蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血-再灌注继发炎性损伤的保护作用

目的 研究蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血 再灌注继发炎性损伤的保护作用及其机制。方法 用线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型 ,缺血 2h后 ,将线抽出实行再灌注 ,观察蝙蝠葛酚性碱对粘附分子 (ICAM 1)表达、白细胞的粘附与浸润、髓过氧化物酶 (MPO)活性和一氧化氮 (NO)含量的影响。结果 蝙蝠葛酚性碱可明显抑制ICAM 1的表达 ,减轻白细胞的粘附与浸润 ,降低缺血侧大脑皮层和海马组织中的MPO活性和NO含量。结论 蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血 再灌注后的炎性损伤有明显保护作用 ,其机制可能与抑制ICAM 1表达 ,减轻白细胞的粘附与浸润 。

蝙蝠葛酚性碱的抗心律失常作用

用哇巴因致豚鼠心律失常、乌头碱致大鼠心律失常、电刺激致兔室颤、大鼠冠脉结扎致复灌性心律失常模型证实蝙蝠葛酚性碱具剂量依赖性的抗室性心律失常作用；用氟化钙一乙酰胆碱致小鼠房颤模型，结果提示蝙蝠葛酚性碱具有抗房性心律失常作用。离体试验显示蝙蝠葛酚性碱具有浓度依赖性延长豚鼠心室乳头肌ＡＰＤ＿（５０）、ＡＰＤ＿（９０）和ＥＲＰ以及降低ＡＰＡ、减馒Ｖ＿（ｍａｘ）的作用。

蝙蝠葛酚性碱对人肿瘤细胞PC-3、BT5637增殖的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)体外抗肿瘤作用。方法采用MTT比色法测定不同浓度的蝙蝠葛酚性碱对体外处理PC-3(前列腺癌)和BT5637(膀胱癌)细胞株24h的存活率。同时测定药物处理不同细胞株的细胞增殖抑制率和IC50及IC90。实验设立阴性空白对照组和氟尿嘧啶阳性对照组。结果不同浓度蝙蝠葛酚性碱对PC-3和BT5637细胞株的细胞增殖具有抑制作用,抑制作用呈浓度依赖关系,与空白对照组比较具有统计学意义。结论蝙蝠葛酚性碱对体外培养人肿瘤细胞株的增殖有明显的抑制和杀伤作用,显示其具有细胞毒效应。

蝙蝠葛酚性碱对实验性心肌缺血血流动力学的影响

目的 :观察蝙蝠葛酚性碱对实验性心肌缺血血流动力学的影响。方法 :结扎大鼠左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型。结果 :蝙蝠葛酚性碱可显著抑制心肌缺血所致LVEDP的升高和MBP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、CO的降低。结论 :蝙蝠葛酚性碱能改善心肌缺血时血流动力学的紊乱 ,提示蝙蝠葛酚性碱对心肌缺血具有保护作用。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤裸鼠细胞凋亡相关基因P53蛋白表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对胰腺癌(BXPC-3)荷瘤裸鼠肿瘤组织中P53蛋白表达的影响。方法:通过蛋白印迹技术(Western blotting)观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53蛋白表达的影响。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53蛋白表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与PAMD能够诱导细胞凋亡及影响凋亡相关基因P53蛋白的表达有关。

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤抑制作用及肿瘤组织中MMP-9含量的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠肿瘤的抑制作用和对BXPC-3肿瘤裸鼠瘤组织中MMP-9表达的影响。方法:建立BXPC-3肿瘤裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑制率。应用S-P免疫组织化学方法,检测蝙蝠葛酚性碱对瘤组织MMP-9表达的影响。结果:蝙蝠葛酚性碱高、中、低剂量对BXPC-3肿瘤裸鼠均有明显抑制肿瘤生长的作用,其抑瘤率分别为34.91%、52.83%、41.51%,与模型对照组比较具有统计学意义(P<0.01)。蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠的MMP-9表达有明显抑制作用(P<0.01)。结论:蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠具有明显的抑瘤作用,其抑瘤作用可能与通过降低MMP-9含量有关。本研究为其在临床应用提供了一定的实验和理论依据。

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤组织中MMP-2含量的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠免疫器官的影响和对BXPC-3裸鼠瘤组织中MMP-2表达的影响。方法建立BXPC-3肿瘤裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对裸鼠免疫器官指数的影响。应用S-P免疫组织化学方法,检测蝙蝠葛酚性碱对瘤组织MMP-2表达的影响。结果蝙蝠葛酚性碱对肿瘤裸鼠的免疫器官指数无明显影响。蝙蝠葛酚性碱可以降低BXPC-3肿瘤裸鼠瘤组织中MMP-2的含量,与模型组比较具有统计学意义(P<0.05)。结论蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3肿瘤裸鼠的免疫器官无严重影响,其抑瘤作用可能与降低MMP-2含量有关。该研究为其在临床应用提供了一定的实验和理论依据。

