DNMT3a在肺腺癌中的表达及癌细胞迁移的影响分析

目的探讨DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在肺腺癌中的表达水平及影响肺腺癌细胞迁移的分子机制。方法回顾性分析2023年1~12月在安徽医科大学第一附属医院胸外科接受手术治疗的41例肺腺癌患者临床资料,使用IHC和蛋白质印迹实验(WB)检测并分析DNMT3a在41例患者肺腺癌组织及癌旁组织中的表达水平;通过分析TCGA数据库揭示DNMT3a与肺腺癌患者预后关系。慢病毒介导SK-LU-1和A549细胞系过表达或敲低DNMT3a,通过IHC、WB、实时荧光定量聚合链反应(qRT-PCR)、DNMT3a抑制剂实验观察DNMT3a对蜗牛家族转录因子(Snail)表达的影响;细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测过表达或敲低DNMT3a对肺腺癌细胞迁移的影响。结果DNMT3a高表达对比DNMT3a低表达的肺腺癌患者生存期较短,差异有统计学意义(P<0.01);DNMT3a和Snail在肺腺癌组织中较癌旁组织相比均高表达(P<0.01),且DNMT3a和Snail在肺腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.612,P<0.01)。与对照组相比,过表达DNMT3a的SK-LU-1细胞中Snail表达上调并增加了肺腺癌细胞的迁移数量(P<0.01),敲低DNMT3a的A549细胞中Snail表达下调并减少了肺腺癌细胞的迁移数量(P<0.01)。结论DNMT3a在肺腺癌组织中高表达且与不良预后显著相关,DNMT3a通过上调Snail的表达促进肺腺癌细胞的迁移。

miR-22-3p通过Snail1调控上皮-间质转化抑制人肝癌SMMC-7721细胞的迁移和侵袭

目的探讨miR-22-3p与Snail1的靶向关系,及其对人肝癌SMMC-7721细胞的迁移和侵袭的影响。方法用实时荧光定量聚合酶链反应法检测人正常肝细胞株LO2及4种肝癌细胞株中miR-22-3p及Snail1的相对表达水平并分析二者相关性。将细胞分为miR-22-3p对照组(miR-NC)、miR-22-3p模拟物组(miR-22-3p mimics)、Snail1空载体组(pLV-NC)、Snail1过表达组(pLV-Snail1)和miR-22-3p mimics+pLV-Snail1组。用划痕实验和Transwell小室分别检测5组细胞的迁移和侵袭能力,用Western blot检测Snail1和上皮-间质转化相关蛋白的表达。结果在4种肝癌细胞株中,miR-22-3p和Snail1表达呈显著负相关性(r=-0. 966,P <0. 05)。miR-NC组、miR-22-3p mimics组、pLV-NC组、pLV-Snail1组和miR-22-3p mimics+pLVSnail1组细胞划痕愈合率分别为(39. 00±2. 16)%,(11. 67±2. 05)%,(38. 00±2. 16)%,(72. 33±4. 11)%和(20. 34±2. 41)%,侵袭细胞数分别为(132. 00±6. 68),(47. 00±6. 16),(136. 67±7. 41),(205. 33±6. 60)和(73. 67±4. 50)个,Snail1蛋白相对表达量分别为(0. 39±0. 05),(0. 15±0. 03),(0. 37±0. 05),(0. 88±0. 06)和(0. 24±0. 02),上皮型钙黏蛋白相对表达量分别为(0. 24±0. 03),(0. 84±0. 06),(0. 23±0. 03),(0. 18±0. 02)和(0. 34±0. 04),神经型钙黏蛋白相对表达量分别为(0. 52±0. 03),(0. 15±0. 05),(0. 51±0. 03),(0. 92±0. 05)和(0. 35±0. 03),波形蛋白相对表达量分别为(0. 45±0. 05),(0. 14±0. 02),(0. 43±0. 04),(0. 84±0. 05)和(0. 31±0. 03)。miR-22-3p mimics组与miR-NC组、pLV-Snail1组与pLV-NC组或miR-22-3p mimics组、pLV-Snail1组与miR-22-3p mimics+pLV-Snail1组的上述指标比较,差异均有统计学意义(P <0. 05或P <0. 01)。结论 miR-22-3p能够通过靶向调控Snail1表达,进而抑制人肝癌SMMC-7721细胞的迁移和侵袭。