蟾酥诱发人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用机制研究

目的探究蟾酥对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、侵袭、转移的影响及可能作用机制。方法取雄性C57BL/6J小鼠30只,制备空白血清和不同浓度(2.5%和5%)的蟾酥含药血清。取传代培养MG-63细胞,实验分为3组:2.5%蟾酥含药血清组和5%蟾酥含药血清组分别加入相应浓度的蟾酥含药血清培养,对照组加入等体积PBS培养。CCK-8法检测MG-63细胞增殖活性,PNPP法检测细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红法检测细胞成骨能力,Transwell法检测MG-63细胞侵袭、转移情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率及MG-63细胞中整合素α4(Integrinα4)表达情况。结果不同浓度蟾酥含药血清组各时间点细胞增殖率均明显低于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组均明显低于同期2.5%蟾酥含药血清组(P均<0.05);不同浓度蟾酥含药血清组细胞凋亡率、ALP活性均明显高于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组均明显高于2.5%蟾酥含药血清组(P<0.05);茜素红染色显示,不同浓度含药血清组有橘红色结节、边界清楚细胞增多;不同浓度蟾酥含药血清组侵袭性细胞和转移性细胞数量均明显少于对照组(P均<0.05),Integrinα4表达占比均明显低于对照组(P均<0.05),且5%蟾酥含药血清组细胞数量均明显少于2.5%蟾酥含药血清组(P均<0.05),Integrinα4表达占比明显低于2.5%蟾酥含药血清组(P<0.05)。结论蟾酥可以促进MG-63细胞凋亡,抑制细胞增殖、侵袭和转移,改善细胞分化和成骨功能,机制可能与下调Integrinα4表达有关。

正交设计优化蟾酥注射液的提取工艺

试验旨在优化蟾酥注射液的提取工艺,试验以吲哚类总生物碱(以5-羟色胺盐酸盐计)的含量为考察指标,以加水倍数(A)、加热温度(B)和提取时间(C)为考察因素,通过L_(9)(3^(4))正交试验优化蟾酥注射液的提取工艺,确定提取工艺参数,并采用最大极差法对正交试验数据分析处理。结果显示,加水倍数是影响蟾酥注射液主要成分含量的主要因素,蟾酥注射液的最佳提取工艺为10倍加水量浸泡,加热煮沸(100℃),提取时间4 h。验证性试验按最优工艺制备3批样品,采用紫外可见分光光度(UV)法测定蟾酥注射液中吲哚类总生物碱的含量为9.92 mg/L。研究表明,该提取工艺稳定可靠,可用于中试生产。

中药蟾酥的质量研究现状

蟾酥是蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍的耳后腺或皮肤腺体的干燥分泌物。蟾酥作为一种传统的中药,化学成分复杂,临床用途较广,具有抗肿瘤、强心、抗炎、局麻、镇痛等多种药理活性。本文从蟾酥的本草考证、质量影响因素和质量标准现状等方面总结了蟾酥质量研究现状,以期从现行标准出发,为蟾酥药材的进一步质量控制提供参考。

益气健脾方联合蟾酥注射液对晚期胃癌T淋巴细胞亚群平衡及胃肠激素的影响

目的分析益气健脾方联合蟾酥注射液治疗晚期胃癌效果及对患者T淋巴细胞亚群平衡及胃肠激素的影响。方法采取随机数字表法将纳入的85例晚期胃癌患者(2021年3月—2022年12月收治)分为两组,对照组患者(42例)采取化疗治疗,中医方案组(43例)患者化疗治疗基础上结合益气健脾方及蟾酥注射液治疗,指标观察:各组疗效、治疗不良反应、中医证候积分(上腹痛及恶心呕吐、食欲减退、消瘦乏力、呕血黑便等)变化及肿瘤标志物水平变化、炎症因子指标变化及T淋巴细胞亚群指标变化、胃肠激素指标变化、肿瘤生活质量评分标准(Karnofsky performance status, KPS)变化。结果对照组与中医方案组治疗总有效率比较[52.38%(22/42)vs 76.74%(33/43)],P<0.05;中医方案组患者不良反应少于对照组(P<0.05);各组治疗前中医证候积分(上腹痛、恶心呕吐、食欲减退、消瘦乏力、呕血黑便等)、糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)及糖类抗原72-4(carbohydr ateantigen72-4,CA72-4)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)等肿瘤标志物水平、白介素-6(interleukin 6,IL-6)、白介素-8(interleukin 8,IL-8)与肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子指标、CD_(4)^(+)T淋巴细胞(cluster of differentiation 4,CD_(4)^(+))、CD_(8)^(+)T淋巴细胞(cluster of differentiation 8,CD_(8)^(+))、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)等T淋巴细胞亚群指标、胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogenⅠ,PGⅠ)与胃蛋白酶Ⅱ(pepsinogenⅡ,PGⅡ)、胃液素(gastrin, GAS)等胃肠激素、KPS评分等指标比较,均P>0.05;治疗后各组患者中医证候积分(上腹痛、恶心呕吐、食欲减退、消瘦乏力、呕血黑便等)、CA19-9及CA72-4、CEA、IL-6、IL-8及TNF-α水平均降低,中医方案组比对照组更低(P<0.05);对照组患者治疗后CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)指标无显著变化(P>0.05),中医方案组CD_(4)^(+)上升,CD_(8)^(+)下降,CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)指标上升(P<0.05);治疗后各组患者PGⅠ及PGⅡ、GAS水平及KPS评分均上升,中医方案组PGⅠ及PGⅡ、GAS水平及KPS评分均高于对照组(P<0.05)。结论益气健脾方联合蟾酥注射液治疗晚期胃癌有助于提升晚期胃癌治疗效果,改善患者病症,调节T淋巴细胞亚群平衡及胃肠激素,抑制机体炎症反应,提升患者生活质量,减少不良反应,治疗安全可靠。

