蜈蚣多糖对Hela细胞的增殖抑制作用研究

目的研究蜈蚣多糖对人宫颈癌细胞Hela细胞的抑制作用及作用机制。方法用MTT法检测蜈蚣多糖对Hela细胞生长的抑制作用;流式细胞仪和AnnexinV-FITC/PI双荧光染色分别检测蜈蚣多糖对Hela细胞周期及凋亡情况的影响。结果在一定浓度范围内蜈蚣多糖可显著抑制Hela细胞的增殖,改变Hela细胞的细胞周期,使细胞阻滞于G2/M期,并能诱导细胞凋亡。结论蜈蚣多糖可能通过改变Hela细胞的细胞周期,诱导细胞凋亡,从而对Hela细胞的增殖有一定的抑制作用。

蜈蚣藻多糖与卡拉胶复合涂膜保鲜剂对杨梅常温贮藏的影响

以蜈蚣藻多糖和蜈蚣藻多糖与卡拉胶复配胶为涂膜基质,以CaCl2和甘油为成膜助剂,配制成复合涂膜保鲜剂,研究常温(28～32℃)、相对湿度68%～86%条件下该复合涂膜保鲜剂对杨梅品质及其生理生化变化的影响。结果表明:常温下经蜈蚣藻多糖和蜈蚣藻多糖与卡拉胶复合涂膜保鲜剂涂膜保鲜的杨梅与对照组相比,果实裂果率、霉烂率、失重率明显降低,抑制了果实的呼吸率;有机酸、VC等营养成分转化、流失的速度减慢,有效抑制了MDA、花青素含量和相对电导率的升高,使PPO、POD、PAL酶活性处于较低的水平,延缓果实的衰老过程。其中,蜈蚣藻多糖涂膜保鲜剂的效果优于蜈蚣藻多糖与卡拉胶复合涂膜保鲜剂。

蜈蚣藻多糖对人神经胶质瘤U87细胞及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:研究蜈蚣藻多糖对人神经胶质瘤U87细胞及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:体外培养U87细胞,MTT法观察蜈蚣藻多糖其生长抑制作用。构建人神经胶质瘤U87细胞裸鼠移植瘤模型,将裸鼠随机分成5组,蜈蚣藻多糖3个剂量隔天尾静脉注射,观察相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率、抑瘤率,以此评价蜈蚣藻多糖的抗肿瘤作用。结果:蜈蚣藻多糖能够抑制人神经胶质瘤U87细胞的生长;对移植了U87细胞的裸鼠尾静脉注射蜈蚣藻多糖1、5 mg/kg和25 mg/kg,28 d后其抑瘤率分别为27.02%、39.93%、58.11%。结论:蜈蚣藻多糖具有体内外抗肿瘤活性。

蜈蚣藻多糖降血糖及降血脂活性的研究

本文通过建立四氧嘧啶高血糖小鼠模型和高脂饲料高血脂小鼠模型,进行摄入不同剂量的蜈蚣藻多糖的动物实验,以测定的小鼠空腹血糖值、大鼠血脂水平[胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]以及肝脏的生化指标值,探讨蜈蚣藻多糖的降血糖、降血脂活性效果。结果表明蜈蚣藻多糖能显著降低高血糖小鼠的空腹血糖值及高血脂小鼠的TC,TG,LDL-C含量,提高HDL-C含量。蜈蚣藻多糖具有降血糖、降血脂等功效。

蜈蚣藻多糖纯化及抗氧化作用的研究

采用热水浸提法提取蜈蚣藻多糖,通过对超氧阴离子(·O-2)、羟基自由基(·OH)清除效果的研究,评价了蜈蚣藻多糖的体外抗氧化活性,以及对蛋白脱除率和多糖损失率的分析,比较了TCA法和Sevage法脱蛋白的效果,利用Sephadex G-150柱纯化蜈蚣藻多糖,并分析了其部分理化性质和相对分子质量分布。结果表明,蜈蚣藻多糖对·OH清除率的IC50为4.62 mg/mL,对·O-2清除率的IC50为0.62mg/mL,具有体外抗氧化效果;Sevage法脱蛋白效果优于TCA法,蛋白脱除率达85.55%,多糖损失率为15.93%;蜈蚣藻多糖是一种以多糖为主、含有糖蛋白的复合物,其相对分子量的分布范围在3.5×105～1.2×105Da。

