融合蛋白IL6/IL2在髓系-NK起始细胞(ML-IC)分析体系中对NK细胞分化、增殖的影响

目的建立完善的造血干细胞体外培养及分析体系，用来研究比长期培养起始细胞（ＬＴＣ－ＩＣ）更为原始的造血干祖细胞。在此基础上，研究更适合于ＮＫ细胞的分化、培养介质。方法构建并表达ＦＰＩＬ６／ＩＬ２，采用髓系－ＮＫ起始细胞体外培养、分析体系，通过观察培养后单细胞是否能同时向髓系及ＮＫ细胞分化，来判断此单细胞是否为髓系－ＮＫ起始细胞，即髓系－淋系起始细胞（ｍｙｅｌｏｉｄ－ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ ｃｅｌｌ，ＭＬ －ＩＣ）。髓系检测指标是以祖细胞造血集落形成（ＣＦＣ）法检测ＬＴＣ－ＩＣ。ＮＫ细胞的检测指标是以ＦＡＣＳ法检测ＣＤ５６＋ ＮＫ细胞集落。通过观察培养后ＮＫ细胞集落数目的变化，研究ＦＰＩＬ６／ＩＬ２对ＮＫ－ＩＣ分化、增殖的影响。结果经过起始４周的培养后，实验组中（２５．７５±５．６８）％的细胞能够在一个或更多的二级培养体系中产生功能性ＮＫ－ＩＣ细胞，而对照组为（６．８１±１．９７）％，经过６～７周的培养后，实验组共检测出１０２个ＮＫ－ＩＣ细胞，而对照组为３３个，实验组较对照组明显扩增。结论髓系－ＮＫ起始细胞体外培养、分析体系能同时定量及定性研究造血干细胞的分化及增殖。ＦＰＩＬ６／ＩＬ２能明显促进?

黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用及血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)、cAMP和脑组织NF-κB表达的影响

目的:观察黄芩苷对干酵母致热大鼠的解热作用并探讨其作用机制。方法:采用背部皮下注射干酵母构建大鼠发热模型,SD雄性大鼠随机分为正常对照,模型组,阳性组(阿司匹林,0.1 g/kg),黄芩苷高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg),连续给药3 d,测定各组大鼠肛温的变化;酶联免疫法(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))与环磷酸腺苷(cAMP)水平;Western Blot检测各组大鼠脑组织NF-κB p65(核转录因子-κB p65)蛋白表达。结果:黄芩苷高剂量组有显著解热效果(P<0.01),黄芩苷各剂量组均可不同程度降低大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE 2和cAMP含量;与正常组比较,模型组脑组织NF-κB p65蛋白表达增多,黄芩苷高剂量组可明显降低大鼠脑组织NF-κB p65表达(P<0.05)。结论:黄芩苷可显著性降低干酵母引起的体温升高,解热机制可能与抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE_(2)与cAMP的分泌和减少脑组织NF-κB p65蛋白表达有关。

基于IL-6/JAK2/STAT3信号轴研究阳和平喘颗粒调控哮喘大鼠气道重塑作用机制

目的:研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及白细胞介素-6(IL-6)/Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号轴在其中的作用机制。方法:选取健康雄性SD大鼠42只,随机数字法分为正常对照组7只与造模组35只,造模组采用卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝腹腔注射2周的方式进行致敏,正常对照组采用等量的生理盐水;2周后将造模组随机分为模型组、阳和平喘高、中、低剂量组和地塞米松组,每组7只;后4周采用OVA雾化+灌胃的方式进行激发和治疗,阳和平喘高中低组每日分别予以15.48、7.74、3.87 g/kg阳和平喘颗粒灌胃,地塞米松组予以0.0625 mg/kg地塞米松进行灌胃,其余组灌胃等量生理盐水。HE、PAS、Masson染色观察大鼠肺组织病理学变化;ELISA检测大鼠血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平;Western blot检测肺组织中JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白表达量;qRT-PCR检测大鼠肺组织中IL-6、JAK2、STAT3的mRNA水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肺组织有大量炎性细胞浸润,杯状细胞增生、上皮下胶原纤维沉积、气道上皮增厚较为明显;血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平显著升高(P<0.01),肺组织JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3的蛋白表达量和IL-6、JAK2、STAT3的mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组炎性细胞浸润、杯状细胞增生、上皮下胶原纤维沉积、气道上皮增厚程度明显减轻,血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平显著降低(P<0.01),肺组织JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3的蛋白表达量和IL-6、JAK2、STAT3的mRNA水平显著降低(P<0.01)。结论:阳和平喘颗粒可明显缓解哮喘大鼠气道重塑,其机制可能是通过抑制IL-6/JAK2/STAT3信号轴发挥作用。

