新型抗蝰蛇毒血清对不同蝰蛇毒作用的实验研究

目的 探讨新型抗蝰蛇毒血清对国产圆斑蝰蛇毒及缅甸蝰蛇毒的作用 .方法 采用免疫电泳、SDS -聚丙烯酰胺电泳及动物实验等方法 .结果 国产圆斑蝰蛇毒的LD50 (腹腔注射 )为 0 .3 0 6± 0 .0 0 3mg/kg ,缅甸蝰蛇毒的LD50 (腹腔注射 )为 0 .2 90± 0 .0 0 3mg/kg .免疫电泳结果表明国产圆斑蝰蛇毒和缅甸蝰蛇毒均和新型抗蝰蛇毒血清产生明显的免疫沉淀线 .体外中和实验表明抗蝰蛇毒血清对国产圆斑蝰蛇毒的中和抗体效价为 2 75 0 μg/ml(约45 0LD50 ) ,对缅甸蝰蛇毒的中和抗体效价为 2 490 μg/ml(约 43 0LD50 ) .体内保护实验表明给予 0 .0 5ml抗蝰蛇毒血清可抵御 2 5 4μg(约41 5LD50 )国产圆斑蝰蛇毒或 116μg(约 2 0LD50 )缅甸蝰蛇毒的攻击 ,使小鼠全部存活 .结论 新型抗蝰蛇毒血清对国产圆斑蝰蛇毒及缅甸蝰蛇毒的中和抗体效价均较高 ,有较大的应用价值 .

改良蝰蛇毒磷脂时间试验和硅凝固时间试验检测狼疮抗凝物的性能验证

目的对基于2种不同原理的狼疮抗凝物(LA)检测方法,即改良蝰蛇毒磷脂时间(dRVVT)试验和硅凝固时间(SCT)试验进行全面的方法学评估,以期为临床实验室选择LA检测方法提供参考依据。方法计数50例乏血小板血浆(PPP)血小板(PLT)数量,验证现有离心条件是否满足要求。按照美国临床实验室标准化协会文件及我国《临床血液学检验常规项目分析质量要求》(WS/T406-2012)文件,对2种LA检测方法的精密度、携带污染率、方法学比对进行全面评估,并建立了不同方法检测LA的参考范围(RI)/临界值(Cut-off)。结果 50例PPP的PLT计数为(0~9)×10~9/L,满足指南<10×10~9/L的要求。dRVVT试验和SCT试验3个结果表达方式的批内精密度均<2.50%。dRVVT试验批间精密度为2.76%~3.53%,SCT试验批间精密度为6.23%~7.02%。标准化比值(NR)的批间精密度<其他2种结果表达方式。所有检测方法携带污染率绝对值<3.00%。dRVVT NR计算所得RI/Cut-off值为1.24,高于试剂说明书数据(1.20);SCT NR计算所得RI/Cut-off值为1.16,与说明书中一致。不同仪器同种方法和相同仪器不同方法之间比对数据相关性良好(r>0.900)。同一仪器2种检测方法NR之间(P=0.248)和2种方法阴阳性判断之间差异均无统计学意义(P=0.068)。结论基于不同原理的dRVVT试验和SCT试验均有良好的检测性能,各实验室建立或验证了适合本实验室的RI/Cut-off值后,适用于LA的临床常规检测。

蝰蛇毒磷脂时间法测定血浆低分子肝素含量及其临床应用

用试管法和仪器法研究了蝰蛇毒磷脂时间（Russellvipervenumcoagulationtest,RVVCT）与血浆低分子肝素（lowmolecularweightheparin,LMWH）含量之间的关系。采用的实验条件为：蝰蛇毒100μl；脑磷脂（1：1000稀释）10μl；氯化钙（0．025mol／L）10μl；37℃水浴时间（仪器法为直接温浴时间）1．5min。上述条件下，血浆LMWH含量与凝固时间成良好的线性关系（直线回归γ＝0．96～0．99），批内变异系数0．6％～1．9％，批间变异系数1．7％～2．6％。尚建立了对倍稀释血浆LMWH的检测方法，扩大了检测范围，低分子肝素的最高检测限为2．0AXaIU／ml。使用上述方法对接受血液透析的患者和不稳定性心绞痛患者进行了血药浓度的观察。发现一次静脉注射低分子肝素100AXaIU／kg即能满足血透的抗凝要求。皮下给药每日一次150AXaIU／kg，三次可达到稳态血药浓度，长期给药时可固定剂量，基本不需调节剂量给药。

