款冬花及蜜款冬花HPLC特征图谱和一测多评分析方法建立和应用

目的:建立款冬花及蜜款冬花的HPLC特征图谱,采用一测多评方法测定10个指标性成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C、款冬酮及甲基丁酰-3,14-Z-去氢款冬素酯)的含量,并验证方法的准确性,为其质量控制提供参考依据。方法:采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,建立款冬花及蜜款冬花HPLC特征图谱;采用二极管阵列检测器按不同时间段变换波长(0~15 min,330 nm;15~20 min,254 nm;20~30 min,330 nm;30~45 min,220 nm),以芦丁为参照物,建立一测多评同时测定上述10个成分的方法。结果:建立款冬花与蜜款冬花的特征图谱,确定了14个特征峰,62批样品色谱图的相似度均大于0.90。新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、款冬酮、甲基丁酰-3,14-Z-去氢款冬素酯相对于芦丁的校正因子分别为0.694、0.690、0.876、0.744、0.585、0.529、0.571、0.896、1.778;且在不同实验条件下重现性良好(RSD<5.0%);一测多评法的计算结果与外标法实测值之间无显著差异。结论:建立的特征图谱可以提高款冬花与蜜款冬花的质量控制水平;一测多评同时测定10个成分的方法快速准确、简便高效,专属性良好。

蜜炙款冬花HPLC指纹图谱研究

目的:建立蜜炙款冬花的HPLC指纹图谱,为该药材炮制品的质量评价提供实验依据。方法:采用HPLC技术,采用大连依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸-乙腈梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长240 nm,室温,进样量20μL。结果:建立了蜜炙款冬花的HPLC指纹图谱,方法学考察的各项参数均符合有关规定。结论:HPLC指纹图谱的建立为蜜款冬花药材的质量评价提供了实验依据。

HPLC法测定蜜炙款冬花中4种黄酮类成分

目的建立HPLC法同时测定蜜炙款冬花中芦丁、金丝桃苷、槲皮素、山柰酚4种黄酮类成分的方法。方法采用大连依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.1%磷酸-乙腈梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长240 nm,室温,进样量20μL。结果芦丁、金丝桃苷、槲皮素、山柰酚分别在1.64～164μg/mL(r=0.999 3)、0.84～84μg/mL(r=0.999 0)、0.376～37.6μg/mL(r=0.999 3)、0.256～25.6μg/mL(r=0.999 2)范围内线性关系良好,精密度、重现性、回收率均符合要求。结论该方法快速、简便,重复性好,适用于同时测定蜜炙款冬花中芦丁、金丝桃苷、槲皮素、山柰酚。

蜜炙款冬花质量标准研究

建立蜜炙款冬花的质量标准。方法:采用薄层色谱法对蜜炙款冬花进行定性鉴别。采用高效液相色谱法对蜜炙款冬花中的款冬酮含量进行定量分析,色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇∶水(85∶15)为流动相,检测波长为220 nm。另外,水分以及醇溶性浸出物参照2015版《中国药典》进行测定。结果:在薄层板色谱上,供试品薄层色谱在对照药材色谱与对照品色谱相应的位置出现相同颜色的斑点;水分不得超过14%,总灰分不得超过14%,醇溶性浸出物不得少于19%;供试品按干燥品计算,含款冬酮(C_(23)H_(34)O_5)不得低于0. 12%。结论:本研究拟订的质量标准可应用于蜜炙款冬花的质量控制。

多指标综合评分法结合响应曲面法筛选蜜炙款冬花的最佳炮制工艺

目的基于响应曲面法,从多指标综合评价的角度建立蜜炙款冬花的最佳炮制工艺。方法用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)定量分析,以款冬酮、绿原酸、异绿原酸A和芦丁含量的综合评分值为考察指标,以加蜜量、炒制温度、炒制时间为单因素,用响应曲面法优选出蜜款冬花的最优炮制工艺并进行验证实验。结果优选的蜜炙款冬花最佳炮制工艺为加蜜量为4倍药材量,炒制温度为195℃,炒制时间为12 min。验证实验中3批样品提取后的综合评分值(94.16%)与预测值(95.92%)相比,相对误差为0.93%。结论该实验的方法学考察结果准确、重复性好,用响应曲面法优选的蜜炙款冬花的最佳炮制方案可行,为制定蜜炙款冬花的质量标准提供了理论依据。