响应面分析法优化蜂胶黄酮脂质体制备工艺

目的:优选蜂胶黄酮脂质体制备的的最佳条件。方法:采用乙醇注入法制备蜂胶黄酮脂质体,在单因素试验基础上,以脂药比、膜材比、注入速度为影响因素,包封率为响应值,利用Box-Behnken试验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,对蜂胶黄酮脂质体制备工艺进行优化。结果:蜂胶黄酮脂质体的最佳制备条件为脂药比9.6:1、膜材比8.5:1、注入速度0.8mL/min。结论:采用最佳条件制备的蜂胶黄酮脂质体包封率较高,验证实验测得蜂胶黄酮脂质体的包封率为91.67%,与模型预测值相对误差为0.086%,重现性好。

蜂胶黄酮增强免疫作用的研究

以蜂胶黄酮(PF)为免疫增强剂,探讨其对免疫雏鸡血清抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖以及对培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明:PF能显著提高雏鸡的血清抗体效价,促进外周血淋巴细胞增殖,且有一定的量效和时效关系;在体外,也能促进鸡脾脏T淋巴细胞增殖,以低浓度的效果较好。证明PF具有较强的增强免疫活性,是蜂胶中增强免疫作用的有效成分。

蜂胶黄酮类提取物对去卵巢大鼠骨代谢的影响

目的探讨蜂胶黄酮类提取物对去卵巢引起骨质疏松大鼠骨代谢的影响。方法将雌性SD大鼠21只随机分为3组,每组7只。对照组实施假手术,模型组和蜂胶组均切除双侧卵巢。对照组、模型组灌胃均给蒸馏水5ml·kg-1·d-1,蜂胶组灌胃给蜂胶提取物100mg·kg-1·d-1。10周后,称量体重、测定骨密度(BMD)、骨矿物含量(BMC)、血清碱性磷酸酶(ALP)、尿钙及尿羟脯氨酸(HOP)含量。结果与对照组相比,模型组骨BMD和BMC下降(P<0.05),血清ALP增加(P<0.01),尿钙、尿HOP增加(P<0.05);与模型组比,蜂胶组BMD和BMC均显著升高(P<0.05),血清ALP、尿钙减少(P<0.05),尿HOP减少(P<0.01);蜂胶组与对照组相比,以上各项指标均无显著性差异(P>0.05)。结论蜂胶黄酮类提取物可增加骨密度,减少去卵巢大鼠骨钙丢失,预防骨质疏松。

蜂胶黄酮萃取物脂质体制备工艺的优化及体外缓释特性

本研究运用均匀设计方法,以脂质体黄酮包封率、平均粒径、冷藏稳定性为指标,对蜂胶黄酮萃取物脂质体制备工艺进行了初步优化,结合体外释放特性评价最终确定制备工艺条件为:蜂胶黄酮萃取物100mg、蛋黄卵磷脂500mg、胆固醇80mg、旋转蒸发温度45℃、0.01mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液用量25ml、超声作用时间25min。在此最佳条件下制得脂质体的黄酮包封率为86.6%,平均粒径为104.78nm,4℃冷藏一个月的稳定率为77.0%。

蜂胶黄酮对宿主细胞抗病毒能力的影响

本试验旨在研究蜂胶黄酮对宿主细胞抗病毒能力的影响。首先采用MTT法测定蜂胶黄酮对宿主鸡胚成纤维细胞(CEF)和PK-15细胞的安全浓度;然后将蜂胶黄酮从最大安全浓度250μg/mL开始倍比稀释至15.6μg/mL共5个浓度,将蜂胶黄酮分别与新城疫病毒(NDV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)及猪细小病毒(PPV)一起加到相应长成单层的宿主细胞CEF或PK-15中,在感染后24、48和72h分别用MTT法测定宿主细胞的存活率,代表蜂胶黄酮提高宿主细胞抗病毒能力的指标。结果显示,蜂胶黄酮可显著提高宿主细胞抗病毒能力,这种活性与其剂量正相关,即剂量越大作用越好。蜂胶黄酮提高宿主细胞抗有囊膜病毒NDV和TGEV作用主要体现在病毒感染的前期,而提高宿主细胞抗无囊膜病毒IBDV和PPV作用主要体现在病毒感染的后期。提示蜂胶黄酮可用于NDV和TGEV的预防及IBDV和PPV的治疗。