蝙蝠葛酚性碱对犬冠状动脉结扎形成心肌梗死的保护作用

目的 :研究蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对急性心肌梗死的保护作用。方法 :用麻醉犬冠状动脉结扎造成心肌梗死模型 ,设立PAMD 3 5和 7mg·kg-1两剂量组 ,地奥心血康 (DAXXK) 4 0mg·kg-1阳性对照组 ,伪手术组及模型对照组。观察各组心电图ST段 ,血清LDK和CK ,以及心肌梗死范围的变化。结果 :PAMD 7 0mg·kg-1组30min时 ,在对抗ST段上移及降低LDH活性上优于DAXXK 4 0mg·kg-1组 (P <0 0 1) ,降低CK活性的作用与DAXXK相当 (P >0 0 5 ) ;7 0mg·kg-1PAMD组降低梗死范围与DAXXK 4 0mg·kg-1组作用无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PAMD对结扎犬冠脉造成急性心肌梗死有保护作用。

蝙蝠葛酚性碱抗突变作用的研究

目的应用昆明小鼠股骨骨髓嗜多染红细胞微核实验,研究蝙蝠葛酚性碱（phenolic alkaloids from menispermum dauricum,PAMD）的致突变作用和抗突变作用.方法均在10～40 mg/kg剂量下,连续腹腔注射给药11d,在致突变实验,末次给药6 h后处死小鼠,检测骨髓嗜多染红细胞微核率.在抗突变实验,小鼠在于处死前的24 h,腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺（cyclophosphamide,CP）或2 mg/kg丝裂霉素C（mitomycinc,MC）,末次给药6 h后取样.结果蝙蝠葛酚性碱与对照组相比未诱发骨髓嗜多染红细胞微核率的增高（微核细胞率＜3‰）.蝙蝠葛酚性碱可使环磷酰胺和丝裂霉素C诱发的骨髓细胞微核率增高数值出现明显的降低.PAMD＋CP组微核细胞抑制率分别为61.83%、43.51%和22.52%.PAMD＋MC组微核细胞抑制率分别为31.09%、21.50%和8.29%.结论蝙蝠葛酚性碱具有一定的抗突变作用,而无致突变作用.

蝙蝠葛酚性碱对“血瘀”模型大鼠全血粘度及脑缺血大鼠脑血流量的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱对“血瘀”模型大鼠全血粘度和脑缺血大鼠脑血流量的影响。方法:冰水浸泡法制备大鼠急性血瘀模型,观察蝙蝠葛酚性碱对全血高、中、低切粘度的影响。采用结扎颈外动脉的方法,观察PAMD对大鼠脑血流量的影响。结果:蝙蝠葛酚性碱可降低全血高、低切粘度,增加脑血流量。结论:蝙蝠葛酚性碱对脑缺血的保护作用可能与其降低全血粘度和增加脑血流量有关。

蝙蝠葛酚性碱对血栓形成和血小板聚集的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对血栓形成、血小板聚集的影响并研究其作用机制。方法用动静脉短路血栓形成模型观察血栓形成;比浊法测定血小板聚集度;电镜技术观察血小板超微结构变化;放射免疫法测定TXB2和6-酮基-PGF1α的水平;硝酸还原酶法测定兔血浆NO浓度。结果PAMD体内给药可剂量依赖性地抑制血栓形成及由ADP,AA和THR诱导的大鼠和兔的血小板的聚集;可显著抑制血小板超微结构的变化;能明显升高兔血管壁6-酮基-PGF1α产生量,对血小板释放的TXB2无明显影响;还可提高兔血浆NO的浓度。结论PAMD具抗血栓形成和抗血小板聚集的作用,其机制与增加血管壁PG I2含量,提高兔血浆NO的浓度有关。

蝙蝠葛酚性碱抗神经元缺血再灌注损伤的作用机制

目的探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)抗神经元细胞缺血再灌注损伤的作用机制。方法体外培养小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a,缺糖、缺氧和缺血清(OGSD)培养90 min,更换正常培养液并加入不同浓度的PAMd,继续培养不同时间后,收集细胞培养液,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性和神经递质含量;收集细胞,测定以下指标:①MTT法检测细胞生存活力;②荧光光度法分析胞质活性氧(ROS)含量;③激光共聚焦分析线粒体跨膜电位;④Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt C);⑤采用Caspase 3可见光底物DEVD-pNa测定Caspase 3活性。结果①PAMd促进OGSD处理后的N2a细胞存活;②PAMd抑制OGSD处理后的N2a细胞释放兴奋性神经递质;③PAMd直接清除细胞内的ROS;④PAMd能维持线粒体跨膜电位的稳定;⑤PAMd抑制线粒体Cyt C释放和抑制胞质Caspase 3活性。结论PAMd通过阻断线粒体凋亡途径和抗氧化作用发挥神经元保护作用。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p53表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法:通过实时定量PCR(Real-time PCR)技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53 mRNA表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与凋亡相关基因表达有关。