沙蝰蛇毒磷脂酶A_2分子进化特征的研究

目的 :了解沙蝰蛇毒 PL A2 分子在进化过程中的特点 ,特别是基因水平上的特点。方法 :采用不加权成对群算术平均法( UPGMA)构建来自沙蝰蛇毒的 5种 PL A2 的分子进化树 ;将 PL A2 c DNA顺序中编码区内的碱基进行两两比较 ,统计和分析编码氨基酸密码的三个碱基不同位置的取代数及同义取代 ( S)和非同义取代 ( N )数目 ;并分别统计和分析这些 PL A2 的二联碱基胞嘧啶 -鸟嘌呤 ( Cp G)和鸟嘌呤 -胞嘧啶 ( Gp C)的数目及分布情况。结果 :1成功地构建了与 PL A2 性质、功能和彼此间关系相符的分子进化树 ;2碱基取代以第 、 位为多 ,同义取代的数目也远低于非同义取代的数目 ,S/ N远小于 1;3编码区内的二联碱基顺序 Cp G出现的频率非同寻常的高 ,Gp C/ Cp G之比为 1.12～ 1.2 5。非编码区内 Cp G则明显受到压抑而数目很少。结论 :沙蝰蛇毒的 PL A2 基因有加速进化的情况发生 ,可能与其基因中异常高的 Cp

抗蝰蛇毒血清治疗蝰蛇伤临床疗效考察

目的 对国产抗蝰蛇毒血清治疗蝰蛇伤的疗效、治疗剂量、不良反应等进行临床疗效的考察 .方法 蝰蛇伤患者 3 3 5例 ,抗蝰蛇毒血清治疗组 3 2 2例 ,不使用抗蝰蛇毒血清治疗患者 13例 .结果 使用抗蝰蛇毒血清治疗组 ,死亡 7例 (2 2 % ) ,未见不良反应 .没用抗蝰蛇毒血清治疗患者 ,死亡 9例 (69 2 % ) ,结论 抗蝰蛇毒血清是治疗蝰蛇伤的特效。

蝰蛇毒压电免疫传感器固定方法的研究

目的:为研制蝰蛇毒压电免疫传感器,研究抗蛇毒抗体固定于石英晶体银电极表面的固定技术。方法:采用马抗蝰蛇毒血清抗体和抗蝰蛇毒鸡卵黄抗体作为生物敏感材料,对比研究了胱胺自组装-PSS反相吸附法和PEI粘附-戊二醛交联法;比较了采用两种固定方法所制的压电免疫传感器的性能。结果:鸡卵黄抗体采用PEI粘附-戊二醛交联法效果较好,其制备的IgY压电免疫传感器检测蝰蛇毒灵敏度为0.5μg/mL;而马血清抗体用胱胺自组装-PSS反相吸附法较好,其制备的IgG’免疫传感器检测蝰蛇毒灵敏度为10μg/mL。结论:以PEI粘附-戊二醛交联法固定抗蝰蛇毒鸡卵黄抗体所制备的蝰蛇毒压电免疫传感器的性能稳定,特异性好,可实现蛇毒的快速检测。

3种稀释蝰蛇毒磷脂时间试验检测狼疮抗凝物的性能评价

目的对3种稀释蝰蛇毒磷脂时间试验(dRVVT)的狼疮抗凝物(LA)检测方法进行性能评价,比较不同系统间检测结果的一致性,并初步探讨不同检验流程对检测结果的影响。方法按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)文件及临床血液学检测常规项目分析质量文件(WS/T 406—2012),对3种LA检测方法的精密度、携带污染率进行评价,验证3种方法检测LA的参考区间(RI)/cut-off值,并分析检验结果一致性和不同检验流程对检测结果的影响。结果3种dRVVT检测方法重复性以CV表示为0.44%~1.69%;期间精密度以CV表示,为1.43%~2.43%。3种检测方法携带污染率绝对值<3.00%。系统1和2的RI验证通过,系统3验证未通过。3种不同系统筛选试验、确认试验及比值间结果差异有统计学意义(P=0.000)。3种不同系统阴阳性判断结果间差异有统计学意义(χ^2=11.333,P=0.000)。系统3以说明书推荐流程分析结果,与筛选/确认比值(R)或标准化比值(NR)结果表示方式相比,53例阴性结果中2例为假阴性。结论3种dRVVT检测系统性能良好,适于临床常规使用。但各实验室应验证或建立适合本实验室的RI/cut-off值,确定合理的检测流程,关注检测分析前中后影响因素,合理解释检测结果。