基于IL-6/JAK2/STAT3信号通路探讨灰树花提取物对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织炎症反应的影响

目的:探讨灰树花提取物通过调控白细胞介素6(IL-6)/蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和激活因子3(STAT3)信号通路,对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织炎症反应的影响及作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白对照组、UC模型组、灰树花治疗组、西药治疗组、联合治疗组,每组8只。采用3%DSS自由饮用法7 d建立UC大鼠模型后,治疗组分别灌胃灰树花提取物10 mg/(kg·d)、柳氮磺吡啶0.3 g/(kg·d)及等量两种药物,连续14 d。实验期间观察大鼠一般状态,计算疾病活动指数(DAI)评分;采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理改变;Western blot检测大鼠结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、pSTAT3蛋白表达水平;ELISA检测大鼠血清中IL-6含量;免疫组化法测定大鼠结肠组织中IL-6R、MPO蛋白含量及表达情况。结果:与空白对照组比较,UC模型组大鼠一般状态欠佳,DAI评分升高,HE染色可见明显的组织黏膜损伤与炎症细胞浸润;结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平及IL-6R、MPO含量均显著升高(P<0.01);血清中IL-6含量显著升高(P<0.01),差异有统计学意义。与UC模型组比较,各治疗组大鼠的一般状态均有所改善,DAI评分降低,HE染色可见黏膜损伤有不同程度改善,偶见炎症细胞浸润;结肠组织IL-6、JAK2、STAT3、p-STAT3蛋白表达水平显著降低(P<0.01),结肠组织IL-6R和MPO含量及血清中IL-6含量均明显减少(P<0.01或P<0.05),差异有统计学意义。结论:灰树花提取物可通过调控IL-6/JAK2/STAT3信号通路相关因子表达,减轻UC大鼠结肠组织炎症反应。

基于IL-6/STAT3和IL-2/STAT5信号通路探讨伏九贴敷药物调控Th17/Treg免疫平衡的抗哮喘作用机制

目的考察伏九贴敷药物(白芥子、甘遂、延胡索、细辛组成)通过IL-6/信号转导器和转录激活因子3(STAT3)、IL-2/信号转导器和转录激活因子5(STAT5)信号通路对哮喘大鼠CD4+T辅助细胞17(Th17)/CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)平衡的调节作用,揭示其抗哮喘的作用机制。方法采用卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝混合液致敏激发造模,然后于大鼠大椎穴、肺俞穴和肾俞穴敷上伏九贴敷药物,每次贴敷4 h,隔日1次,共给药7次。采用免疫组化检测肺组织Th17特异细胞因子IL-17、Treg转录因子Foxp3的阳性表达;流式细胞术检测外周血中Th17、Treg细胞比例;免疫蛋白印迹法检测肺组织IL-6/STAT3和IL-2/STAT5通路相关蛋白的表达。结果与模型组比较,伏九贴敷组大鼠肺中IL-17的阳性表达量明显减少(P<0.01),Foxp3的阳性表达明显增加(P<0.05);同时IL-6蛋白和STAT3磷酸化蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而IL-2蛋白和STAT5磷酸化蛋白表达水平明显升高(P<0.01),但总STAT3和STAT5蛋白表达均没有明显变化(P>0.05)。此外,伏九贴敷组大鼠外周血中Th17细胞比例低于模型组,而Treg细胞比例高于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论哮喘大鼠存在Th17/Treg免疫失衡,伏九贴敷药物可通过抑制哮喘大鼠IL-6表达,下调磷酸化STAT3的表达,降低产生IL-17的Th17细胞水平;同时增加IL-2表达,介导STAT5磷酸化,升高表达Foxp3的Treg细胞水平,促进Th17/Treg趋于平衡,抑制大鼠哮喘免疫应答,从而发挥抗哮喘效应。