蝙蝠葛酚性碱对血小板聚集的影响及其机制研究

目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对血小板聚集的影响,探讨其抗血小板聚集的作用机制。方法用比浊法测定血小板聚集度;放免法测定兔血小板内环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)的浓度;荧光探针Fura-2/AM标记测定兔血小板内游离钙离子浓度。结果体内外实验表明,PAMD对由二磷酸腺苷(ADP),花生四烯酸(AA)和凝血酶(THR)诱导的大鼠和兔血小板聚集的抑制作用具剂量或浓度依赖性;PAMD能明显升高兔血小板内cAMP,cGMP的浓度,并抑制由THR诱导的血小板内游离钙离子浓度的升高。结论PAMD具有抗血小板聚集的作用,其机制可能与增加血小板内cAMP和cGMP的含量和抑制血小板[Ca2+]i浓度的升高有关。

蝙蝠葛酚性碱对脑缺血大鼠海马CA3区诱发电位的影响

目的探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)对脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位(PS);结扎大鼠双侧颈总动脉,造成急性不完全性脑缺血,观察PS幅度的变化;缺血前给予PAMd(5、10、20mg/kg),观察其对缺血后PS幅度的影响;并观察不同剂量谷氨酸(Glu)对诱发电位的影响。结果①急性不完全性脑缺血后,PS的幅度显著降低。②5、10、20mmol/LGlu注入后,PS的幅度均升高;当给予50mmol/LGlu时PS幅度则显著降低。③20mg/kgPAMd能部分改善脑缺血引起的PS幅度降低,并能减弱50mmol/LGlu降低PS幅度的作用。结论预先给予20mg/kgPAMd对高浓度Glu和急性脑缺血所致CA3区突触传递功能减弱有明显的改善作用。

蝙蝠葛酚性碱对动物学习记忆能力的影响

目的:观察并比较蝙蝠葛酚性碱和吡拉西坦(脑复康)对大鼠和小鼠学习能力的影响。方法:以东莨菪碱和乙醇分别使动物发生学习记忆获得障碍和记忆再现障碍,采用迷津法和跳台法进行测试。结果:蝙蝠葛酚性碱和脑复康对东莨菪碱和乙醇所致的学习记忆障碍均有改善作用;与模型组比较,蝙蝠葛酚性碱组、脑复康组P均<0.05,蝙蝠葛酚性碱100mg/kg组比50mg/kg组效果好。结论:蝙蝠葛酚性碱对动物学习记忆障碍有改善作用。

蝙蝠葛酚性碱对犬血流动力学及冠脉循环的影响

目的 研究蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对正常麻醉犬血流动力学、冠脉循环及心肌氧代谢的影响。方法 设立生理盐水阴性对照组及PAMD 3 5和 7 0mg·kg- 1 两剂量组 ,在不同时间点观察各组犬血流动力学、冠脉循环及心肌氧代谢的相关指标的改变。结果 与药前相比 ,PAMD两剂量组均可降低左心室收缩压 (LVSP)和±dp dtmax,减慢心率 ,增加心肌氧含量、降低心肌氧利用率 ,且具有增加冠状动脉血流量 ,降低冠状动脉阻力和外周阻力的作用。对血压、心输出量和左室舒张末压 (LVEDP)无显著影响。结论 PAMD能改善血流动力学。

蝙蝠葛酚性碱抑制人胃癌细胞株MGC-803增殖及对EGFR和HER-2表达的影响

目的：研究蝙蝠葛酚性碱对人胃癌细胞株MGC-803增殖的抑制作用及其对表皮生长因子受体（EGFR）和人类表皮生长因子受体2（HER-2）表达的影响以探讨其抗癌机制。方法：采用MTT法检测不同时间点不同浓度蝙蝠葛酚性碱对MGC-803细胞增殖的抑制作用,采用流式细胞仪检测不同时间点不同浓度蝙蝠葛酚性碱对MGC-803细胞周期及对EGFR、HER-2表达的影响。结果：蝙蝠葛酚性碱10-160μg/m L作用24、48 h均可抑制胃癌细胞株MGC-803的增殖;蝙蝠葛酚性碱20-80μg/m L作用24、48 h可阻滞细胞于S期,诱导细胞凋亡率升高,并显著抑制胃癌细胞株MGC-803中EGFR和HER-2的表达。结论：蝙蝠葛酚性碱可显著抑制胃癌MGC-803细胞的增殖,其作用机制可能与下调EGFR和HER-2的表达有关。

蝙蝠葛酚性碱对实验性脑缺血保护作用的研究(一)

目的 :研究蝙蝠葛酚性碱对实验性脑缺血的保护作用。方法 :结扎大鼠双侧颈总动脉及迷走神经 ,制备脑缺血再灌注模型。结果 :蝙蝠葛酚性碱可减少脑组织含水量、减少丙二醛(MDA)的产生、增强超氧化物歧化酶 (SOD)的活性。结论 :蝙蝠葛酚性碱对实验性脑缺血具有保护作用 ,其机理可能与抗自由基生成有关。

蝙蝠葛酚性碱与胰腺癌研究

主要分析中药成分蝙蝠葛酚性碱对胰腺癌的作用研究,分别从中药成分蝙蝠葛酚性碱的来源、药理作用及其对胰腺癌的抗肿瘤分子机制进行总结,为寻求中医药防治恶性肿瘤的新途径和研制新药提供实验和理论依据。