黄蜀葵花总黄酮介导AKT1信号通路拮抗HepG-2细胞脂质沉积研究

目的:探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对棕榈酸(PA)诱导HepG-2细胞脂质沉积模型的干预效应及机制。方法:体外培养人肝源HepG-2细胞,应用PA处理以构建细胞脂质沉积模型,然后从黄蜀葵花中提取TFA,以TFA或蛋白激酶B(AKT)抑制剂作为干预剂,对PA诱导的细胞脂质沉积模型进行预处理,应用油红O染色、酶联免疫吸附实验和免疫印迹实验(Western blotting)检测细胞脂质代谢、AKT1和脂联素(APN)信号通路蛋白表达水平。结果:与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预后,细胞脂质沉积程度(%)、游离脂肪酸(FFAs)和甘油三酯(TG)水平降低,而APN水平升高(P<0.05)。Western blotting实验显示PA模型组AKT1和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)表达水平上调而APN和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)水平下调(P<0.05)。与PA模型组比较,TFA或AKT抑制剂干预显示AKT1下调而APN水平上调,其下游信号GSK3β表达上调而SREBP-1表达下调(P<0.05)。结论:TFA拮抗PA诱导的HepG-2细胞脂质沉积可能与其介导AKT1抑制及APN信号通路激活有关。

黄蜀葵花总黄酮保护离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的研究

目的 观察黄蜀葵花总黄酮 (totalflavoneofAbel moschlManihotLmedic ,TFA)对离体大鼠缺血再灌注心肌的保护作用。方法 采用Langendorff创建的离体心脏灌流法建立的离体大鼠心肌缺血缺氧再灌模型 ,观察TFA对心肌组织匀浆中脂质过氧化物质、酶学指标等的影响。结果 经研究发现 :TFA( 10 0、5 0、2 5mg·L-1)可明显增加缺血再灌后离体大鼠心肌组织匀浆中的SOD活性 ,降低MDA生成量 ,减少心肌细胞内CPK、LDH的漏出 ,并使NO含量及NOS活性得到提高。结论 TFA对离体大鼠缺血再灌损伤的心肌具有保护作用 ,此作用可能与抑制心肌脂质过氧化。

黄蜀葵花总黄酮抗炎解热作用

目的 研究黄蜀葵花总黄酮 (TFA)的抗炎、解热作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳片肿胀的急性炎症模型和皮下埋植棉球致肉芽组织形成的慢性非特异性炎症模型观察TFA的抗炎作用 ;采用sc松节油或iv大肠杆菌液两种诱发家兔发热的模型观察TFA的解热作用。结果 TFA(2 0 0、1 0 0、50mg/kg)均能有效减轻小鼠右耳肿胀程度 ,TFA50mg/kg可明显抑制大鼠新生肉芽组织形成 ;由sc松节油或iv大肠杆菌液诱发的家兔体温升高 ,TFA可产生不同程度地降低作用。结论 TFA具有良好的抗炎。

黄蜀葵花总黄酮镇痛作用研究

目的 :研究黄蜀葵花总黄酮 (TotalFlavoneofAbelmoschlmanihotLmedic ,TFA)的镇痛作用及有无成瘾性。方法 :采用冰醋酸致小鼠扭体模型 (AA)、福尔马林模型 (For)及KCl诱痛模型来观察TFA的镇痛作用 ;采用连续给药方式观其作用有无成瘾性。结果 :TFA(ig或ip)可不同程度地抑制小鼠扭体反应 ;TFA( 14 0、2 80mg/kg ,ig)可使福尔马林致小鼠疼痛的Ⅰ、Ⅱ相反应明显减轻 ,TFA(ip1)对同侧ip1福尔马林导致的疼痛可产生同样抑制作用 ,但对侧ip1福尔马林致小鼠疼痛无明显影响 ;动脉注射TFA2 0 0mg/kg可明显减轻KCl诱发的家兔疼痛反应。连续用药可使TFA在小鼠跳跃实验中 ,阳性率为 0。 结论 :以上研究结果表明TFA具有一定的镇痛作用且局部给药有效 ,连续用药无成瘾性。

黄蜀葵花总黄酮药理性预适应对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的采用心肌缺血预适应实验模型,观察黄蜀葵花总黄酮(total flavone of Abelmoschl manihot,TFA)对家免心肌缺血再灌注损伤是否具有预适应样保护作用。方法采用持续静脉推注TFA模拟预适应的实验方法,观察家免冠状动脉左旋支经结扎、再灌后,其心律失常发生率、心肌组织中LD含量和LDH活力的变化,以及心肌组织中P53,bcl-2表达的情况。结果TFA (16,8,4mg·kg-1)可不同程度降低心律失常的发生率、抑制心肌组织中LD的生成和LDH的漏出、上调bcl-2 mRNA的表达强度,同时下调P53 mRNA的表达水平。结论TFA药理性预适应对家免心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。此作用可能与改善心肌能量代谢、抑制心肌细胞凋亡密切相关。

