基于特征图谱结合效毒值与外观性状的蜜马兜铃炮制工艺研究

目的基于特征图谱结合效毒值与外观性状的测定,研究蜜马兜铃炮制过程中毒性成分的变化规律。方法采用高效液相建立17批蜜马兜铃特征图谱,对炮制蜜用量、稀释倍数、润制时间、炒制时间进行考察;在炮制过程中隔点取样,测定色度值及特征图谱,进行外观性状与内在效毒值的综合评价。结果蜜马兜铃特征图谱标定了10个共有峰,指认6个特征峰,其中峰2为木兰花碱、峰5为7-羟基马兜铃酸A、峰6为马兜铃酸D、峰8为马兜铃酸B、峰9为马兜铃内酰胺Ⅰ、峰10为马兜铃酸Ⅰ。前处理考察确定蜜用量为每100 kg待炮炙品用炼蜜25 kg,炼蜜加入3倍沸水稀释,润制时间为60 min。炒制过程显示,蜜马兜铃毒性成分的峰面积随着炮制时间的延长呈现明显的下降趋势,木兰花碱与5个毒性成分的效毒值也逐渐增大。结合外观性状与内在效毒值进行综合评价,炮制19~27 min的样品排名前5,炮制时间确定为23~27 min。结论马兜铃经炮制后,毒性成分的相对含量降低,效毒值增加,毒性减弱。效毒值结合外观性状的质量评价方法,可为毒性中药饮片的炮制提供参考。

马兜铃和蜜马兜铃毒性研究

目的:观察马兜铃和蜜炙马兜铃急性毒性反应,测定其各自半数致死量,观察马兜铃蜜炙后大鼠肾毒性反应。方法:小鼠灌胃给药7天,观察其灌胃后30分钟内的自主活动或其它变化,记录7天内小鼠的死亡数及死亡时间,以小鼠急性死亡率为指标,通过统计学处理得出其半数致死量。结果:马兜铃和蜜马兜铃对小鼠LD50分别为34.0 g/kg·天和62.6 g/kg·天;LD50的95%的置信限分别为42.0-27.7 g/kg·天和55.1-71.1 g/kg·天。结论:马兜铃具有较大的毒性,经蜜炙后其毒性降低,故临床宜采用其蜜炙品。

正交实验优选恒温干燥法蜜炙马兜铃降毒炮制工艺

目的筛选恒温干燥法蜜炙马兜铃降毒的最佳炮制工艺。方法以马兜铃酸含量为指标,采用正交实验法对恒温干燥法蜜炙马兜铃的炮制工艺进行优选。结果加蜜量对实验结果有显著影响,烘制温度和烘制时间对实验结果无显著影响,最佳炮制工艺为:加蜜量35%,烘制温度110℃,烘制时间60min。结论优选得到的工艺参数有实际应用意义。

北马兜铃蜜炙前后挥发油成分的GC-MS分析

以环己烷为溶剂,用水蒸气蒸馏法分别来提取生北马兜铃和蜜炙北马兜铃的挥发油,用气-质联用(GC-MS)技术对挥发油的成分进行鉴定,同时以总离子流图为依据,用归一化法计算各成分的相对含量。从生北马兜铃的挥发油中鉴定出57个化合物,主要成分为:4-蔻烯(9.74%),β-石竹烯(9.65%);蜜炙北马兜铃的挥发油中鉴定出28个化合物,主要成分为:邻苯二甲酸二丁酯(18.4%)。北马兜铃蜜炙前后的挥发油中共有成分7个,生成新化合物21个。

马兜铃提取条件的优化以及炮制减毒的研究

采用单因素试验考察药材粒径、加水量、煎煮时间和煎煮次数4个因素对马兜铃中马兜铃酸A提取效果的影响。运用HPLC测定炒制马兜铃与蜜炙马兜铃中马兜铃酸A的含量。结果表明马兜铃的最佳提取条件为粒径1cm2,加水22倍量,煎煮2次,每次1.0h。马兜铃炒制和蜜炙均可降低毒性成分马兜铃酸A的含量,蜜炙使马兜铃酸A的含量降低了51.77%,减毒效果明显优于炒制。