IL-6通过调控JAK2/STAT3信号通路减轻急性肺损伤的机制研究

目的探讨IL-6通过调控酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)信号通路减轻急性肺损伤(ALI)的机制。方法将人肺癌细胞A549细胞分为空白对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+IL-6过表达组、LPS+IL-6干扰组、LPS+空载组。空白对照组细胞正常培养,LPS组LPS处理细胞,LPS+IL-6过表达组LPS处理细胞后转染IL-6过表达质粒,LPS+IL-6干扰组LPS处理细胞后转染IL-6干扰质粒,LPS+空载组LPS处理细胞后转染空载质粒。采用细胞计数试剂盒法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,ELISA法检测炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平,qRT-PCR法检测IL-6、JAK2、STAT3 mRNA表达水平,Western blot法检测磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,过表达IL-6可增加LPS诱导的ALI细胞凋亡率、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,JAK2、STAT3 mRNA表达水平,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达水平,降低细胞增殖率和SOD水平;干扰IL-6则相反。结论IL-6可通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活,降低氧化应激和炎症反应,从而减轻ALI。

瑞芬太尼复合麻醉对腹腔镜下胆囊切除患者血清IL⁃6、IL⁃2及T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨瑞芬太尼复合麻醉对腹腔镜下胆囊切除(LC)患者血清IL⁃6、IL⁃2及T淋巴细胞亚群的影响。方法选取无为市人民医院2019年10月至2023年7月收治的122例行LC治疗患者为研究对象,根据麻醉药物不同分为对照组(n=59,七氟烷+丙泊酚复合麻醉)和观察组(n=63,瑞芬太尼+丙泊酚复合麻醉)。比较两组麻醉恢复情况、血清IL⁃6、IL⁃2水平、T淋巴细胞亚群变化及不良反应。结果观察组术后苏醒时间、自主呼吸恢复时间和导管拔除时间均短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组T0时IL⁃6、IL⁃2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);T_(1)(术后6小时)、T_(2)(术后12小时)、T_(3)(术后24小时)时,观察组IL⁃6水平低于对照组,IL⁃2水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组T0时CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)比较,差异无统计学意义(P>0.05);在T_(1)、T_(2)、T_(3)时比较,观察组CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)高于对照组,CD_(8)^(+)高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与七氟烷复合麻醉比较,瑞芬太尼复合麻醉对LC患者血清IL⁃6、IL⁃2水平及免疫系统的影响较小,可加快术后患者清醒和麻醉恢复,安全性尚可。

IL－2和IL－6融合蛋白的分子生物学特性的研究

本文应用酶联免疫吸附技术对ＩＬ－６／２融合蛋白（ＦＰＩＬ－６／２）进行了定性、定量分析，测定其等电点，并对该蛋白的表位、柔性和抗原性进行了计算机模拟。ＥＬＩＳＡ测试结果表明：融合蛋白ＩＬ－６／２含有ＩＬ－２和ＩＬ－６两个结构域，可分别与ＩＬ－２和ＩＬ－６单克隆抗体结合，且两个结合无明显空间排阻效应，这与计算机的表位、柔性和抗原性分析结果一致。从计算机模拟也可以看出ＦＰＩＬ－６／２的抗原性与ＩＬ－２和ＩＬ－６的一致性，而且接头区抗原性较低，这为该蛋白的实际临床应用提供了一定的保证。