黄蜀葵花总黄酮对小鼠急性心肌缺血缺氧损伤的保护作用

目的 :研究黄蜀葵花总黄酮 (TFA)对小鼠急性心肌缺血、缺氧损伤的保护作用。方法 :采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素(Iso)建立小鼠急性心肌缺血模型 ,观察TFA对小鼠ECGⅡ导联异常ST段、T波以及心肌含水量 (MWC)、心肌指数 (MI)的影响 ;采用气管挟闭建立小鼠心肌缺氧模型 ,观察TFA对小鼠心脏耐缺氧能力的影响。结果 :TFA可显著改善Iso诱发小鼠ECGⅡ导联异常的ST段和T波 ,抑制MWC及MI的升高 ,明显延长气管挟闭后小鼠心电持续的时间。结论 :TFA对小鼠急性心肌缺血、缺氧损伤具有保护作用。

黄蜀葵花总黄酮药理活性的研究进展

黄蜀葵花为锦葵科植物黄蜀葵的干燥花冠,含黄酮类、还原糖类、鞣质类及长链烃类等化合物,其中,黄酮类化合物为主要活性成分。现从改善肾功能、抗炎、解热镇痛、保护心脑缺血损伤、促进血管新生、降血糖和抗感染等方面综述黄蜀葵花总黄酮的药理活性研究进展。

黄蜀葵花总黄酮对大鼠湿热型慢性肾炎的作用及其对红细胞免疫黏附功能的影响

目的观察黄蜀葵花总黄酮(total flavones of Abelmoschus manihot (L) Medic,TFA)对湿热型慢性肾炎的作用及其对红细胞免疫黏附功能的影响。方法采用葡萄球菌肠毒素B分次由尾静脉注射、牛血清清蛋白隔日灌胃及完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂分次皮下注射复制大鼠慢性肾炎湿热证模型。8周后模型复制成功,将大鼠分为模型组,泼尼松组,黄葵胶囊组,TFA高(694.4 mg/kg)、中(347.2 mg/kg)、低(173.6 mg/kg)剂量组,各组分别每日灌胃给药。连续给药4周后采用考马斯亮蓝法测定尿蛋白(urine pro-tein,UP),双缩脲法测定血清总蛋白(total protein,TP),溴甲酚绿法测定白蛋白(albumin,Alb)、苦味酸法测定血肌酐(creatinine,Cr),二乙酰一肟法测血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);聚乙二醇(polyethy-lene glycol,PEG)沉淀法测定血清循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC);酵母菌花环法测定红细胞免疫复合物(red blood cell-immune complex,RBC-IC)、红细胞补体C3b(red blood cell-complementC3b,RBC-C3b)花环率。结果 TFA各剂量组UP、Cr、CIC、RBC-IC显著降低,Alb、RBC-C3b显著升高;系膜细胞增殖和基质增生被显著抑制;TFA中剂量组BUN显著降低。与黄葵胶囊组比较,TFA高、中剂量组血Cr显著降低,其余各项指标均无显著性变化。结论 TFA能够提高湿热型慢性肾炎大鼠的红细胞免疫黏附功能、抑制系膜细胞增殖和基质增生,改善肾功能;TFA为黄葵胶囊的有效组分。

黄蜀葵花总黄酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察黄蜀葵花总黄酮对大鼠单侧输尿管梗阻模型肾纤维化的保护作用及机制。方法:将24只SD雄性大鼠随机分为假手术(SO)组、单侧输尿管梗阻(UUO)组、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦组(IRB组)和黄蜀葵花总黄酮组(TFA组),每组6只。SO组和UUO组每日予5ml生理盐水,IRB组按厄贝沙坦10mg·kg-1.d-1给药,TFA组为1g.kg-1.d-1给药。术后21d处死大鼠,收集血清检测尿素氮(BUN)和肌酐(Scr),取肾组织行HE和Masson染色,计算肾间质纤维化的相对面积。免疫组化技术检测骨桥蛋白(Osteopontin)和结缔组织生长因子(CTGF)在肾组织中的表达。Westernblot检测肾组织中Smad7和Smad核转录共抑制因子SnoN蛋白表达水平,观察TFA对TGF-β/Smad信号转导通路的影响。结果:UUO组和两治疗组大鼠血清BUN、Scr上升,与SO组差异有统计学意义;光镜下SO组肾小球、肾小管基本正常,UUO组肾间质较多炎细胞浸润,细胞外基质成分增多。与SO相比,UUO组大鼠肾小管上皮大量表达OPN和CTGF,较SO组显著增强(P<0.01),Smad7、SnoN蛋白表达水平显著下降(P<0.01);TFA组和IRB组OPN和CTGF表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);Smad7、SnoN蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。TFA组和IRB组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TFA有显著抗肾间质纤维化的作用,其机制与降低肾组织OPN和CTGF,同时恢复Smad逆向调控因子Smad7和SnoN蛋白表达有关。

