菌属Enterobacter和不动杆菌属Acinetobacter,滞育预蛹组优势属为沃尔巴克氏体属Wolbachia。功能基因注释结果也显示出这3个组的特点。【结论】大分舌蜂不同龄期幼虫及滞育预蛹肠道细菌群落存在显著差异,从低龄组向高龄组再到滞育预蛹组,细菌多样性逐步降低,这可能与其进食特点以及肠道微生物驱动对肠道环境适应有关。本研究为土壤筑巢独栖野生蜜蜂肠道微生物研究奠定基础,也为此类野生蜜蜂的保护提供新的角度与方向。

不同品种柞蚕滞育蛹营养成分检测及差异分析

基于筛选柞蚕高营养价值新品种育种素材的目的,对辽宁地区生产实用的9906、抗大、821、早418和辽蚕582共5个品种柞蚕滞育蛹营养成分进行检测及差异分析。结果表明:抗大的血淋巴蛋白质含量为0.70 mg/mL,干蛹粉蛋白质含量为588.33 mg/g,血淋巴海藻糖含量为10.46 mg/mL,总氨基酸含量为17.99 mg/mL,其干蛹粉粗脂肪含量仅为17.64%;辽蚕582的干蛹粉糖原含量为201.98 mg/g,必需氨基酸含量为5.21 mg/mL。综合分析认为,抗大和辽蚕582滞育蛹的营养价值较为全面丰富。