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汉滩病毒M、S基因不同拼接方式在昆虫细胞中融合表达效果比较
被引量:
3
1
作者
罗雯
徐志凯
+5 位作者
张芳琳
阎岩
吴兴安
刘勇
白文涛
王海涛
《中国病毒学》
CSCD
2002年第3期226-229,F003,共5页
将汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白 (NP)部分片段以不同方式拼接 ,构建G1S0 .7或S0 .7G1嵌合基因 ,分别插入杆状病毒表达载体 pFBD ,转化DH10Bac致敏菌 ,获得含有嵌合基因的重组穿梭质粒Bacmid ,用其转染Sf9细胞 ,快速筛选出含有G1S0 .7或...
将汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白 (NP)部分片段以不同方式拼接 ,构建G1S0 .7或S0 .7G1嵌合基因 ,分别插入杆状病毒表达载体 pFBD ,转化DH10Bac致敏菌 ,获得含有嵌合基因的重组穿梭质粒Bacmid ,用其转染Sf9细胞 ,快速筛选出含有G1S0 .7或S0 .7G1嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达外源融合蛋白。利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果表明 ,含G1S0 .7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白 ,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别 ,其分子量约 97kD ;含S0 .7G1嵌合基因之重组杆状病毒在昆虫细胞中表达的融合蛋白 ,只能被抗汉滩病毒核蛋白特异性单抗所识别 ,其分子量约 4 3kD。上述结果提示 ,G1S0 .7嵌合基因可能在昆虫细胞中表达出完整的具有生物学活性的融合蛋白 ,S0 .7G1嵌和基因的昆虫细胞表达产物不完整 ,且生物学活性不如G1S0 .
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关键词
汉滩病毒
S基因
拼接方式
M基因
昆虫细胞
融合表达效果
比较
下载PDF
职称材料
题名
汉滩病毒M、S基因不同拼接方式在昆虫细胞中融合表达效果比较
被引量:
3
1
作者
罗雯
徐志凯
张芳琳
阎岩
吴兴安
刘勇
白文涛
王海涛
机构
第四军医大学微生物学教研室
出处
《中国病毒学》
CSCD
2002年第3期226-229,F003,共5页
基金
国家自然科学基金资助 (3 0 0 70 686)
国家教育部骨干教师计划资助
文摘
将汉滩病毒囊膜糖蛋白G1与核蛋白 (NP)部分片段以不同方式拼接 ,构建G1S0 .7或S0 .7G1嵌合基因 ,分别插入杆状病毒表达载体 pFBD ,转化DH10Bac致敏菌 ,获得含有嵌合基因的重组穿梭质粒Bacmid ,用其转染Sf9细胞 ,快速筛选出含有G1S0 .7或S0 .7G1嵌合基因的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中表达外源融合蛋白。利用间接免疫荧光、ELISA和免疫印迹对表达产物进行检测。结果表明 ,含G1S0 .7嵌合基因之重组杆状病毒可在昆虫细胞中表达出融合蛋白 ,该蛋白可被抗汉滩病毒核蛋白及糖蛋白G1特异性单抗所识别 ,其分子量约 97kD ;含S0 .7G1嵌合基因之重组杆状病毒在昆虫细胞中表达的融合蛋白 ,只能被抗汉滩病毒核蛋白特异性单抗所识别 ,其分子量约 4 3kD。上述结果提示 ,G1S0 .7嵌合基因可能在昆虫细胞中表达出完整的具有生物学活性的融合蛋白 ,S0 .7G1嵌和基因的昆虫细胞表达产物不完整 ,且生物学活性不如G1S0 .
关键词
汉滩病毒
S基因
拼接方式
M基因
昆虫细胞
融合表达效果
比较
Keywords
Hantaan virus
Baculovirus
Insect cell
Fused expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
汉滩病毒M、S基因不同拼接方式在昆虫细胞中融合表达效果比较
罗雯
徐志凯
张芳琳
阎岩
吴兴安
刘勇
白文涛
王海涛
《中国病毒学》
CSCD
2002
3
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