Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1在动脉粥样硬化血管壁中的表达及其与基质金属蛋白酶2及转化生长因子1的相关性

目的研究Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)在动脉粥样硬化血管壁中的表达及其与基质金属蛋白酶2(MMP2)、转化生长因子1(TGF-β1)的相关性。方法选择30只载脂蛋白E基因敲除小鼠为实验组,高脂饲料喂养,另选30只C57BL/6小鼠为对照组,普通饲料喂养。在喂养的第10、16、22、28及34周,取眼球血监测小鼠血脂水平;取小鼠腹主动脉作为标本,包埋切片并进行苏木精-伊红染色观察血管壁形态;应用免疫组化染色观察血管壁中ROCK1、MMP2、TGF-β1的表达;使用Image Pro Plus 6.0软件测量切片中血管壁厚度、斑块面积、血管壁中ROCK1、MMP2及TGF-β1的表达量。采用SPSS 27.0统计软件进行数据分析。采用单因素方差分析进行组间比较,两两比较采用Tukey检验。采用Pearson相关与线性回归分析ROCK1与血管壁厚度及斑块面积、MMP2、TGF-β1的关系。结果成功建立动脉粥样硬化小鼠模型。在喂养第10、16、22、28及34周,实验组血脂水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。自喂养第16周起,实验组小鼠血管内均有斑块形成,随着喂养时间的延长,斑块面积和血管壁厚度不断增加,差异有统计学意义(P<0.05);血管壁内ROCK1的表达逐步增高,其表达与斑块面积及血管壁厚度呈正相关(r=0.821,0.730;P<0.05)。线性相关分析及回归分析显示,ROCK1与MMP2、TGF-β1表达均呈正相关(r=0.801,0.906;P<0.05)。结论在动脉粥样硬化血管壁中存在ROCK1蛋白的表达,且表达量随着血管壁厚度增加而增高,ROCK1的表达与MMP2、TGF-β1呈显著正相关性。鉴于ROCK1蛋白的致血管痉挛作用,提示动脉粥样硬化血管壁可能易于痉挛,具体机制需进一步研究。

中华绒螯蟹螺原体类螺旋蛋白SLP25对中华绒螯蟹和RAW264.7细胞免疫反应的研究

中华绒螯蟹螺原体是一种引起中华绒螯蟹颤抖病的新型病原微生物,对中华绒螯蟹养殖业造成了很大的损失.本文研究了螺原体的一个特有蛋白——螺旋蛋白所引起的中华绒螯蟹和小鼠RAW264.7细胞的免疫反应.克隆和原核表达中华绒螯蟹螺原体类螺旋蛋白SLP25后,用以感染中华绒螯蟹和小鼠巨噬细胞RAW264.7,用实时定量PCR和Western Blot的方法检测宿主免疫相关基因或蛋白表达量的变化.类螺旋蛋白SLP25刺激后,中华绒螯蟹的抗脂多糖因子、酚氧化酶原、消极素轻链和Peroxiredoxin 6等基因的mRNA表达量变化显著;RAW264.7细胞内的TNF-α、IL-1β和IL-10等基因的mRNA表达量变化显著,而TGF-β1和CD40的mRNA表达量变化不显著;同时RAW264.7细胞内P38和ERK蛋白的磷酸化水平变化显著,而JNK蛋白的磷酸化水平变化不显著.通过本文的研究表明类螺旋蛋白SLP25可以引起宿主广泛的免疫变化,进而证明其是重要的毒力相关因子.

miR-153-3p靶向下调Rho相关螺旋蛋白激酶1(ROCK1)基因抑制乳腺癌细胞增殖及迁移

目的探究miR-153-3p调节乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法利用生物信息学软件检索预测miR-153-3p的候选靶基因;采用双荧光素酶报告实验分析miR-153-3p与候选基因的靶向关系;应用实时荧光定量PCR和Western blot法检测miR-153-3p对MDA-MB-231细胞mRNA和蛋白质表达水平的影响;通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,并以TranswellTM检测细胞的迁移和侵袭能力。结果软件预测显示miR-153-3p与Rho相关螺旋蛋白激酶1(ROCK1)有连续的结合区域;共转染miR-153-3p模拟物(miR-153-3p mimics)与ROCK1野生型报告载体的细胞相对荧光素酶活性降低;转染hsa-miR-153-3p-mimics后,MDA-MB-231细胞的miR-153-3p表达水平显著增高,且ROCK1蛋白的表达量明显降低。与对照组相比,转染组MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力均减弱。结论miR-153-3p通过靶向下调ROCK1的表达来抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

α-螺旋蛋白质分子链上的孤立子寿命

以连续近似条件下的孤立子为初始条件,对α 螺旋蛋白质分子链上动力学方程的数值解进行了讨论,发现在不考虑热振动影响的情况下,α 螺旋蛋白质分子链上孤立子的寿命仍是有限的.