补充蜂胶黄酮对过度训练小鼠心肌能量代谢酶的影响

探讨补充蜂胶黄酮对过度训练小鼠心肌能量代谢酶的影响,为延缓或消除运动性疲劳探索新的途径。方法:雄性KM小鼠40只,被随机分为灌喂水安静(A)组、灌喂蜂胶黄酮安静(B)组、灌喂水训练(C)组和灌喂蜂胶黄酮训练(D)组,训练组采用递增强度游泳训练。小鼠在适应性喂养1周及运动训练4周后,进行实验指标的测试。结果:高强度训练使小鼠心肌组织严重受损,而补充蜂胶黄酮可以不同程度地增强心肌组织抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-Px)、能量代谢酶(CK、LDH、SDH)及ATP酶的活性(P<0.05),且可以降低心肌组织MDA的含量(P<0.05)。结论:蜂胶黄酮可以改善机体能量代谢,延缓疲劳出现,对小鼠心肌组织具有保护作用。

蜂胶黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨蜂胶黄酮对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 SD大鼠分为假手术组、模型组及蜂胶黄酮高、中、低三个剂量组,大脑中动脉栓塞(MCAO)制作模型,检测各组大鼠脑组织含水量和脑梗死体积,脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果与模型组比较,蜂胶黄酮三个剂量组脑含水量明显降低(P<0.01),脑梗死体积明显缩小(P<0.01),SOD、CAT活性明显升高(P<0.01),MDA的含量明显降低(P<0.01)。结论蜂胶黄酮具有抗自由基损伤和保护缺血脑组织的作用。

蜂胶黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后IL-1β、IL-6和TNF-α含量的影响

目的探讨蜂胶黄酮对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),研究蜂胶黄酮对脑缺血再灌注脑梗死体积和行为学评分的影响,对脑组织内IL-1β、IL-6和TNF-α含量的影响。结果蜂胶黄酮能够减少MCAO脑梗死体积和行为学评分,降低脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的含量(P<0.05)。结论蜂胶黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制与降低脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量有关。

蜂胶黄酮对衰老模型小鼠脑组织抗氧化作用的影响

目的研究蜂胶黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠神经细胞抗氧化作用。方法以D-半乳糖侧腹部注射小鼠,同时连续灌服蜂胶黄酮25d,分别检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)以及过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果蜂胶黄酮可使衰老模型小鼠脑组织中SOD、CAT活性明显增高,和衰老模型组相比具有显著差异(P<0.01);使脑组织MDA明显降低,和衰老模型组相比具有显著差异(P<0.01)。结论蜂胶黄酮可有效地提高脑组织中抗氧化酶的活性,有效地增强小鼠机体抗氧化能力。

蜂胶黄酮对小鼠脑SOD、GSH-Px、MDA的影响

目的：研究蜂胶黄酮对小鼠脑组织的抗氧化系统的作用,以期探讨蜂胶黄酮的抗衰老作用机制。方法：以小鼠为实验对象,以其脑SOD、CSH-Px、MDA为指标,考察蜂胶黄嗣的抗衰老作用。结果：蜂胶乙醇提取物(EEP)可使脑组织中SOD、GSH- Px活性明显增高,和空白组相比具有显著差异(P＜0．01)；使脑组织MDA明显降低,和空白组相比具有显著差异(P＜0．01)。结论：EEP可有效地提高脑组织中抗氧化酶的活性,降低脑MDA的含量,抑制和／或减轻脂质过氧化反应,从而防止了自由基过氧化对脑组织的损伤,可能是有效的脑组织保护剂。

