蝎素组分Ⅲ对Jurkat E6-1细胞中LAT和SLP-76表达的影响

目的研究蝎素组分Ⅲ(SVC-Ⅲ)对Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76表达的影响,并探讨SVC-Ⅲ参与细胞免疫调控的可能机制。方法不同浓度SVC-Ⅲ(100 ng.mL-1、10 ng.mL-1、1 ng.mL-1、0.1 ng.mL-1)与植物凝集素(PHA)共同刺激培养Jurkat E6-1细胞。72 h后收获细胞,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞内信号分子LAT和SLP-76 mRNA表达变化情况。结果高浓度SVC-Ⅲ(100 ng.mL-1)明显抑制Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76的mRNA的表达(P<0.05),低浓度SVC-Ⅲ(0.1 ng.mL-1、1 ng.mL-1、10 ng.mL-1)对Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76的mRNA的表达没有明显作用(P>0.05)。结论SVC-Ⅲ能够抑制Jurkat E6-1细胞LAT和SLP-76的表达,在一定程度上阻止T细胞信号进一步的传递,从而抑制Jurkat E6-1细胞的活化能力。并且SVC-Ⅲ可抑制PHA诱导的Jurkat E6-1细胞的活化,其作用机制可能与早期活化相关的LAT和SLP-76等的表达相关。

蝎素组分Ⅲ对Jurkat E6-1细胞中CD69表达的影响

[目的]本文研究蝎素组分Ⅲ(scorpion venom crudeⅢ,SVC-Ⅲ)对Jurkat E6-1细胞CD69表达的影响,并探讨SVC-Ⅲ参与细胞免疫调控的可能机制。[方法]不同浓度SVC-Ⅲ(100ng/ml、10ng/ml、1ng/ml、0.1ng/ml)与植物凝集素(PHA)共同刺激培养Jurkat E6-1细胞。36h后利用流式细胞技术检测Jurkat E6-1细胞表面活化信号分子CD69表达变化情况。[结果]与PHA对照组比较,经PHA刺激培养的Jurkat E6-1细胞中,加入不同浓度的SVC-Ⅲ时,CD69表达均明显抑制(P﹤0.05),但高浓度(100ng/ml)SVC-Ⅲ对Jurkat细胞CD69表达的抑制作用没有低浓度SVC-Ⅲ(1ng/ml、0.1ng/ml)强,差异有统计学意义(P﹤0.05)。[结论]SVC-Ⅲ可抑制PHA诱导的JurkatE6-1细胞的活化,其作用机制可能与早期活化相关的CD69等的表达相关。

蝎素组分Ⅲ对Jurkat细胞NF-кB通路的调节作用

目的:研究蝎素组分Ⅲ(SVC-Ⅲ)对Jurkat细胞NF-кB通路的免疫调节作用。方法:不同浓度(0、0.1、1.0、10、100ng/mL)SVCⅢ刺激Jurkat细胞,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IKK1和IкBa mRNA表达变化;荧光素酶报告基因测定NF-κB活化情况。结果:低剂量的SVC-Ⅲ(0.1、1.0 ng/mL)对IKK1、IкBa及NF-кB有促进作用,浓度为1.0ng/mL促进作用最强,中、高剂量SVC-Ⅲ(10 ng/mL、100 ng/mL)对IKK1、IкBa及NF-кB则有抑制作用。结论:不同剂量的SVC-Ⅲ对NF-кB呈现活化或抑制作用,因此对T淋巴细胞中NF-кB通路的调节具有剂量依赖性。