非小细胞肺癌中不同ROS1融合伴侣对克唑替尼敏感性的研究现状分析

c-ros致癌基因1(ROS1)重排(融合)已被广泛证实是非小细胞肺癌(NSCLC)发生的驱动因素,众多临床研究和临床实践结果证实克唑替尼显示出持久的临床获益。克唑替尼在中国已经纳入医保,是中国ROS1重排阳性NSCLC患者一线治疗的首选药物。目前在NSCLC中至少发现了24种基因可作为ROS1的融合伴侣,不同ROS1融合突变的患者使用克唑替尼的疗效差异巨大,融合伴侣的种类可能是其重要的影响因素。目前很少有研究探讨不同融合伴侣与克唑替尼疗效的相关性。本文通过检索PubMed、ScienceDirect等文献数据库及TCGA、COSMIC和My Cancer Genome等肿瘤基因突变公共数据库,对克唑替尼治疗不同ROS1融合伴侣患者的现有研究成果和数据作一综述性分析,旨在为克唑替尼治疗不同ROS1融合伴侣NSCLC的预后判断提供依据。

鸡贫血病毒凋亡素基因的可溶性融合表达及抗肿瘤活性分析

为获得高效可溶表达的鸡贫血病毒凋亡素基因(CAV-Apoptin),根据大肠杆菌密码子偏爱性优化CAV-Apoptin基因序列,将其连接到含msyB伴侣基因的pBCX载体上,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,经SDS-PAGE鉴定后应用镍柱亲和层析纯化蛋白质,采用显微镜观察、CCK-8实验与DNA ladders测定其抗肿瘤细胞的活性。结果显示,成功构建大肠杆菌表达载体pBCX-CAV-Apoptin,在37℃正常培养条件下的大肠杆菌中得到大量可溶性表达产物,融合蛋白质分子量大小约为42 kDa,50 ml菌液即可获得1.5 mg左右的纯化重组蛋白,CCK-8实验结果显示纯化后的重组蛋白作用36 h后可对套氏淋巴瘤JEKO-1、REC-1细胞生长产生超过60%的抑制率;显微镜观察与DNA ladder实验证明重组蛋白可诱导JEKO-1、REC-1细胞的凋亡,对HUVEC没有诱导凋亡的作用。免疫印迹分析表明重组凋亡素对JEKO-1细胞诱导了Caspase-3的激活,而对Caspase-8的表达没有影响。研究表明融合蛋白msyB-CAV-Apoptin可达到高效可溶表达,且表达产物具有特异抗肿瘤活性。