基于网络药理学和分子对接技术探讨蟾酥治疗肺癌的作用机制

目的:采用网络药理学及分子对接技术探索蟾酥治疗肺癌的分子作用机制。方法:通过中药与化学成分数据库、BATMAN、SwissADME、SwissTargetPrediction数据库获取并筛选蟾酥的活性成分及作用靶点;通过人类基因数据库(the human gene database,GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(online mendelian inheritance in man,OMIM)、药物靶标数据库(therapeutic targetdatabase,TTD)获取肺癌主要靶点,利用STRING平台构建共同靶点蛋白-蛋白互作网络(protein-protein interactions,PPI);运用Cytoscape 3.7.1软件构建蟾酥活性成分-肺癌-靶点交集网络;通过R语言软件对共同靶点进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;通过AutoDock Tools 1.5.6、AutoDock vina 1.1.2进行分子对接验证。结果:共筛选出蟾酥有效活性成分19个,蟾酥作用于肺癌的靶点94个,PPI网络显示表皮生长因子受体、丝裂原活化蛋白激酶3、丝裂原活化蛋白激酶1、白细胞介素6、类固醇受体辅激活因子等为核心靶点,主要涉及肽基-酪氨酸磷酸化及修饰、丝氨酸磷酸化及修饰等生物过程;蟾酥作用于肺癌的生物学通路主要富集在PI3K/Akt、癌症蛋白聚糖、癌症MicroRNAs等信号通路;分子对接结果证明蟾酥大部分有效活性成分与核心蛋白靶点有较好的结合活性。结论:蟾酥可通过多成分、多靶点、多通路治疗肺癌。

基于ERK5通路探讨蟾酥抑制人骨肉瘤MG-63细胞的作用机制

目的:研究蟾酥对人骨肉瘤细胞MG-63的作用效应及作用机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞MG-63,采用不同浓度的蟾酥含药血清(0%、2.5%、5%)进行干预,采用qPCR法检测各组c-myc、caspase-9的mRNA表达量,采用免疫荧光法检测各组整合素α4的含量并采用Western Blot法检测MEK5、Nur77的表达情况。分别采用ERK5抑制剂XMD8-92、XMD8-92联合5%蟾酥含药血清、MEK5过表达腺病毒干预人骨肉瘤细胞MG-63,采用Western Blot法检测c-myc、caspase-9及整合素α4的表达量。结果:相较于空白对照组(%),2.5%、5%蟾酥含药血清干预后的c-myc及整合素α4表达下降,caspase-9表达上升(P<0.05),且蟾酥含药血清干预后MEK5、Nur77表达下降(P<0.05),与干预浓度呈负相关;相较于5%蟾酥含药血清干预组,XMD8-92联合5%蟾酥含药血清组c-myc及整合素α4表达下降、caspase-9表达上升(P<0.05),而过表达MEK5联合5%蟾酥含药血清组的表达情况相反(P<0.05)。结论:蟾酥可以通过调控ERK5通路抑制人骨肉瘤细胞MG-63增殖、转移并促进细胞凋亡。