蜈蚣藻多糖的降解及其体外抗氧化活性研究

本文通过研究和优化降解条件,建立了一套降解快速、反应条件温和的蜈蚣藻多糖降解方法,并进一步制备得到不同分子量多糖,对其理化性质及体外抗氧化活性进行了研究。首先通过比较微波辅助降解法和传统加热降解法,验证了微波辅助降解法的高效性,并进一步对微波功率,不同配比的H2O2和HCl,及降解温度进行研究,研究结果表明微波功率600 W,1%H2O2(V/V),pH 2,降解温度70℃的降解条件为最优降解条件。并通过控制不同反应时间降解得到了4种低分子量蜈蚣藻多糖,分别为LGFP-1:40.8 kDa、LGFP-2:22.6 kDa、LGFP-3:5.1 kDa、LGFP-4:3.0 kDa。其理化性质分析表明,降解反应在一定程度上降低了蜈蚣藻多糖的总糖、硫酸根含量,而对蛋白含量和单糖组成无显著影响,红外光谱显示降解反应未破坏多糖的主要糖结构,并通过扫描电镜观察降解前后多糖具有明显差异,多糖结构越发松散,由原本的平面片状结构逐渐变成线状结构,并出现球状结节。不同分子量蜈蚣藻多糖显示出不同的抗氧化活性,其中低分子量蜈蚣藻多糖LGFP-2、LGFP-3、LGFP-4显示出更强的DPPH自由基、羟自由基清除能力和更强的还原能力。

蜈蚣藻多糖对凡纳滨对虾免疫相关基因表达的影响

【目的】研究蜈蚣藻多糖对凡纳滨对虾免疫相关基因表达的影响,为今后将蜈蚣藻多糖开发成凡纳滨对虾免疫增强剂提供理论依据。【方法】将试验凡纳滨对虾随机分为4组,其中A组(对照组)对虾投喂基础饵料,B、C、D组对虾分别喂食含有0.1%、0.2%和0.3%蜈蚣藻多糖的药饵,饲养15 d后采用实时定量PCR对各组凡纳滨对虾的肝胰腺组织真核细胞翻译起始因子5A、巨噬细胞移动抑制因子、血蓝蛋白、酚氧化酶原、C凝集素、溶菌酶、热休克蛋白70等7个免疫相关基因的表达水平进行检测。【结果】投喂基础饵料和投喂蜈蚣藻多糖药饵的凡纳滨对虾在外表和行为上无明显差别,且均未出现对虾死亡现象。与A组相比,B、C、D组对虾肝胰腺组织中血蓝蛋白、酚氧化酶原、热休克蛋白70等3个基因的表达量明显升高,且均表现为D组>C组>B组>A组;而真核细胞翻译起始因子5A、巨噬细胞移动抑制因子、C凝集素、溶菌酶等4个基因的表达量无明显变化。【结论】蜈蚣藻多糖可影响凡纳滨对虾的非特异性免疫功能,今后可将蜈蚣藻多糖用于对虾病害防治,以减少化学药物的使用。

蜈蚣藻多糖生物活性研究

蜈蚣藻是广泛分布在中国浅海的一种大型红藻,其多糖具有优秀的生物活性,笔者着重研究蜈蚣藻多糖的益生效应,以期将蜈蚣藻多糖开发为一种新型且更为高效的益生元,起到调节人体的免疫力、增强体质的作用,使其能够作为双歧杆菌的促生长因子应用于酸奶的发酵工业中。实验采用水提法提取蜈蚣藻多糖,使用96孔板法对蜈蚣藻多糖进行益生菌增殖实验研究,以低聚果糖组与其作对照。对蜈蚣藻多糖进行体外益生效应测试,发现蜈蚣藻多糖益生效应显著,并明显优于低聚果糖;进行抑菌效应测试,发现蜈蚣藻多糖和低聚果糖都不存在抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌增殖的作用,反而具有较弱的促进作用,但都处于身体可承受的范围之内。初步判断蜈蚣藻多糖具有较好的益生效应,可以作为益生元进一步研究。

蜈蚣藻多糖拮抗黄药子诱导肝毒性的实验研究

本文主要观察蜈蚣藻多糖(GFP)对黄药子所引起肝毒性的拮抗作用及其机制。小鼠灌胃给予不同剂量GFP,6天后给予黄药子乙酸乙酯提取物(EF),检测血清生化指标谷丙/谷草转氨酶(alanine/aspartate aminotransferase,ALT/AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和总胆汁酸(total bilirubin,TB),并进行肝组织病理切片观察。检测肝内还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及GSH合成酶(glutamate cysteine ligase,GCL)活性。采用蛋白电泳(Western-blot)检测GCL催化(GCL-c)和调节(GCL-m)亚单位,血红素加氧酶(heme oxygenase-1,HO-1)的表达。结果发现:GFP(600 mg.kg 1)降低了EF诱导的ALT、AST和TB水平升高,GFP(400,600 mg.kg 1)均能降低EF增加的ALP水平。病理切片显示GFP能缓解EF诱导的肝损伤。GFP进一步升高GSH活性,逆转了EF降低的GCL活性。Western-blot结果表明:GFP逆转了EF降低的GCL-c蛋白表达,并进一步增加HO-1的表达。研究表明GFP能拮抗黄药子诱导的氧应激性肝损伤。