融合蛋白pIL6-IL2在E.coli中的表达及活性鉴定

白细胞介素 2 (interleukin 2 ,IL 2 )与白细胞介素 6(interleukin 6,IL 6)能分别刺激T淋巴细胞增殖与B淋巴细胞分泌免疫球蛋白 ,从而促进动物机体的细胞免疫与体液免疫 ;另外IL2与IL6在发挥生物学活性时还有相互协同作用。因此 ,将去除信号肽的猪白细胞介素 6(pIL 6)与猪白细胞介素 2 (pIL 2 )cDNAs序列通过一段Linker相连 ,克隆到E .coli表达载体pPET 2 8a中。该融合蛋白IL6 IL2在E .coli表达菌BL2 1 (DE3)中获得成功表达 ,SDS PAGE分析分子量约为40kDa ,表达量达到总菌体的 66.2 6%。用IL6依赖的B9细胞与IL2依赖的CTLL细胞增殖试验进行融合蛋白IL6 IL2的生物活性检测 ,其活性可分别达到 0 8× 1 0 3 U mg和 6 4× 1 0 3 U mg。

新型重组IL6D24PE40KDEL外毒素融合蛋白的理化分析

为了对构建成功的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白的部分物化表征进行分析鉴定 ,采用Edman法、SDS PAGE法、胰蛋白酶消化的MALDI TOF MS质谱法、蛋白印迹法和MTT法分别测定该融合蛋白的N 末端 6个氨基酸、相对分子量、肽谱、抗原特异性以及靶向杀伤生物学活性。结果表明 :所构建表达纯化的新型重组IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白N末端 6个氨基酸序列为Met Ile Asp Lys Gln Ile ,而IL 6缺失 2 4个氨基酸后的原序列为Ile Asp Lys Gln Ile ,由于采用了大肠杆菌表达系统 ,因此在N末端第 1位多出了 1个Met,经12 %SDS PAGE蛋白电泳和凝胶成像系统分析计算 ,其相对分子量为 5 8.75kD ,与理论值 5 6.9kD相比误差在5 %之内。MALTI TOF MS质谱测定共获得 10个与理论预测值相符的肽段 ,经瑞士生物信息研究所的EXPASY分子生物服务网站的Peptident数据库搜索证明 ,在分子量为 5 7kD左右的范围内未检索到与上述条件相符的已知蛋白 ,证明本融合蛋白为全新蛋白 ,与预测的目的蛋白相符。WB实验显示IL6D2 4 PE4 0KDEL外毒素融合蛋白能与IL 6及PEA抗体特异性结合。MTT生物活性测定表明 ,该融合蛋白对表达IL 6R的多发性骨髓瘤细胞系U2 66产生特异性杀伤 ,而对不表达IL6R的CEM淋巴细胞系无任何杀伤。结论

新型重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的表达优化及下游纯化

目的优化提高重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白在原核细胞中的表达量,并建立有效的下游纯化路线。方法对IL6D24-PE40KDEL的受体菌、菌体生长状态及诱导表达时间等进行优化,经反复筛选确定了高效简捷的纯化路线:即将Q型强离子交换树脂与DEAE弱离子交换树脂相结合的两步纯化法。结果宿主工程菌HB101的优化表达条件为2%接种量,30℃培养3h,42℃再诱导4h,可使目标蛋白的表达量由最初的13.5%提高到23.8%;经12%SDS-PAGE蛋白电泳证实,特异性表达产物为包涵体形式,占包涵体蛋白的40%,分子量约为60kD,与所预测的IL6D24-PE40KDEL融合蛋白的分子量相吻合。两步纯化法可获得纯度>95%的IL6D24-PE40KDEL融合蛋白,纯化蛋白的回收率为8.7%,经Western-blot实验证明,它可同PEA多抗和IL6单抗特异性的结合。MTT试验检测证实,该融合蛋白能特异性的杀伤高表达IL6R的U266多发性骨髓瘤细胞,ID50为180ng/ml;而对IL6R的T淋巴白血病细胞CEM则无杀伤,ID50>1000ng/ml。结论获得了高表达重组IL6D24-PE40KDEL外毒素融合蛋白的菌株并建立了高效简捷的下游纯化路线,融合蛋白能特异性的杀伤表达IL6R的多发性骨髓瘤细胞系U266。