中药蟾酥研究进展的CiteSpace知识图谱分析

检索了中国知网及Web of Science数据库近10年发表的蟾酥相关的中、英文文献,应用文献计量学和CiteSpace 5.8.R3可视化软件对作者、研究机构、关键词及文献来源等进行分析,并结合信息提取方法对蟾酥研究的现状及发展趋势进行分析。经过筛选最终纳入447篇中文文献和316篇英文文献。叶文才是该领域发表文献最多的作者;山东中医药大学、暨南大学分别是发表蟾酥相关中、英文文献量最多的机构;中文领域机构间合作有待提升,英文领域机构间的合作较为普遍。分析中、英文关键词,发现蟾酥相关研究主要集中在有效成分、安全性、质量标准等方面,抗肿瘤机制和毒效成分研究是目前及未来的热点。

华蟾酥毒基通过调控circNFIX/miR-577通路抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:研究华蟾酥毒基(CnBu)对乳腺癌细胞MDA-MB-231恶性生物学行为的影响,并探讨其机制是否与调控环状RNA核因子IX(circNFIX)和miR-577表达相关。方法:将MDA-MB-231细胞分为对照(Con)组、CnBu-低剂量(L)组、CnBu-中剂量(M)组、CnBu-高剂量(H)组、si-NC组、si-circNFIX组、pcDNA组、pcDNA-circNFIX组、CnBu+pcDNA组、CnBu+pcDNAcircNFIX组。MTT、Transwell实验分析细胞增殖、迁移和侵袭能力,Westernblot分析Ki-67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白表达。RT-qPCR分析circNFIX、miR-577表达量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证circNFIX和miR-577的靶向调控关系。结果:CnBu以剂量依赖方式下调Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白和circNFIX表达(P<0.05),上调miR-577表达(P<0.05),减弱MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。miR-577与circNFIX序列直接结合,干扰或过表达circNFIX可显著提高或降低miR-577表达水平(P<0.05)。干扰circNFIX表达显著下调Ki-67、MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05),减弱MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。过表达circNFIX显著减弱CnBu对MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭及相关蛋白表达的影响(P<0.05)。结论:CnBu可抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭,可能通过下调circNFIX/miR-577通路实现。

基于转录组学探讨华蟾酥毒基抑制肝癌细胞增殖的作用机制

目的观察华蟾酥毒基(CBF)对肝癌细胞增殖的抑制作用,采用转录组学测序技术揭示相关基因及信号通路,探讨CBF抗肝细胞癌(HCC)的可能作用机制。方法用不同浓度的CBF(0、2、4、8、16和32μmol·L^(-1))处理人HCC细胞SMMC-7721和JHH7,时间梯度为24、48和72 h,WST-1试剂盒检测细胞增殖情况。根据WST-1试剂盒检测结果,用CBF 2μmol·L^(-1)干预SMMC-7721和JHH7细胞24 h,然后进行转录组学基因表达测序分析差异表达基因,并行生物信息学分析。基于文献报道及TCGA数据库观察部分差异表达基因在HCC组织中的表达情况,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术检测并验证CBF靶基因的表达情况。结果①CBF对SMMC-7721和JHH7细胞具有抑制增殖作用,且呈浓度-时间依赖性。②转录组学测序结果显示,经CBF干预后,SMMC-7721细胞获得差异表达基因共计578个(其中上调基因309个、下调基因269个),JHH7细胞获得差异表达基因共计611个(其中上调基因349个、下调基因262个),两组细胞获得的交集基因共有106个(差异倍数>2,P<0.05)。③生物信息学分析显示,激活转录因子3(ATF3)、羰基还原酶1(CBR1)、细胞骨架相关蛋白4(CKAP4)、生长停滞和DNA损伤可诱导蛋白β(GADD45B)、钾二孔域通道亚科K成员5(KCNK5)、起源识别复合亚基5(ORC5)基因的转录水平在HCC组织中呈异常表达并与患者预后相关。④RT-qPCR结果显示,CBF能促进ATF3、KCNK5和GADD45B基因的表达,抑制CBR1、CKAP4和ORC5基因的表达,与测序结果一致。结论CBF具有抑制HCC细胞增殖的作用,其机制可能与调控ATF3、KCNK5、GADD45B、CBR1、CKAP4和ORC5基因表达有关。

