蝉拟青霉多糖对老年大鼠免疫功能的调节作用

目的：研究蝉拟青霉水提物多糖对老龄大鼠免疫功能的调节作用。方法：以生理盐水处理的10～12周龄SD青年大鼠、18月龄SD老龄大鼠为对照组，实验组以不同剂量蝉拟青霉水提物多糖（50，100，200mg·kg^-1·d^-1）处理老龄大鼠3周，观察对照组、实验组大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞对葡萄球菌的吞噬作用；以MTT法检测大鼠脾组织细胞分别在刀豆蛋白A（ConA），磷酸脂多糖（LPS）诱导下的淋巴细胞增殖活性；同时检测大鼠脾组织细胞内酸性磷酸酶（ACP），乳酸脱氢酶（LDH），精氨酸酶（ARG）等酶活力，并于透射电镜下观察大鼠脾组织超微结构。结果：与青年组比较，老龄组大鼠巨噬细胞的噬菌能力及脾组织淋巴细胞的增殖反应显著降低（P〈0．01），脾细胞内ACP，LDH，ARG等酶活力也显著低下（P〈0．01）。各种剂量蝉拟青霉多糖作用3周后老龄大鼠的这些指标均有改善，脾组织超微结构显示线粒体、内质网结构明显且数量增多。结论：蝉拟青霉水提物多糖能提高老龄大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞吞噬功能和脾细胞免疫功能及增殖反应能力，使老龄大鼠低下的免疫功能得以改善，可能具有一定的抗衰老作用。

蝉拟青霉多糖抗衰老作用的实验研究

目的 探讨蝉拟青霉多糖的抗衰老作用。方法 老龄大鼠经皮下注射 1 0 0 mg/ kg蝉拟青霉多糖。连续用药 3 w后 ,观察老龄大鼠体重、脏器湿重指数、外周血白细胞 (WBC)、血红蛋白 (Hb)、血清胆固醇 (Ch)、甘油三酯 (TG)、尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)等含量及酸性磷酸酶 (ACP)、乳酸脱氢酶 (LDH)等活力的变化。结果 蝉拟青霉多糖可增加老龄大鼠脾脏湿重、脾脏湿重指数 ,外周血 WBC数 ,Hb含量以及减少 Ch、TG的含量。结论 蝉拟青霉多糖能增强老龄大鼠的免疫功能和减少老龄大鼠体内脂质的含量 ,从而可能具有抗衰老作用。

蝉拟青霉对大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞的激活作用

目的 :探讨蝉拟青霉菌丝体水提取物对大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞的激活作用。方法 :大鼠随机分为4组 :正常对照组 (Ⅰ )、环磷酰胺组 (Ⅱ )、蝉拟青霉组 (Ⅲ )、环磷酰胺加蝉拟青霉组 (Ⅳ ) ,各组大鼠在同等条件下饲养 ,连续皮下注射相应药物 2 6d。用生理盐水灌洗大鼠的腹腔和肺泡 ,收集腹腔与肺泡巨噬细胞 (PMΦ、AMΦ) 37℃培养 2h ,用生化方法测定巨噬细胞内酸性磷酸酶 (ACP)和乳酸脱氢酶 (LDH)的活力 ,并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果 :蝉拟青霉菌丝体水提取物使正常大鼠PMΦ、AMΦ内ACP、LDH活力显著升高 ,并能拮抗由于使用环磷酰胺所致的降低作用 ;而且能显著增强大鼠PMΦ、AMΦ的吞噬能力。结论 :蝉拟青霉对腹腔。

蝉拟青霉多糖对大鼠免疫功能的调节作用

目的 :探讨不同剂量蝉拟青霉多糖对大鼠免疫功能的调节作用。方法 :每天给大鼠称重 ,并按所称大鼠体重 ,以 5 0、10 0、2 0 0mg/kg的蝉拟青霉多糖 (PCPS)剂量在大鼠后背部皮下注射给药半个月。处死大鼠后称脾和胸腺湿重 ,并计算其湿重指数 ;计数大鼠外周血白细胞 (WBC)数 ;以双试剂终点法测定酸性磷酸酶 (ACP)、速率法测定乳酸脱氢酶 (LDH)及测定精氨酸酶 (arginase)等活力 ;进行大鼠肺泡巨噬细胞 (AM)中性红吞噬试验。结果 :PCPS组大鼠脾脏、胸腺湿重指数及白细胞计数显著高于对照组 ;PCPS组大鼠肝、肾、脾、胸腺内ACP、LDH活力显著升高 ,AM吞噬功能显著增强 ,AM内ACP、LDH、arginase活力显著提高 (P <0 0 1,P <0 0 5 )。结论 :不同浓度蝉拟青霉多糖能提高大鼠外周血WBC数 ,激活肺泡巨噬细胞 ,并具有剂量依赖性。