稀释蝰蛇毒时间试验与混合试验在狼疮抗凝物检测中的相关性研究

目的:探究狼疮抗凝物检测中稀释蝰蛇毒时间(diluted Russell viper venom time, d RVVT)法与混合试验(Rosner指数)检测结果间的相关性及方法学特点。方法:2015年9月至2019年9月期间,收集在上海交通大学医学院附属瑞金医院就诊的31例凝血功能异常、狼疮抗凝物阳性患者的临床资料,比较d RVVT标准化比值与混合试验(Rosner指数的R1、R2)检测结果间的相关性,进而探究2种方法间的异同。结果:从31例患者dRVVT标准化比值与病人血浆(病浆)活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)值与混合试验的R1、R2的散点图可以看出,d RVVT标准化比值分别与病浆APTT值、R1及R2之间具有较好的相关性。进一步应用Pearson相关性分析得出,dRVVT标准化比值与混合试验检测结果显著相关(相关系数r值为0.54~0.62,P<0.05)。结论:基于共同凝血途径d RVVT法的确证试验与混合试验(基于内源性及共同凝血途径)结果间具有显著相关性,但并非严格的线性相关。2种检测方法在狼疮抗凝物检测中并不可完全替代,因此仍建议将二者相结合进行分析,从而提高狼疮抗凝物的检出率,降低误诊率和漏诊率。

蝰蛇毒压电免疫传感器的研制

采用聚乙烯亚胺（PEI）科学仪黏附、戊二醛（Glu）交联的方法，将抗蝰蛇毒IgY固定于石英晶体表面，制成蝰蛇毒压电免疫传感器。该传感器用于检测浓度范围为0．5～100ug／mL的蝰蛇毒时，呈线性相关，相关系数为0．962，具有良好的选择性。

几种药品抗圆斑蝰蛇毒作用的比较

目的探讨几种药品抗圆斑蝰蛇毒的作用。方法将蝰蛇毒造模后的小鼠随机分组,给予美兰、葛根素、葛根总黄酮和生理盐水于小鼠皮下注射,观察24 h内各组动物各个时间段内的局部症状以及呼吸、食欲、活动等全身症状,以动物的死亡数累计各组的实验结果。结果美兰在规定的4 h内对小鼠的保护率高于葛根总黄酮与葛根素。结论美兰有较强的抗蝰蛇毒作用。

抗蝰蛇毒血清治疗蝰蛇咬伤72例报告

抗蝰蛇毒血清治疗蝰蛇咬伤７２例报告吴远冰广东高明市人民医院５２８５００姚先明，伍侣新广东高明市合水医院５２８５００近１０年我们采用上海生物研究所生产的精制抗蝰蛇毒血清治疗蝰蛇咬伤中毒７２例，收到良好效果，现报告如下。１临床资料１．１一般资料本组７２例...

中国蝰蛇毒试剂对失代偿期肝硬化诊断价值的探讨

对80例失代偿期肝硬化病人进行了蛙蛇毒磷脂时间(RVVCT),中国蕲蛇酶时间(AT)及凝血像检查,发现RVVCT,AT及凝血像均廷长。其中以RVVCT为著,认为RVVCT对肝硬化病人失代偿期有一定的辅助诊断价值。