黄蜀葵花总黄酮对人脐静脉血管内皮细胞形成新生血管的影响

目的观察黄蜀葵花总黄酮（TFA）对人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）形成新生血管的影响。方法以体外培养HUVEC为模型,MTT法检测不同浓度TFA对细胞增殖的影响;Transwell小室细胞进行迁移实验检测药物对细胞迁移能力的影响;管形形成实验观察药物对细胞分化的影响。结果5.0~20.0 mg/L TFA作用72 h,不仅对HUVEC增殖有明显促进作用;而且能促进HUVEC迁移;10.0~20.0 mg/L TFA能够促进HUVEC管样结构形成。结论一定浓度的TFA具有明显促进HUVEC形成新生血管的作用。

黄蜀葵花总黄酮中金丝桃苷的平衡溶解度和表观油水分配系数测定

目的:测定黄蜀葵花总黄酮中金丝桃苷的平衡溶解度和表观油水分配系数。方法:采用HPLC法测定金丝桃苷在水、不同有机溶剂和不同pH缓冲液中的平衡溶解度,用摇瓶法测定金丝桃苷在正辛醇-水/缓冲液中的表观油水分配系数。结果:37℃下金丝桃苷在水中的平衡溶解度为231.58 mg·L^(-1),表观油水分配系数为0.907(log Papp=-0.04);常用有机溶剂甲醇对金丝桃苷的溶解性较好,为6 579.21 mg·L^(-1);在不同pH缓冲溶液中,溶解度随着pH的升高逐渐升高,油水分配系数随着pH的升高逐渐降低。结论:金丝桃苷的水溶性差,pH对其溶解度和表观油水分配系数均有较大影响。

黄蜀葵花总黄酮对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的:观察黄蜀葵花总黄酮(TFA)对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管新生的影响。方法:应用鸡胚绒毛尿囊膜模型,明胶海绵为载体,观察不同浓度TFA对CAM血管新生的影响。结果:血管以载体为中心向四周呈放射状生长,与生理盐水对照组比较,5-20μg/mlTFA组血管网明显增多、增粗,血管计数显示血管数显著增多。结论:TFA能促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成,提示其在体内有促血管新生作用。

黄蜀葵花总黄酮研究进展

黄蜀葵花为锦葵科秋葵属植物黄蜀葵Abelmoschus manihot(L.)Medic.的干燥花,民间应用历史悠久。近年来研究表明黄蜀葵花总黄酮具有广泛的药理活性,文章对黄蜀葵花总黄酮的化学成分、含量测定方法及药理作用的研究现状作一综述,为今后的研究和发展提供方向。

黄蜀葵花总黄酮对实验性高血糖大鼠的作用及机制初探

目的:研究黄蜀葵花总黄酮(total flavone of abelmoschl manihot,TFA)对高血糖大鼠的作用。方法:在正常大鼠和四氧嘧啶诱导2型实验性高血糖模型大鼠上,分别灌胃给药TFA 30、60和120 mg/kg,14 d后测定体质量、空腹血糖、糖耐量及血浆丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)。结果:TFA 30、60、120 mg/kg对正常大鼠空腹血糖有降低趋势,但未达统计学显著性意义;TFA 60和120mg/kg对四氧嘧啶诱导的大鼠空腹血糖水平和血浆MDA含量的升高、糖耐量减低及血浆SOD活性降低均有明显的抑制作用,120 mg/kg TFA还可显著地抑制大鼠体质量的减轻。结论:TFA对四氧嘧啶诱导的2型高血糖模型大鼠有一定的治疗作用,其机制可能与抗氧自由基过氧化有关。