蝉拟青霉总多糖对老龄大鼠组织器官免疫功能调节的实验研究

目的观察蝉拟青霉总多糖对老龄大鼠肝、肾、脾、胸腺等组织器官免疫功能的影响,探讨其对老龄大鼠的免疫调节作用。方法分别以双试剂终点法、速率法在全自动生化分析仪上测定酸性磷酸酶(ACP)及乳酸脱氢酶(LDH)活力;以鸟氨酸的生成判断精氨酸酶(Arg)的活力;以Ellman试剂测定还原型谷胱甘肽(GSH)水平;以硫代巴比妥酸醋酸法测定脂质过氧化物(LPO)含量。结果老龄大鼠ACP、LDH(肝、肾、脾)、Arg(肝、肾、胸腺)活力、GSH(肝、肾)水平显著上升,同时LPO(肝、肾)的含量下降。结论蝉拟青霉总多糖对老龄大鼠组织器官的免疫功能具有增强作用。

蝉拟青霉总多糖对大鼠非特异性免疫调节作用的研究

目的 :研究蝉拟青霉总多糖对机体的免疫调节作用。方法 :2 0 0mg/L的蝉拟青霉总多糖 (PCTPS)臀部皮下注射处理大鼠 17d后 ,用常规方法测定大鼠外周血白细胞 (WBC)数 ;用生化方法测定脾脏与胸腺组织中的脂质过氧化物 (LPO)和还原型谷胱甘肽 (GSH)水平 ;含 10 %小牛血清的RPMI- 1640细胞培养液贴壁培养肺泡巨噬细胞(AMφ) 2h后 ,用全自动生化分析仪测定其中乳酸脱氢酶 (LDH)与酸性磷酸酶 (ACP)活性 ,并进行中性红吞噬试验。 结果 :PCTPS组大鼠WBC数高于对照组 (P <0 .0 1) ;脾脏、胸腺组织中GSH水平高于对照组 (P <0 .0 1、P <0 .0 5 ) ,而胸腺组织中LPO水平低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;AMφ内LDH和ACP活性均强于对照组 (P <0 .0 1、P <0 .0 1) ,对中性红摄取能力也高于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :PCTPS能提升WBC数 ;减少LPO的生成 ,维持GSH的含量 ,具有增强清除自由基的能力 ;

蝉拟青霉孢子粉对小菜蛾的致病性试验

试验采用蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae)孢子粉处理小菜蛾Plutella xylostella L.幼虫,结果表明,蝉拟青霉可以在小菜蛾幼虫和蛹上寄生,并导致小菜蛾死亡。室内试验,蝉拟青霉对小菜蛾的致死率高达96.55%;田间试验,1.6×107个/mL浓度的022017#蝉拟青霉防治小菜蛾的校正死亡率可达75.86%。该结果可用于蝉拟青霉新型真菌杀虫剂的研制。

药用真菌蝉拟青霉生物活性物质的研究进展

蝉拟青霉为虫草属真菌,是中药蝉花的无性型时期,具有较高的食用、营养和药用价值,被认为是和冬虫夏草相近的最具开发利用前景的珍贵菌类之一。作者在总结前人研究成果的基础上,综述了蝉拟青霉各种代谢产物、生物活性及发酵生产研究现状,探讨了在该研究领域存在的问题及今后的发展方向。

蝉拟青霉不同纯化组分对体外抗肿瘤作用的基础研究

目的:为了进一步研究蝉拟青霉总多糖和腺苷单用或分别联合顺铂(DDP)或阿霉素(ADM)在体外的抗肿瘤作用。方法:用MTT法检测DDP、ADM、总多糖、总腺苷单独及联合用药对人肺腺癌(PAA-1)细胞的生长抑制能力;用流式细胞仪检测其对体外培养细胞系细胞周期的影响;用光镜检查其对体外培养PAA-1细胞系集落形成率的影响;用流式细胞仪检测其对体外培养淋巴细胞亚群分化的影响。结果:DDP、ADM、总多糖、腺苷对人肺腺癌(PAA-1)细胞生长抑制的IC50分别为9.05μg/mL、36.21μg/mL、10.86mg/mL、7.81mg/mL。DDP或ADM和多糖联用对PAA-1细胞的生长抑制主要表现出拮抗效应;0.5mg/mL、0.25mg/mL腺苷与4μg/mL阿霉素联合作用时,显示出拮抗效应,而当8mg/mL腺苷与4μg/mL阿霉素联用时,显示协同效应;不同浓度腺苷单用与和DDP联合使用相比,对细胞生长影响无显著性差异;腺苷和ADM联合作用,随着腺苷浓度的增加,G0/G1期细胞逐渐减少,而G2/M期相对增加。对体外培养PAA-1细胞系集落形成率多糖组和阴性对照组未见明显差异,不同浓度腺苷组的集落形成率略低于阴性对照组,随着腺苷浓度逐渐增加,集落形成率逐渐下降。多糖对体外培养淋巴细胞亚群的分化无影响。结论:总多糖、腺苷具有一定的体外抗肿瘤作用,总多糖与DDP或ADM联用不能增加其体外的抗肿瘤作用,腺苷与ADM联用可增加其体外的抗肿瘤作用。