重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化

克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达。发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30％～50％。发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式。表达蛋白占菌体总蛋白的30％左右。菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70％,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95％以上。IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105 U/mg。重组人IL-6,/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达。

重组人IL6／2融合蛋白对6．5Gy照射小鼠造血功能恢复的影响

观察了ｈＦＰＩＬ６／２对６．５Ｇｙγ线照射ＮＩＨ小鼠第１０天造血功能恢复的影响。结果表明：照射小鼠连续４ｄ给予ｈＦＰＩＬ６／２２５０μｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，其脾重、ＣＦＵ－８、骨髓有核细胞数及ＣＭ－ＣＦＵ分别比对照组增加５９．０％、２７８．５％、５７．９％和１３８．２％，统计学处理均有显著差异；对此四项指标的改善也明显优于２５μｇ组。另外，２５０μｇ剂量组小鼠外周血象３０ｄ的动态观察结果表明，ｈＦＰＩＬ６／２不但能明显提高红细胞和血红蛋白的最低值，而且能使血小板的恢复提前。提示ｈＦＰＩＬ６／２在促进血小板生成和促进红系造血方面可能具有良好的应用前景。

血清IL⁃1β、sE⁃cad、E2结合乳腺超声在浆细胞性乳腺炎与乳腺癌鉴别诊断中的意义

目的探讨血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)结合乳腺超声在浆细胞性乳腺炎与乳腺癌鉴别诊断中的意义。方法选取2020年4月至2023年11月间德阳市人民医院乳腺科首次入院且未经治疗的住院患者为研究对象,基于乳腺彩超BI⁃RADS分类标准,筛选出BI⁃RADS 4类及以上的患者,并进一步依据其乳腺癌(BC)术后病理学诊断报告,确认105例BC患者,并归为BC组。同时,随机抽取乳腺彩超BI⁃RADS 3类及以下、诊断为浆细胞性乳腺炎(PCM)的患者95例,归为PCM组。所有研究对象均行乳腺超声检查。比较两组血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)水平、乳腺超声形态学表现及参数;绘制ROC曲线,分析血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)结合乳腺超声在BC与PCM鉴别诊断中的价值。结果BC组血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)水平、V max、RI及PI显著高于PCM组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组位置、大小、边缘特征、有无微钙化、有无后方衰减、有无侧方声影及纵横比比较,差异有统计学意义(P<0.05);而两组边界清晰度、内部回声状态比较,差异无统计学意义(P>0.05)。血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)结合乳腺超声在BC与PCM鉴别诊断中的AUC(95%CI)、灵敏度及特异度分别为0.933(0.863⁃0.966)、94.26%、91.77%;显著高于血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)、乳腺超声单一诊断(P<0.05)。结论血清IL⁃1β、sE⁃cad、E_(2)结合乳腺超声可显著提高BC与PCM的鉴别诊断准确性,有助于临床早期发现与精确治疗,对优化患者管理和提高治疗效果具有重要意义。