蜂胶黄酮对D-半乳糖致老年痴呆小鼠抗氧化能力的影响

目的探讨蜂胶黄酮(EEP)对D-半乳糖致老年性痴呆(AD)小鼠脑指数、脑组织单胺氧化酶B(MAO-B)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。方法 60只健康昆明小鼠随机分成6组,分别为正常组、模型组、阳性对照组及高中低3个剂量蜂胶黄酮治疗组。正常组常规喂养,其余组皮下注射D-半乳糖100 mg.kg-1.d-1,共7 w,阳性对照组造模同时灌胃50 mg.kg-1.d-1茴拉西坦胶囊;治疗组3个剂量(300、150、75 mg.kg-1.d-1)每天灌胃蜂胶黄酮;模型组灌胃等体积的生理盐水。第50天处死小鼠取脑,测其脑指数及脑组织MAO-B,SOD,GSH-Px含量的变化。结果 实验组的脑指数显著高于模型组(P<0.05),SOD,GSH-Px活性显著高于模型组(P<0.01),MAO-B含量显著低于模型组(P<0.01),与正常对照组比较,各指标相近。结论蜂胶黄酮能提高脑指数,增强抗氧化能力,抑制MAO-B活性,从而保护脑细胞,抵抗痴呆。

蜂胶黄酮对D-半乳糖致衰小鼠学习记忆及脑组织NO含量、NOS和AchE活性的影响

目的探讨蜂胶黄酮对D-半乳糖所致急性衰老小鼠学习记忆障碍保护作用及其脑组织中NO含量、NOS和AchE活性的变化。方法皮下注射D-半乳糖100mg/kg共30d,制造衰老模型小鼠。实验组灌胃蜂胶黄酮300mg/kg30d后,用跳台法测定小鼠学习记忆能力,同时测定小鼠脑内NO含量、NOS和AchE活性。结果D-半乳糖所致急性衰老小鼠记忆能力明显降低,表现为跳台实验的错误次数明显增加(P<0.05),以及脑组织中NO含量、NOS及AchE活性的增加(均P<0.01)。蜂胶黄酮组能够减少小鼠电击次数(错误次数),24h重复实验,可延长跳下平台的潜伏期,错误次数明显减少(均P<0.05);同时降低了脑内NO含量、NOS及AchE活性(均P<0.01)。结论蜂胶黄酮对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆障碍具有保护作用,能增强学习记忆能力,其机制可能与降低脑内NO含量及NOS、AchE活性有关。

蜂胶黄酮对黄羽肉种鸡生产性能的影响

为研究蜂胶黄酮对黄羽肉种鸡生产性能的影响,本研究选取2430只34周龄新广K96黄羽肉种鸡,随机分成3组,每组6个重复,每个重复135只,各重复间生产性能差异不显著。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别在基础日粮的基础上添加300g/t和500g/t蜂胶黄酮预混剂,正试期为6周。结果表明:与对照组相比,日粮添加不同水平的蜂胶黄酮对黄羽肉种鸡的平均日采食量、产蛋率、平均蛋重、料蛋比和死亡率的影响均差异不显著(P>0.05),但试验Ⅰ组在平均日采食量和平均蛋重上表现较好,而试验Ⅱ组的死亡率最低;试验第21天种蛋入孵,各组间受精率和入孵蛋出雏率差异不显著(P>0.05),但添加蜂胶黄酮有提高受精率和入孵蛋出雏率的趋势;第42天种蛋入孵,试验Ⅰ组的受精率极显著高于对照组(P<0.01)。以上结果提示,无论是添加300g/t还是500g/t蜂胶黄酮对黄羽肉种鸡的采食量、产蛋率、蛋重和料蛋比影响较小,但对种鸡死亡率、种蛋受精率和孵化率有比较明显的正面效果。