基于高效液相色谱法特征图谱和一测多评的蟾酥质量评价

为了对不同产地蟾酥质量进行对比研究.利用24批蟾酥建立了HPLC特征图谱,比较不同产地蟾酥特征图谱相似度,进行聚类分析和主成分分析.针对特征图谱中的日蟾毒它灵、蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基5个共有峰建立HPLC一测多评方法,测定24批蟾酥中5个成分的含量.结果发现:建立蟾酥特征图谱,确定9个共有峰,指认其中5个共有峰.指纹图谱相似度范围是0.136~0.996,四川样本与其他各省样品相似度最低.相似度分析、聚类分析和主成分分析结果表明,蟾酥样品化学成分具有一定的地域规律性.不同省份蟾酥中日蟾毒它灵、蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基含量相差较大,东北三省及河北、山东、江苏3个东部省份蟾酥样品蟾毒内酯类含量较高,河南、四川省蟾毒内酯类含量较低.不同批次蟾酥5种蟾毒内酯类化合物含量比例差别较大,未体现出明显的地域特性.研究建立了蟾酥特征图谱检测方法及含量一测多评检测方法,为蟾酥药材质量评价研究提供依据.蟾酥中蟾毒内酯类成分的积累具有一定的地域性,对于蟾蜍的养殖及蟾酥药材资源的合理开发应用具有重要指导意义.

蟾酥及其制剂抗肿瘤作用研究进展

蟾酥作为一种天然药物,具有显著的抗炎、镇痛、抗肿瘤等药理作用。蟾酥是数十种中药制剂的主要原料,在肺癌、肝癌、前列腺癌等各种晚期肿瘤的治疗中具有重要作用。研究发现其抗肿瘤作用可能与抑制肿瘤细胞的增殖、转移、侵袭,诱导肿瘤细胞凋亡和自噬,肿瘤细胞相关性炎症等相关。在临床上,蟾酥及其各种制剂应用广泛,具有极大的研究意义。

蟾酥活性成分及其药理作用的研究进展

目的对蟾酥活性成分及其药理作用的研究进展进行综述。方法通过查阅近十年来国内外的文献,对蟾酥的活性成分及其药理作用进行归纳和分析。结果蟾酥的化学成分包括蟾蜍二烯内酯类、吲哚生物碱类、甾醇类及其他类化合物,近年来关于蟾蜍二烯内酯类活性单体成分的研究较多。蟾酥及其活性成分具有抗肿瘤、强心、抗炎、镇痛、抗菌等药理作用,目前的研究主要集中于抗肿瘤作用及强心作用。结论蟾酥作为中国传统中药材之一,在临床上具有广泛的应用。本文详细地归纳了蟾酥的活性成分,综述了其药理作用,特别是其抗肿瘤作用,以期为基于蟾酥及其活性成分的研究提供一定的依据。

高效液相色谱-质谱联用法测定喉症丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基

建立高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)测定喉症丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量的方法。采用HPLC-MS正离子多反应监测模式进行测定,色谱柱为Thermo Hypersil BDS C18(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-1%乙酸溶液(38∶62),流速为0.5 mL/min,检测波长为296 nm,柱温为20℃。质谱条件:鞘气流速40 arb,辅气流速5 arb,喷雾电压4.5 kV,毛细管温度300℃。结果显示,华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的检测质量浓度线性范围均为50~300μg/mL(r=0.9992),重复性试验、精密度试验、稳定性(12 h)试验的RSD均小于1.00%(n=5或n=6),加样回收率分别为101.8%(RSD为2.61%,n=6)和100.9%(RSD为3.20%,n=6)。该方法灵敏度高、重复性好,能准确测定喉症丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量,可用于喉症丸的质量控制。

复方蟾酥胶囊对小鼠Lewis肺癌移植瘤的药效学研究

目的:探讨不同剂量复方蟾酥胶囊对C57BL/6J小鼠Lewis肺癌的抑制作用。方法:选取60只SPF级雄性C57BL/6J小鼠,随机分为空白组10只和造模组50只。空白组单独饲养,造模组采用小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC)进行肺癌肿瘤右侧腋窝皮下造模,造模成功后随机分为模型组、顺铂组和复方蟾酥胶囊低、中、高剂量组,每组各10只。顺铂组隔日腹腔注射顺铂,复方蟾酥胶囊低、中、高剂量组每天用不同剂量复方蟾酥胶囊溶液[0.1365、0.273、0.546 g/(kg·d)]灌胃,空白组不予处理;模型组灌胃生理盐水,14 d后处死小鼠并取出肿瘤组织及肺组织。采用ELISA法、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法、HE染色检测小鼠肿瘤组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达、蛋白表达及肺组织病理情况来测定肿瘤抑制情况。结果:与模型组比较,复方蟾酥胶囊中剂量组及顺铂组瘤重显著降低(P<0.05),TNF-α水平降低(P<0.05,P<0.01),显著上调Caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01,P<0.0001),显著下调VEGF mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01,P<0.001);模型组肺组织中多见肺泡壁增厚,伴有较多淋巴细胞与中性粒细胞浸润,局部支气管可见上皮细胞坏死,核碎裂,有明显肺水肿及出血,顺铂组和复方蟾酥胶囊各剂量组能明显改善上述情况,且肺泡腔内有嗜酸性浆液样物质渗出。结论:复方蟾酥胶囊具有抑制Lewis肺癌瘤体生长的作用。

