改良蝰蛇毒磷脂时间试验和硅凝固时间试验检测狼疮抗凝物的性能验证

目的对基于2种不同原理的狼疮抗凝物(LA)检测方法,即改良蝰蛇毒磷脂时间(dRVVT)试验和硅凝固时间(SCT)试验进行全面的方法学评估,以期为临床实验室选择LA检测方法提供参考依据。方法计数50例乏血小板血浆(PPP)血小板(PLT)数量,验证现有离心条件是否满足要求。按照美国临床实验室标准化协会文件及我国《临床血液学检验常规项目分析质量要求》(WS/T406-2012)文件,对2种LA检测方法的精密度、携带污染率、方法学比对进行全面评估,并建立了不同方法检测LA的参考范围(RI)/临界值(Cut-off)。结果 50例PPP的PLT计数为(0~9)×10~9/L,满足指南<10×10~9/L的要求。dRVVT试验和SCT试验3个结果表达方式的批内精密度均<2.50%。dRVVT试验批间精密度为2.76%~3.53%,SCT试验批间精密度为6.23%~7.02%。标准化比值(NR)的批间精密度<其他2种结果表达方式。所有检测方法携带污染率绝对值<3.00%。dRVVT NR计算所得RI/Cut-off值为1.24,高于试剂说明书数据(1.20);SCT NR计算所得RI/Cut-off值为1.16,与说明书中一致。不同仪器同种方法和相同仪器不同方法之间比对数据相关性良好(r>0.900)。同一仪器2种检测方法NR之间(P=0.248)和2种方法阴阳性判断之间差异均无统计学意义(P=0.068)。结论基于不同原理的dRVVT试验和SCT试验均有良好的检测性能,各实验室建立或验证了适合本实验室的RI/Cut-off值后,适用于LA的临床常规检测。

蝰蛇毒磷脂时间法测定血浆低分子肝素含量及其临床应用

用试管法和仪器法研究了蝰蛇毒磷脂时间（Russellvipervenumcoagulationtest,RVVCT）与血浆低分子肝素（lowmolecularweightheparin,LMWH）含量之间的关系。采用的实验条件为：蝰蛇毒100μl；脑磷脂（1：1000稀释）10μl；氯化钙（0．025mol／L）10μl；37℃水浴时间（仪器法为直接温浴时间）1．5min。上述条件下，血浆LMWH含量与凝固时间成良好的线性关系（直线回归γ＝0．96～0．99），批内变异系数0．6％～1．9％，批间变异系数1．7％～2．6％。尚建立了对倍稀释血浆LMWH的检测方法，扩大了检测范围，低分子肝素的最高检测限为2．0AXaIU／ml。使用上述方法对接受血液透析的患者和不稳定性心绞痛患者进行了血药浓度的观察。发现一次静脉注射低分子肝素100AXaIU／kg即能满足血透的抗凝要求。皮下给药每日一次150AXaIU／kg，三次可达到稳态血药浓度，长期给药时可固定剂量，基本不需调节剂量给药。

3种稀释蝰蛇毒磷脂时间试验检测狼疮抗凝物的性能评价

目的对3种稀释蝰蛇毒磷脂时间试验(dRVVT)的狼疮抗凝物(LA)检测方法进行性能评价,比较不同系统间检测结果的一致性,并初步探讨不同检验流程对检测结果的影响。方法按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)文件及临床血液学检测常规项目分析质量文件(WS/T 406—2012),对3种LA检测方法的精密度、携带污染率进行评价,验证3种方法检测LA的参考区间(RI)/cut-off值,并分析检验结果一致性和不同检验流程对检测结果的影响。结果3种dRVVT检测方法重复性以CV表示为0.44%~1.69%;期间精密度以CV表示,为1.43%~2.43%。3种检测方法携带污染率绝对值<3.00%。系统1和2的RI验证通过,系统3验证未通过。3种不同系统筛选试验、确认试验及比值间结果差异有统计学意义(P=0.000)。3种不同系统阴阳性判断结果间差异有统计学意义(χ^2=11.333,P=0.000)。系统3以说明书推荐流程分析结果,与筛选/确认比值(R)或标准化比值(NR)结果表示方式相比,53例阴性结果中2例为假阴性。结论3种dRVVT检测系统性能良好,适于临床常规使用。但各实验室应验证或建立适合本实验室的RI/cut-off值,确定合理的检测流程,关注检测分析前中后影响因素,合理解释检测结果。

蛇毒因子凝血试验变化在肝脏疾病中的诊断价值

目的探讨与评价蛇毒试验在肝病中的诊断价值。方法采用中国蝰蛇毒试剂(CRVVR)及中国蕲蛇毒试剂(CAAE)对100例肝硬化失代偿期病人,60例肝肿瘤病人的凝血象进行检测,并将蝰蛇毒磷脂时间(RVVCT)、蝰蛇毒复钙时间(RVVRT)、蕲蛇毒时间(AT)与传统肝功能指标及凝血试验进行对比。结果蛇毒凝血时间在肝硬化失代偿期及肝肿瘤时明显长于正常对照组(p<0.01),异常检出率高于传统凝血试验,与肝功受损程度呈正相关。肝癌病人中AT延长的阳性率高于AFP。结论蛇毒凝血试验对反应肝损害程度及诊断肝癌具有一定的意义。

不同狼疮抗凝物检测试验的临床诊断效能研究

目的 研究不同狼疮抗凝物（LA）试验的临床诊断效能,为临床提供有价值的LA指标.方法 370份柠檬酸盐抗凝样本来自2014年9月至2015年3月就诊于北京协和医院的患者或体检者,分别通过改良蝰蛇毒磷脂时间法（dRVVT）、硅凝固时间法（SCT）、活化部分凝血活酶时间法APTT-Actin、APTT-Actin FSL和APTT-SS共5种方法及相应的1∶1混合试验、确证试验检测LA.由此推算每种方法1∶1混合试验计算值循环抗凝指数（ICA）、确证试验计算值纠正百分比（C）和标准化比值（NR）的参考范围（RI）/Cut-off值,进而研究每种方法决定的LA的临床诊断效能.结果 不同试验方法LA的RI/Cut-off值不同,dRVVT法的敏感度最高（70.3％ ～93.1％）,APTT法最低（＜55.0％）.APTT-SS法的敏感度（47.5％～53.5％）略高于APTT Actin法（32.7％～39.6％）和APTT-Actin FSL法（29.7％ ～36.6％）.dRVVT法的特异度为91％ ～ 100％,SCT法为80.6％～100％,APTT法为85.1％ ～98.5％.其中,SCT法确证试验的特异度均为100％.针对弱阳性LA结果,5种方法的敏感度均下降,但dRVVT法和SCT法的敏感度仍＞50.0％,APTT-Actin法和APTT-Actin FSL法＜16.0％.除APTT-SS法外,dRVVT法及SCT法的组合方案检测的LA与APS血栓形成均具有相关性（OR值：5.562 ～9.240,均P＜0.05）.结论 实验室应根据LA具体试验方法建立RI/Cut-off值.dRVVT法是LA的最佳检测方法,与指南说明一致.APTT-SS法优于其他APTT法,dRVVT法及SCT法的组合方案检测的LA均与APS血栓形成相关。