VEGF/Akt信号通路在骨折大鼠愈合中作用机制及对炎症因子IL-6、TNF-α的影响

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)/蛋白激酶B(Akt)信号通路在骨折大鼠愈合中的作用机制及对炎症因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的影响。方法 选取健康清洁级SD雄性大鼠30只,按随机原则分为假手术组、模型组与对照组,每组10只。其中假手术组行假手术,模型组与对照组建立大鼠股骨骨折模型,对照组通过尾静脉注射经慢病毒转染高表达VEGF的骨髓间充质干细胞处理。4 w后通过四点断裂实验分析愈合后股骨的力学参数,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠血清中成骨标记物骨源性碱性磷酸酶(BALP)、IL-6与TNF-α水平,通过苏木素-伊红(HE)染色观察股骨标本病理学变化,通过RT-聚合酶链反应(PCR)检测VEGF与p-Akt水平,通过Western印迹检测骨痂组织中p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、IL-6、TNF-α蛋白水平。结果 对照组骨折部位承受的最大力及韧性均显著高于模型组(P<0.05)。对照组外周血中BALP水平显著高于模型组,IL-6与TNF-α水平显著低于模型组(P<0.05)。与模型组相比,对照组骨折部位能观察到广泛的新骨生成,且骨组织中VEGF、p-Akt mRNA水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,对照组骨痂组织中eNOS与p-Akt蛋白表达显著上调,IL-6与TNF-α蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论 激活VEGF/Akt信号通路能促进骨折大鼠的愈合,且能够抑制炎症反应。

外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6在冠心病慢性心力衰竭合并肺部感染患者中的表达及意义

目的分析外周血microRNA-21(miR-21)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)、降钙素原(PCT)及白介素-6(IL-6)在冠心病慢性心力衰竭(CHF)合并肺部感染(PI)患者中的表达及意义。方法选取2020年2月至2023年3月秦皇岛市第二医院收治的冠心病慢性心力衰竭患者121例为研究对象,根据是否发生PI分为CHF合并PI组37例与CHF无PI组84例。比较两组一般资料及外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平,采用Logistic分析影响冠心病慢性心力衰竭合并肺部感染发生的危险因素;采用Pearson相关性分析外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平与临床肺部感染评分(CPIS)、序贯器官衰竭评分(SOFA)的相关性;分析CHF合并PI组病原菌情况,对比不同病原菌外周血miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平。结果两组性别、年龄、CHF病程、吸烟史、饮酒史、中性粒细胞百分比、肌酸激酶、心肌型肌酸激酶同工酶比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组白细胞计数、CPIS、SOFA评分、miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。多元Logistic回归分析结果显示,白细胞计数、CPIS、SOFA评分、miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平升高均是影响冠心病CHF合并PI发生的危险因素(P<0.05)。miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平均与CPIS、SOFA评分呈正相关(P<0.05)。37例CHF合并PI患者痰液标本检出48株病原菌,其中34株革兰阴性菌,12株革兰阳性菌,2株真菌。miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平:革兰阴性菌>革兰阳性菌>真菌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平在冠心病CHF合并PI患者中呈上升趋势,且与PI病情程度、病原菌类型相关,早期检测miR-21、MIP-2、PCT及IL-6水平对于冠心病CHF合并PI患者的诊断、病情及鉴别病原菌类型具有重要价值。

粪钙卫蛋白、IL6、IgA联合检测在溃疡性结肠炎诊疗中的价值

目的本研究拟从炎症状态、细胞免疫、体液免疫水平,探讨粪钙卫蛋白(Fecal Calprotectin,FC)、IL6、IgG、IgA、T淋巴细胞亚群检测在溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)诊疗中的价值。方法选取2019年12月至2022年12月江西中医药大学附属医院肛肠科溃疡性结肠炎确诊病例103例,其中UC活动组46例,UC缓解组57例;另选同期正常对照组50例。检测FC、IL6、IgG、IgA、T淋巴细胞亚群,比较各组检测指标之间的差异及相关性,Logistic回归分析各检测指标与疾病进展的影响,ROC曲线分析各检测指标的疗效价值。结果UC对照组、UC缓解组、UC活动组比较,3组间年龄及性别差异无统计学意义(P>0.05);UC活动组中FC、IL6、IgA、CD3^(+)CD4^(+)(%)、CD3^(+)CD8^(+)(%)水平与UC缓解组、对照组差异有统计学意义(P<0.05),UC缓解组与对照组中仅FC比较差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析发现FC、IL6、IgA是溃疡性结肠炎进展的独立影响因素;比较活动组与缓解组ROC曲线发现,FC与IgG、CD3^(+)CD4^(+)(%)、CD3^(+)CD8^(+)(%)之间AUC比较差异有统计学意义(P<0.05),其余各指标间差异无统计学意义(P>0.05),选取FC、IL6、IgA联合检测,发现诊疗价值明显提升,除FC外,FC^(+)、IL6^(+)、IgA与IL6、IgG、IgA、CD3^(+)CD4^(+)(%)、CD3^(+)CD8^(+)(%)相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论粪钙卫蛋白在溃疡性结肠炎的诊断和评估中具有较好的价值,FC联合IgA、IL6三项同时检测,能有效评估溃疡性结肠炎的进展程度,有助于该疾病的早期干预和预防。