锯鳞蝰蛇毒显色多肽基质法测定血浆异常凝血酶原

本研究采用锯鳞蝰蛇毒显色多肽基质法（Ｅｃａｒｉｎ法）测定原发性肝癌（ＰＨＣ）、其它肿瘤、慢性肝病及正常对照共１１４例血浆异常凝血酶原（ＤＣＰ）．结果显示：Ｅｃａｒｉｎ法测定血浆ＤＣＰ的批内变异为３．８％、批间变异为４．９％、平均回吸收率为９０．４％，ＤＣＰ诊断ＰＨＣ的敏感性为７２．３％、特异性为９７％、准确性为８６．８％。

蝰蛇毒磷脂时间法测定在低分子量肝素监测中的应用

蝰蛇毒磷脂时间法测定在低分子量肝素监测中的应用毛平陈藩黄婷婷王顺清关明媚黄润永李翠贞我们应用蝰蛇毒特异性抑制因子Ｘａ的原理，对蝰蛇毒含量、磷脂用量及温浴时间进行调整，建立了特异性及敏感性较高、简便易行，适于实验室常规使用的定量测定血浆低分子量肝素（Ｌ...

鲁塞尔蝰蛇毒X对血凝学相关蛋白作用的研究

目的研究鲁塞尔蝰蛇毒 X(Russel viper venomX,RVVX)对凝血相关蛋白的影响。方法将稀释后的蛋白纯品分为对照组和 RVV-X 作用组,同时在有生理性激活剂和无生理性激活剂的情况下,用发色底物法,观察 RVV-X 对凝血因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ及抗凝血酶,纤溶酶原的活化作用。结果 RVV-X 作用组凝血因子Ⅶ、Ⅸ及纤溶酶原使底物显色微弱增强,与对照组(未加RVV-X)比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。凝血因子Ⅹ显色增强明显(P=O.002);抗凝血酶组显色没有变化(P=0.579)。结论 RVV-Ⅹ对凝血因子Ⅶ、Ⅸ及纤溶酶原有弱的激活效果,对于凝血因子Ⅹ是强激活剂,对于抗凝血酶没有激活作用。

蛇毒因子凝血试验变化在肝脏疾病中的诊断价值

目的探讨与评价蛇毒试验在肝病中的诊断价值。方法采用中国蝰蛇毒试剂(CRVVR)及中国蕲蛇毒试剂(CAAE)对100例肝硬化失代偿期病人,60例肝肿瘤病人的凝血象进行检测,并将蝰蛇毒磷脂时间(RVVCT)、蝰蛇毒复钙时间(RVVRT)、蕲蛇毒时间(AT)与传统肝功能指标及凝血试验进行对比。结果蛇毒凝血时间在肝硬化失代偿期及肝肿瘤时明显长于正常对照组(p<0.01),异常检出率高于传统凝血试验,与肝功受损程度呈正相关。肝癌病人中AT延长的阳性率高于AFP。结论蛇毒凝血试验对反应肝损害程度及诊断肝癌具有一定的意义。

蛇毒凝血试验诊断肝病凝血功能障碍的探讨

本文对127例各类肝病和55例正常人进行蕲蛇毒时间(AT)、蝗蛇毒磷脂时间(RVVCT)和蝰蛇毒血小板三因子活性(RVVPF_(3a))三项蛇毒凝血试验的研究。结果显示:AT、RVVCT和RVVPF_(3a)在各类肝病的测得值均显著高于正常人(P<0.001);肝病的异常检出率分别是93%(118/127)、74%(94/127)和81%(103/127),均显著高于凝血酶时间(TT)(63%),凝血酶原时间(PT)(34%)和白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)(35%);三者的测得均值与不同期肝病有正相关关系,肝病越晚期,蛇毒凝血试验时间越延长。认为AT、RVVCT和RVVPF_(3a)能从三个不同侧面去反映肝病凝血功能障碍,其敏感性均优于TT、PT和KPTT,可以作为肝病凝血功能检查的新指标。

莫让抗毒血清用时方恨少

进入夏季以来，对于缺乏抗毒血清导致患者抱憾终身的报道屡见不鲜。大家是否还记得他们：苏州小伙叶某，今年6月7日不幸被蝰蛇咬伤后因找不到抗蝰蛇毒血清，导致多脏器严重衰竭而不治身亡；家住甘肃皋兰的11岁男孩，今年9月9日在放羊时不慎被蛇咬伤脚，却被医院告知没有抗蛇毒血清，从网友发微博寻找抗蛇毒血清，