α螺旋蛋白质螺旋链模型方程组的精确解

采用修正映射法求解α螺旋蛋白质螺旋链运动模型的耦合非线性薛定谔方程组,得到该方程的耦合行波精确解,包括孤波解和Jacobi椭圆函数解.该法的优点是,不必预先给出函数的具体形式,就可以得到较多的函数解,可为进一步研究α螺旋蛋白质螺旋链运动提供参考.

三螺旋蛋白质的孤立子解研究

在作者得到的三螺旋蛋白质分子各向异性耦合的薛定谔方程组的基础上,给出了该方程组的孤立子解。

螺旋-环-螺旋蛋白家族的分类和功能

含有螺旋-环-螺旋结构域的蛋白质是一类超家族蛋白,从细菌到哺乳动物中都广泛存在,且有较高的保守性。根据螺旋-环-螺旋蛋白的DNA结合能力、一些保守区的出现与否以及与E-box等顺式因子的结合特性等,可以把这个家族分成六类。螺旋-环-螺旋蛋白主要通过自身形成二聚体或与其他蛋白质形成异源二聚体而发挥其生物学功能。大部分已知的螺旋-环-螺旋蛋白是转录因子,它们常常通过抑制或活化与生长、分化有关的基因来改变细胞的进程。在动物中对这个家族的研究已经有比较长的历史,研究表明这个家族的基因与细胞的生长、衰老、肿瘤的发生以及神经发育、果蝇的性别决定等有关;近期在植物中的研究也表明它们有广泛的功能,如参与植物抗冻、抗干旱等的应答反应,以及在根、花药等器官的发育过程中起重要作用等。本文就螺旋-环-螺旋转录因子家族的分类和功能研究进展作简要介绍。

a-螺旋蛋白质肽键平面角振动效应初探

在a-螺旋蛋白质分子链上, 在激发能量较弱的条件下, 相对氢键而言肽键平面可看成是刚体, 其运动是在氢键约束下的角振动; 研究了a-螺旋蛋白质中的肽键平面角振动, 用量子力学导出了肽键-氢键链的非线性动力学方程, 研究了动力学系统的特征并得出了不同于Davydov的孤立子解.

用Riccati方程方法解α螺旋蛋白质螺旋链模型方程组

应用Riccati方程方法求解α螺旋蛋白质螺旋链运动模型的耦合非线性薛定谔方程组,得到了一些新的精确解,其中有冲击波解和孤立波解,为研究α螺旋蛋白质螺旋链运动提供参考。

β螺旋蛋白相关性神经变性病的研究进展

β螺旋蛋白相关性神经变性病(β-propeller protein-associated neurodegeneration,BPAN)是一种由WD重复蛋白45(WD repeatcontaining protein 45,WDR45)基因突变引起的X连锁显性遗传性疾病,具有高度临床异质性和遗传异质性。该病具有双相临床进程,儿童期和青春期或成年早期2个阶段临床表现不同。主要表现为儿童期全面发育迟滞伴癫痫发作,青春期或成年早期出现肌张力障碍、帕金森综合征和认知功能障碍,导致严重残疾。儿童期症状通常在青春期和成年早期有所改善。头颅影像学显示苍白球和黑质存在异常铁沉积。该文对BPAN临床特点和分子遗传学研究进展作一综述。

α-螺旋蛋白质的二维网格模型及其能带结构

从α-螺旋蛋白质电子传递的角度出发,建立了一种二维网格模型,并得出了其能带～波矢图.所得禁带宽度基本符合A.Szent-Gy rgyi提出的一般蛋白质禁带宽度标准(2～5eV).

Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1的表达与老年慢性阻塞性肺疾病并发肺动脉高压患者肺动脉压的相关性

目的探讨Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)的表达与老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发肺动脉高压(PHT)患者肺动脉压(PAP)的相关性。方法 78例COPD患者依据患者是否并发PHT分为观察组(COPD并发PHT组)38例和对照组(单纯COPD组)40例,比较2组患者PAP、ROCK1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平,并对ROCK1水平与COPD并发PHT患者PAP的相关性进行分析。结果观察组患者PAP、单核细胞ROCK1及血清ROCK1、TNF-α、CRP水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。COPD并发PHT患者的血清和单核细胞ROCK1水平与PAP呈正相关(P<0.001)。结论血清和单核细胞内ROCK1表达升高可能与COPD患者出现PHT有关,ROCK1可以作为干预COPD向PHT进展的新靶点。

卷曲螺旋蛋白在调控肿瘤中作用及分子机制的研究进展

卷曲螺旋蛋白(coiled-coil domain containing protein,CCDC)是一类由两个及以上的卷曲螺旋结构域组成的同寡聚体或寡聚体序列蛋白,是一类看似结构简单但高度通用的蛋白折叠域,在细胞的生理和病理过程中都起到重要的调节作用。本文将从经典的卷曲螺旋蛋白的角度出发,探讨它们在肿瘤中的表达和作用,并分析其调控的生物学过程和分子作用机制[1-3]。将从卷曲螺旋蛋白调控肿瘤的增殖、迁移和转移、血管生成和凋亡4个层面,较为充分地分析卷曲螺旋蛋白起到的肿瘤生物学功能,阐明它们作为潜在的抑癌或致癌基因的作用原理和机制。

血清卷曲螺旋蛋白49及胃动蛋白2诊断胃癌的临床价值

目的 ：探讨血清卷曲螺旋蛋白49（CCDC49）及胃动蛋白2（GKN2）对胃癌诊断的临床价值。方法 ：应用ELISA检测205例胃癌组、96例癌前病变组及94例正常对照组共395例血清样本中CCDC49及GKN2的表达水平,结果以中位数和四分位数间距表示,并对结果进行统计学分析,以ROC曲线下面积（ROC-AUC）评价诊断的准确性。结果：胃癌组血清CCDC49表达水平高于正常对照组及癌前病变组（P〈0.05）。血清CCDC49的AUC为0.69,95%CI：0.64-0.74。血清CCDC49取临界值为83.0 pg/m L时,CCDC49诊断胃癌的灵敏度和特异度分别为81.5%（167/205）和51.6%（98/190）。胃癌组血清GKN2表达水平低于正常对照组及癌前病变组（P均〈0.05）。血清GKN2的AUC为0.77,95%CI：0.72-0.82。血清GKN2取临界值为93.2 pg/m L时,GKN2诊断胃癌的灵敏度和特异度分别为77.1%（158/205）和65.8%（125/190）。用Logistic回归方程求出CCDC49和GKN2联合预测因子Y,Y的AUC为0.88,95%CI：0.85-0.92,当Y取临界值为2.4时,其诊断胃癌的灵敏度和特异度为84.9%（174/205）和65.8%（125/190）。结论 ：血清CCDC49的高表达水平及GKN2的低表达水平对胃癌具有一定的诊断价值,CCDC49和GKN2联合预测因子Y可作为一种新的、较好的胃癌诊断参考指标。

Ras同源基因家族蛋白A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶信号通路与脑梗死关系的研究进展

Ras同源基因家族蛋白A（Ras homolog gene family member A,Rho A）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（Rho-associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK）信号通路参与许多细胞的调控过程,包括转录、细胞骨架的改变、收缩、黏附、运动、增殖、分化等,同时其与动脉粥样硬化、脑梗死、缺血-再灌注损伤的发生发展密切相关[1]。

Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶通路阻断剂Y-27632对大鼠脂肪组织源性干细胞向神经元样细胞分化的诱导作用

目的：研究Y-27632对大鼠脂肪间充质干细胞向神经元样细胞诱导分化作用.方法：原代培养大鼠脂肪间充质干细胞,将3～6代细胞随机分成4组,无血清对照组、无血清诱导组、血清对照组、血清诱导组.采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学检测巢蛋白、神经元特异性核心抗原（NeuN）、血清应答因子（SRF）、平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、vimentin的表达,免疫印迹检测SRF、vimentin的表达.结果：在无血清情况下,Y-27632能够诱导脂肪组织源性干细胞（ADSCs）出现典型的神经元样细胞形态,免疫细胞化学检测显示神经元特异性蛋白巢蛋白、NeuN的阳性表达；而在10％血清条件下,这种诱导效应被抑制,巢蛋白、NeuN无阳性表达.免疫细胞化学染色显示无血清条件下,Y-27632能够显著抑制α-SMA的表达,同时SRF和vimentin也具有较强的阳性表达.免疫印迹检测显示无论是否存在血清,Y-27632均能够抑制SRF的表达；vimentin在无血清＋Y-27632组表达高于其他各组.结论：Y-27632能够诱导ADSCs向神经元样细胞分化并伴随神经特异标记物的表达.