蝉拟青霉对大鼠免疫功能和血液生化指标的影响

目的 :探讨蝉拟青霉对机体免疫功能和脂类物质代谢以及内脏器官的影响。方法 :5 0 0mg kg体重的蝉拟青霉皮下注射处理大鼠 12天后 ,用含 10 %小牛血清的RPMI 16 40细胞培养液贴壁培养肺泡巨噬细胞(AMφ) 2h ,采用全自动生化分析仪测定其中乳酸脱氢酶 (LDH)和酸性磷酸酶 (ACP)活性以及大鼠血液的主要生化指标。结果 :蝉拟青霉使大鼠AMφ内LDH和ACP活性显著升高 (均为P <0 .0 1) ;血液中胆固醇 (Ch)水平降低 (P <0 .0 0 1) ,碱性磷酸酶 (ALP)活性下降 (P <0 .0 1) ,尿素氮 (UN)含量减少 (P <0 .0 5 )。结论 :蝉拟青霉能激活大鼠AMφ ,具有增强大鼠免疫能力、改善脂类物质代谢和保护脏器组织的作用。

虫生真菌蝉拟青霉及其角变株的比较研究

蝉拟青霉GZUIFR-JZD3菌株在沙氏培养基上可产生孢子型(JZD3-C)和菌丝型(JZD3-M)两类不同的角变。为了进一步研究其差异,笔者比较了两个角变株与原始菌株(JZD3)在不同培养基上的生长及产孢量。研究了其对甘蓝蚜的致病性并测定了它们的胞外多糖、蛋白酶、蛋白质、SOD和POD的含量。结果表明:3个菌株形态差异较大,在多数培养基上,JZD3生长最快,产孢量最大;胞外多糖、SOD、POD含量以及对蚜虫致病率也是JZD3菌株最佳;而蛋白酶和蛋白质含量则分别是JZD3-C和JZD3-M较高。

蝉拟青霉多糖体外对乙型肝炎病毒复制的抑制作用

目的:探讨蝉拟青霉多糖(PcPS)体外对乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用及对HepG2.2.15细胞表达Toll样受体4(TLR4)mRNA的影响。方法:以不同浓度PcPS与HepG2.2.15细胞株共培养,以拉米夫定(LMV)为阳性对照,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和ELISA法,检测PcPS对HepG2.2.15细胞毒性作用及其分泌HBsAg、HBeAg的情况。实时荧光定量PCR分析PcPS对HepG2.2.15细胞表达与分泌HBV-DNA和TLR4 mRNA表达的影响。结果:蝉拟青霉多糖在体外能有效抑制HepG2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg,最大抑制率分别为44.8%、31.0%;对HepG2.2.15细胞内HBV-DNA复制和TLR4 mRNA表达均有一定抑制作用。结论:一定浓度的蝉拟青霉多糖在体外具有显著抑制HBV的复制作用。

蝉拟青霉杀虫活性成分的分离

【目的】采用化学分离分析和生物检测相结合的方法,首次从蝉拟青霉[Paecilomyces cicadae(Miq.)Samson]子实体提取物中分离出对小菜蛾[Plitella xylostella(Lepidoptera:Plutellidae)]具有杀虫活性的化合物。【方法】在活性检测引导下,蝉拟青霉子实体40%乙醇提取物经二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇溶剂依次萃取(剩余溶液为水溶组分),再经过大孔树脂、HPLC和Sephedex LH-20分离纯化得到杀虫活性化合物。【结果】分离纯化到一个白色粉末状化合物,浓度10mg·ml-1,24、48和72h时校正死亡率分别为(95.1±1.8)%、(97.7±1.6)%和(99.1±1.7)%。【结论】该化合物具有较好的杀小菜蛾活性,对酸稳定,对胃蛋白酶不敏感,并具有茚三酮不显色等其它理化性质。

