蝇蛆抗氧化肽对IPEC-J2细胞氧化应激损伤的保护作用

【目的】以蝇蛆抗氧化肽(FTP)为研究对象,利用体外化学和细胞试验,探究FTP对DPPH和ABTS+·自由基清除能力以及对IPEC-J2细胞氧化应激损伤的保护作用。【方法】通过测定不同浓度(500、1000、2000、3000、4000μg/mL)FTP对DPPH、ABTS+·自由基的清除率检测FTP的体外抗氧化能力;将IPEC-J2细胞用不同浓度(0、100、250、500、1000、2000μg/mL)FTP培养,利用MTT法测定孵育24 h后各组细胞的存活率;利用MTT法筛选出适宜的过氧化氢(H 2O 2)浓度构建氧化应激模型;根据构建的氧化应激模型和FTP适宜的浓度梯度,将IPEC-J2细胞随机分为空白组、模型组、试验组(100、250、500、1000μg/mL),分别测定各组细胞存活率、活性氧(ROS)水平以及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)水平。【结果】当FTP浓度为4000μg/mL时DPPH和ABTS+·自由基的清除率分别达到了54.82%和81.90%;不同浓度FTP对IPEC-J2细胞均无生长抑制作用,细胞存活率均高于100%,呈浓度梯度性增长,且FTP浓度为2000μg/mL的细胞存活率是空白组的1.22倍;H 2O 2构建细胞氧化应激模型的适宜浓度为1000μmol/L。与空白组相比,模型组细胞存活率极显著降低,ROS和MDA水平极显著提高,SOD和CAT活性极显著降低(P<0.01);与模型组相比,4个试验组细胞存活率均极显著增高(P<0.01),500μg/mL FTP组细胞存活率是模型组的2.37倍,500和1000μg/mL FTP组的ROS和MDA水平极显著降低(P<0.05),SOD和CAT活性极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),且均呈剂量效应关系。【结论】FTP对IPEC-J2细胞氧化应激损伤有显著的保护作用,且呈剂量效应。