蜂胶黄酮作为PPV灭活疫苗佐剂活性的研究

为研究蜂胶黄酮不同使用方法对豚鼠体液免疫和细胞免疫的影响,选取99只豚鼠用于试验研究,其中24只用于检验PPV疫苗的安全性,其余75只随机分成5组,分别为蜂胶黄酮佐剂PPV疫苗处理组(PFA)、油佐剂(OA) PPV疫苗+口服蜂胶黄酮处理组(OA-PFApo)、油佐剂(OA) PPV疫苗+肌注蜂胶黄酮处理组(OA-PFAim)、油佐剂PPV疫苗处理组(OA)和生理盐水对照组(CK)。结果表明:与油佐剂PPV疫苗组相比,蜂胶黄酮可以提高豚鼠细胞免疫和早期体液免疫; OA-PFAim组豚鼠体液免疫和细胞免疫均显著增强,而OA-PFApo组豚鼠早期体液免疫效果显著增强。综上,蜂胶黄酮可以直接作为一种PPV疫苗佐剂使用。

蜂胶黄酮对小鼠缺血再灌注后心肌线粒体损伤的保护作用

目的:探讨蜂胶黄酮对小鼠力竭游泳后心肌线粒体缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将70只小鼠随机分为安静组(A组)、力竭对照组(B组)和力竭给药组(C组)。A、B组常规喂养,C组灌喂蜂胶黄酮液。B、C组进行4周递增负荷游泳训练,并于最后一次训练至力竭,测定其安静时、力竭后即刻、6小时和24小时心肌线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总-抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、Ca2+、磷脂酶A2(PLA2)等指标。结果:缺血再灌注后B组小鼠心肌线粒体中抗氧化物质(SOD、GSH-Px、T-AOC)活性显著下降,MDA含量、PLA2活性显著升高,心肌钙离子明显超载,尤以力竭运动后6h最为显著;而补充蜂胶黄酮的C组与B组相比,抗氧化物质活性显著提高,自由基MDA含量、PLA2活性显著下降,钙离子明显减少。结论:蜂胶黄酮对缺血再灌注损伤的心肌线粒体有积极的保护作用。

蜂胶黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠脑蛋白质、核酸代谢的影响

目的探讨蜂胶黄酮对衰老模型小鼠学习记忆行为的影响及其作用机制。方法采用同位素标记物体内掺入法观察蜂胶黄酮各组小鼠脑蛋白质及核酸代谢的变化。结果蜂胶黄酮增加小鼠脑组织蛋白质、DNA和RNA含量。结论蜂胶黄酮能明显增强小鼠学习记忆功能,其作用机制与其促进的蛋白质、核酸等生物大分子形成密切相关。

蜂胶黄酮对大鼠颅骨成骨细胞增殖分化及BMP2表达的影响

目的探讨蜂胶黄酮对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖分化以及骨形态发生蛋白2(BMP2)表达的影响。方法提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型,用不同浓度的蜂胶黄酮刺激分离培养的大鼠成骨细胞,然后用噻唑蓝(MTT)法测定蜂胶黄酮对体外培养成骨细胞的增殖作用,用氨基安替吡啉测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,并通过免疫组织化学方法观察成骨细胞BMP2的表达。结果添加蜂胶黄酮体外培养24h后,100μg/L剂量组较对照组有明显的提高;48h后,5、10和100μg/L剂量组与对照组比,增殖率均显著提高;添加蜂胶黄酮的中剂量组和高剂量组的BMP2表达在24h和48h都显著高于零剂量组。培养72h后,10、50和100μg/L剂量组与对照组比,增殖率均有明显的提高;50μg/L和100μg/L剂量组与对照组相比ALP活性均显著性提高。结论蜂胶黄酮可以增加成骨细胞的增殖和分化,促进骨组织的形成,可用来预防骨质疏松症。