蝉拟青霉产透明质酸最佳液体培养基的筛选

本研究利用硫酸咔唑法检测透明质酸含量,考察了碳源、氮源和无机盐对蝉拟青霉发酵液中透明质酸含量的影响;实验结果表明,蝉拟青霉产透明质酸的最佳碳源、氮源和无机盐分别为:6%的乳糖、0.5%的牛肉膏与酵母膏的混合物(1:1)以及0.1%的MgSO4·7H2O。

蝉拟青霉对蚜虫的致病性研究

[目的]蝉拟青霉在害虫防治上有很大的优越性。研究了蝉拟青霉菌株对中药材板蓝根蚜虫的防治效果。[方法]通过生物测定法,对蝉拟青霉4个菌株致病性进行了测定。[结果]蝉拟青霉分生孢子、菌丝、发酵代谢产物均对蚜虫有一定的杀蚜效果。蝉拟青霉侵染蚜虫处理48 h后3 L菌株发酵产物对蚜虫的致死率最高,可达94.38%;处理7 d后孢子对蚜虫的校正死亡率可达83.52%,菌丝对蚜虫的校正死亡率可达82.35%。[结论]蝉拟青霉3716菌株和3L菌株对蚜虫的致死效果佳,作为蚜虫生物防治因子有较大的潜力。

蝉拟青霉多糖对人外周血单个核细胞及白血病细胞株U937、K562增殖的调节作用

目的:研究蝉拟青霉总多糖对人外周血单个核细胞抗肿瘤活性的促进作用及其可能对肿瘤细胞株U937、K562的直接抑制作用。方法:用水提取蝉拟青霉菌丝体总多糖,以MTT法测定不同浓度总多糖对人外周血单个核细胞及白血病细胞株U937、K562增殖的影响,ELISA法测定多糖作用44h后,外周血单个核细胞培养上清液中hTNF-α、hIFN-γ的含量。结果:一定浓度的蝉拟青霉多糖能使外周血单个核细胞的增殖率升高,较高浓度多糖能抑制白血病细胞株U937、K562的增殖,同时蝉拟青霉多糖能提高外周血单个核细胞表达hTNF-α、hIFN-γ。结论:蝉拟青霉多糖可能具有直接抑制U937、K562的增殖作用;能提高外周血单个核细胞的增殖能力,使其分泌hTNF-α、hIFN-γ升高,从而可能促进外周血单个核细胞的杀肿瘤活性。

蝉拟青霉减轻环磷酰胺所致免疫抑制效应的实验研究

目的 :探讨蝉拟青霉对正常及免疫抑制大鼠的免疫调节作用。方法 :各组大鼠连续皮下注射相应药物 2 6d后 ,测定脾脏和胸腺的重量及其系数 ;用生化方法测定血清、肝、脾、肾、胸腺组织细胞中酸性磷酸酶 (ACP)和乳酸脱氢酶 (LDH)的活力 ;在电子显微镜下观察脾脏巨噬细胞 (MΦ)的形态结构。结果 :蝉拟青霉使正常大鼠脾重 (脾系数 )显著增加 (P <0 .0 0 1或P <0 .0 1) ,抑制环磷酰胺所致免疫抑制大鼠的免疫器官(脾脏、胸腺 )萎缩 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;使正常大鼠肾组织中ACP活力、胸腺组织内LDH活力明显升高 (P<0 .0 5 ) ,并能阻遏环磷酰胺所致免疫抑制大鼠肝、脾、肾、胸腺组织细胞内ACP、LDH活力的降低 (P <0 .0 5或P <0 .0 1或P <0 .0 0 1) ;电镜观察发现 ,蝉拟青霉使正常大鼠脾MΦ体积增大 ,胞质内溶酶体增多 ,细胞表面可见粗而短的突起。结论 :蝉拟青霉对机体具有免疫激活活性 。

蝉拟青霉APC20菌株对小菜蛾的室内毒力试验

[目的]为蝉拟青霉的进一步应用提供理论依据。[方法]采用生物测定法测定蝉拟青霉APC20菌株对小菜蛾的室内毒力。[结果]药后第1～4天,蝉拟青霉APC20各个浓度的孢子悬浮液对小菜蛾的校正死亡率均低于50%,而第7天,浓度为3.0×10^8个/ml的孢子悬浮液对小菜蛾的校正死亡率达85.11%,并且虫尸布满蝉拟青霉的菌丝体和孢子粉,说明APC20对小菜蛾呈现较强的寄生致死性。蝉拟青霉菌株APC20对小菜蛾具有较强的侵染力,处理小菜蛾第4～7天的LC50分别为5.3×10^5、1.1×10^5、1.1×10^4、8.9×10^2个/ml。[结论]蝉拟青霉APC20菌株对小菜蛾具有一定的致病力。