IL2－GMCSF融合蛋白高效表达条件的初步研究

已构建好的白细胞介素２－粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ２－ＧＭＣＳＦ）融合基因载体，转化大肠杆菌ＤＨ５α，进行热诱导表达条件的研究。工程菌在３０℃培养活化至ＯＤ６００ｎｍ＝０．５±０．１时，融合蛋白的表达率最为稳定；而后转为４２℃热诱导４±０．５ｈ，蛋白表达效率最高。

香砂六君子汤对萎缩性胃炎大鼠IL-6、IL-17及ERK1/2基因蛋白表达的影响

目的:观察香砂六君子汤对脾胃虚弱型慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)及胃组织细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)基因和蛋白表达的影响。方法:按随机数字表法将受试大鼠分为空白组和造模组,通过综合法成功复制CAG模型大鼠后,把造模成功大鼠随机分为5组,即:模型组、阳性对照组和香砂六君子汤高、中、低剂量组。香砂六君子汤高、中、低剂量组分别灌胃24、12、6 g/(kg·d)剂量香砂六君子汤,模型组和空白组灌胃10 mL/kg蒸馏水,阳性对照组灌胃0.30 g/(kg·d)维酶素,连续造模120天后,采用ELISA法检测大鼠血清IL-6、IL-17含量;采取实时荧光定量PCR检测胃窦黏膜组织IL-6、IL-17基因表达水平;Western Blot技术检测ERK1/2蛋白及其磷酸化表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠一般生存状况较差,且大鼠血清IL-6含量及胃窦黏膜组织IL-6 mRNA表达升高(P<0.05);血清IL-17含量及胃窦黏膜组织IL-17 mRNA表达升高(P<0.01),胃黏膜组织ERK1/2蛋白表达降低(P<0.01),p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,香砂六君子汤各剂量组大鼠一般生存状况改善,大鼠血清IL-6、IL-17含量及胃窦黏膜组织IL-6 mRNA及IL-17 mRNA表达降低(P<0.05),ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05);p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05);与阳性对照组比较,香砂六君子汤高、中剂量组大鼠血清IL-6、IL-17含量及胃窦黏膜组织IL-6 mRNA及IL-17 mRNA表达降低(P<0.05),ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05);p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:香砂六君子汤通过下调IL-6、IL-17表达,激活ERK1/2,抑制p-ERK1/2水平,对脾胃虚弱型CAG胃窦黏膜起保护作用。

IL-6、C反应蛋白与2型糖尿病并发症的关系研究进展

近年来,糖尿病的发病率逐年升高,其中80%是2型糖尿病,已经严重影响了糖尿病患者的生活质量,也给糖尿病患者的家庭带来了沉重的经济负担。其中家族遗传和环境因素是导致糖尿病的共同病因。为了能够更好地预防和治疗糖尿病及延缓其各种并发症的进展,2型糖尿病发病的本质和发生发展过程成为了目前关注的焦点。炎症过程被相关研究证实在2型糖尿病的发生发展过程中有着不容忽视的作用,而IL-6、C反应蛋白(CRP)又是炎症各环节中非常重要的因子。所以若了解了IL-6及CRP的生理功能及在致病过程中的作用,有针对性地阻断这一环节,那么在糖尿病的预防和治疗方面将会有很大的进展。本文旨在具体介绍IL-6、CRP的生理功能及其如何参与糖尿病及其并发症的进展过程。