卷曲螺旋蛋白在胃癌发生发展中的研究进展

卷曲螺旋蛋白(coiled-coil domain containing protein,CCDC)是一类由两个及以上的卷曲螺旋结构域组成的同寡聚体或寡聚体序列蛋白.约40个卷曲螺旋蛋白家族基因与疾病相关,在肿瘤的发病过程中,卷曲螺旋蛋白基因既可以作为促癌基因也可作为抑癌基因,调控肿瘤的增殖、转移、血管生成和凋亡,与肿瘤的发生发展有着密切的关系.本文综述了CCDC家族相关蛋白在胃癌中的最新研究进展,探讨了其在胃癌发生发展中的作用与功能.

α螺旋蛋白质螺旋链模型的精确解组

文章运用Maple语言程序,在没有假设的条件下,得到了α螺旋蛋白质螺旋链运动模型方程组的行波精确解组,它涵盖了所有的耦合解组与非耦合解组,具有任意性。耦合解组的算例函数及其特性分析,解释了α螺旋蛋白质螺旋链运动模型的行波孤立子解的耦合效应,揭示了增加、稳定和控制蛋白质活性和功能的方向,文章的研究方法,为求解生物大分子螺旋链运动模型的行波精确解组探索了溪径。

血清纤维胶凝蛋白3、胶原三股螺旋重复蛋白1对非小细胞肺癌的诊断价值及与临床病理特征的关系

目的 探讨血清纤维胶凝蛋白3(FCN3)、胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值及与临床病理特征的关系。方法 我院2021年7月~2022年8月收治的73例NSCLC病人为研究组;同期来本院体检的健康者55例为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清FCN3、CTHRC1水平;Pearson法分析NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平的相关性;Logistic回归分析NSCLC发生的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清FCN3、CTHRC1水平对NSCLC发生的诊断价值。结果 研究组血清FCN3、CTHRC1水平高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);血清FCN3、CTHRC1水平与NSCLC病人癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Pearson分析显示,NSCLC病人血清FCN3、CTHRC1水平呈正相关关系(r=0.258,P=0.028);Logistic回归分析显示,血清FCN3、CTHRC1表达增高是NSCLC发生的影响因素(P<0.05);血清FCN3、CTHRC1水平诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积分别为0.869、0.810,二者联合诊断NSCLC发生的ROC曲线下面积为0.881,优于血清FCN3、CTHRC1各自单独诊断。结论 NSCLC病人血清FCN3和CTHRC1水平升高,且与癌细胞分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,是NSCLC发生的危险因素,二者联合检测对NSCLC发生更具诊断价值。

卷曲螺旋结构域蛋白2通过促进线粒体自噬抑制帕金森病SH-SY5Y细胞凋亡

背景:卷曲螺旋结构域蛋白2(coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing 2,CHCHD2)能否调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在帕金森病中发挥神经保护作用尚未可知。目的:探讨CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中对PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬发挥的作用及机制。方法:利用重组质粒转染技术过表达或敲低CHCHD2,用6-羟基多巴胺构建SH-SY5Y细胞帕金森病模型后分对照组、模型组、过表达阴性对照+6-羟基多巴胺组、敲低阴性对照+6-羟基多巴胺组、过表达CHCHD2+6-羟基多巴胺组和敲低CHCHD2+6-羟基多巴胺组。Western blot及RT-qPCR检测CHCHD2的表达;Western blot检测LC3Ⅰ/Ⅱ、p62、MFN1、COXⅣ、DRP1、PINK1、Parkin、TIM23、Bax、Bcl-2及cleavedcaspase3蛋白表达;CCK-8、JC-1和活性氧试剂盒检测细胞活性、线粒体膜电位和活性氧水平,单丹磺酰尸胺染色观察细胞自噬情况,透射电镜观察自噬溶酶体。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞活性、线粒体膜电位及CHCHD2、PINK1、Parkin蛋白表达降低,活性氧水平、凋亡水平及LC3Ⅰ/Ⅱ、p62蛋白表达升高(P<0.05),并观察到自噬溶酶体的存在;②与模型组相比,过表达CHCHD2能降低细胞活性氧水平,升高线粒体膜电位及PINK1、Parkin和MFN1蛋白表达水平,并观察到线粒体自噬溶酶体增多,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用,并伴有COXⅣ、TIM23和p-DRP1蛋白表达的升高(P<0.05);③与模型组相比,过表达CHCHD2能减少细胞凋亡,上调Bcl-2并下调Bax及cleavedcaspase3蛋白的表达,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用(P<0.05);④结果提示,CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中可以通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬改善线粒体功能从而减轻细胞凋亡发挥神经保护作用。