高效液相色谱法测定黄蜀葵花总黄酮胶囊中的金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷

建立高效液相色谱法测定黄蜀葵花总黄酮中金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷的含量。以乙腈-0.5%磷酸水溶液(22∶78)为流动相,流量为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为360nm。金丝桃苷和槲皮素-3’-葡萄糖苷的质量浓度分别在12.232~73.392μg/mL,11.044~66.264μg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数均为0.9999,检出限分别为200,180ng/g。样品加标回收率分别为99.73%,100.78%,测定结果的相对标准偏差分别为0.86%,1.48%(n=6)。该方法操作简单、快速,结果准确,重现性好,可为黄蜀葵花总黄酮胶囊的质量控制提供依据。

黄蜀葵花总黄酮对海马神经元缺氧复氧损伤的保护作用

目的:研究黄蜀葵花总黄酮(total flavones of abelmoschl manihot,TFA)对海马神经元缺氧复氧损伤的保护作用以及可能的内皮衍生超级化因子(endothelium-dependent hyperpolarizing factor,EDHF)相关机制。方法:采用原代培养的海马神经元建立缺氧4 h/复氧24 h损伤模型,预先在细胞培养上清内加入大鼠脑基底环动脉(basilar artery,BA)环,分别给予乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)联合一氧化氮(nitric oxide,NO)合酶抑制剂Nω-nitro-L-arginine-methyl-ester(L-NAME)和前列环素(prostacyclin,PGI2)抑制剂indomethacin(Indo);TFA联合L-NAME和Indo预处理。检测缺氧/复氧损伤后海马神经元存活率、培养上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力的变化;另外,用激光共聚焦法检测细胞内游离Ca^(2+)浓度。结果:与单独应用Ach或者TFA预处理比较,Ach或者TFA联合脑基底动脉环均能明显改善缺氧/复氧后海马神经元存活率的降低,培养上清中LDH活力降低。此外,TFA联合脑基底动脉环抑制海马神经元细胞内游离Ca^(2+)的增高,L-NAME及Indo对此结果并无显著影响。结论:TFA对缺氧/复氧致海马神经元损伤有明显的保护作用,其机制可能与促进EDHF释放,抑制细胞内Ca^(2+)超载有关。

黄蜀葵花总黄酮固体分散体溶出度测定方法的建立

目的:建立黄蜀葵花总黄酮固体分散体中金丝桃苷的溶出度测定方法。方法:采用HPLC法,建立金丝桃苷的含量测定方法;以金丝桃苷的溶出度为指标,采用单因素试验法,考察溶出方式、溶出介质及转速对金丝桃苷溶出的影响。结果:金丝桃苷在1.140 6~72.998μg·mL^(-1)范围内,与峰面积的积分值呈现良好的线性关系(r=1.000 0),平均加样回收率98.98%,RSD1.82%(n=9);黄蜀葵花总黄酮固体分散体溶出条件为采用浆法,以0.1 mol·L^(-1)盐酸溶液为溶出介质,转速为75 r·min^(-1),取样时间为40 min。结论:所建方法简便、准确、结果可靠,可用于黄蜀葵花总黄酮固体分散体溶出度测定。

黄蜀葵花总黄酮对缺血性损伤保护作用的实验研究进展

黄蜀葵花总黄酮是中药黄蜀葵花的主要有效成分,实验研究显示其对缺血性疾病有较好的药理作用,对心脑缺血性损伤有明确的保护作用,其机制主要与抗脂质过氧化、减少自由基生成、抑制细胞凋亡相关。

紫外分光光度法测定黄蜀葵花总黄酮片中总黄酮的含量

目的:建立紫外分光光度法测定黄蜀葵花总黄酮片中总黄酮的含量。方法:样品加AlCl3溶液显色后,以金丝桃苷为对照品,在405nm处测定其吸光度。结果:线性回归方程为:Y=0.0137X-0.0184,相关系数r=0.9994,黄蜀葵花总黄酮在8.2032～41.0160μg·ml-1范围内具有良好的线性关系。平均回收率为97.24%,RSD为1.23%。结论:该方法准确可靠,稳定性、重现性好,适用于黄蜀葵花总黄酮片的含量测定。

高效液相色谱法测定黄蜀葵花总黄酮固体分散体中金丝桃苷含量

目的建立测定黄蜀葵花总黄酮固体分散体中金丝桃苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Hedera C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为360 nm,柱温为30℃。结果金丝桃苷的质量浓度在1.140 6~72.998μg/m L范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=1.000 0),平均加样回收率为99.01%,RSD为1.94%(n=9)。结论该方法简便易行,结果准确,重复性好,可用于测定黄蜀葵花总黄酮固体分散体中金丝桃苷的含量。