基于PARP-1裂解引发非小细胞肺癌细胞凋亡的蟾酥抗肿瘤机理研究

目的:探究蟾酥有效成分诱导PARP蛋白裂解并引发细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用的机理。方法:先用分子对接技术预测蟾酥有效成分与PARP-1的结合方式,再以体外细胞毒实验证明其抑制非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖的作用,以流式细胞术检测沙蟾毒精对A549细胞凋亡发生的影响,并检测沙蟾毒精给药后A549细胞中cleaved PARP的表达量。结果:蟾酥有效成分能与PARP-1蛋白活性口袋中的关键氨基酸残基产生氢键、疏水作用、范德华力等相互作用,表现出较强的与靶点结合的活性。体外细胞毒试验和分子生物学实验也验证了虚拟分析的推论。结论:蟾酥中的多种活性化合物能靶向诱导PARP裂解,阻断NSCLC细胞中单链DNA损伤的修复通路,并最终引发NSCLC细胞凋亡。

蟾酥及其活性成分抗肿瘤作用研究进展

蟾酥作为一种传统中药,具有镇痛、消炎、麻醉等作用。近年来研究表明,蟾酥具有确切的抗肿瘤活性,能够诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞的分化,还有逆转耐药性、抑制肿瘤血管形成及增强免疫的作用。本文主要就蟾酥及其活性成分抗肿瘤作用的研究进展作一综述。

高效液相色谱法测定蟾酥中有效成分的含量

目的：建立ＨＰＬＣ法测定蟾酥药材中有效成分的含量。方法：选用０．５％磷酸二氢钾溶液乙腈（５０：５０）（磷酸调节ｐＨ为３．２５±０．０２）为流动相测定蟾酥药材中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。结果：测定组分具有良好的线性关系和分离度，华蟾酥毒基的平均回收率为１００．３５％，ＲＳＤ＝１．８６％，脂蟾毒配基的平均回收率为１００．３８％，ＲＳＤ＝２．０９％。结论：本方法简便、快速、准确。

反相高效液相色谱法测定蟾酥中的3种蟾毒内酯

建立了采用反相高效液相色谱同时测定药材蟾酥中华蟾酥毒基、酯蟾毒配基和蟾毒灵含量的方法。采用反相C18色谱柱,以乙腈-0.1mol/L醋酸缓冲液（pH3.2）（体积比为50∶50）为流动相,流速0.8mL/min,在299nm波长下检测。华蟾酥毒基、酯蟾毒配基和蟾毒灵的线性范围分别为0.25-0.875μg（r=0.9990）、0.25-0.875μg（r=0.9991）和0.15-0.525μg（r=0.9990）;平均加样回收率分别为100.3%、100.0%和98.0%,结果表明所建方法简便可靠。对不同来源的10批样品中的3种蟾毒内酯含量的检测结果显示,不同来源或批次的蟾酥药材中3种蟾毒内酯总含量差异较大。

正交试验法优选蟾酥脂溶性成分提取工艺

目的研究蟾酥中酯蟾毒配基、华蟾酥毒基的乙醇提取工艺。方法采用正交设计,筛选蟾酥中酯蟾毒配基、华蟾酥毒基的最佳乙醇提取工艺。结果最佳工艺条件为A1B3C1,即乙醇体积分数50%,提取时间60min,溶剂量20倍(1:20)。结论提取时间和溶剂量是影响蟾酥中脂溶性成分提取工艺的主要因素,用60min和1:20溶剂量提取效果最好。

HPLC法测定蟾酥中4种蟾毒内酯

目的建立同时测定蟾酥药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的方法。方法 10批蟾酥药材采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.04%三氟乙酸为流动相梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为296 nm。结果蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基分别在0.05～2.61μg(R2=1),0.10～4.96μg(R2=1),0.10～5.03μg(R2=1),0.10～5.18μg(R2=1)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为97.62%,97.34%,97.23%,97.34%,RSD值均<2.0%。结论此方法简便、准确。10批不同来源的蟾酥样品测定结果表明,药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基含有量相对稳定,脂蟾毒配基含有量则波动较大。