正交设计优化蟾酥注射液的提取工艺

试验旨在优化蟾酥注射液的提取工艺,试验以吲哚类总生物碱(以5-羟色胺盐酸盐计)的含量为考察指标,以加水倍数(A)、加热温度(B)和提取时间(C)为考察因素,通过L_(9)(3^(4))正交试验优化蟾酥注射液的提取工艺,确定提取工艺参数,并采用最大极差法对正交试验数据分析处理。结果显示,加水倍数是影响蟾酥注射液主要成分含量的主要因素,蟾酥注射液的最佳提取工艺为10倍加水量浸泡,加热煮沸(100℃),提取时间4 h。验证性试验按最优工艺制备3批样品,采用紫外可见分光光度(UV)法测定蟾酥注射液中吲哚类总生物碱的含量为9.92 mg/L。研究表明,该提取工艺稳定可靠,可用于中试生产。

益气健脾方联合蟾酥注射液对晚期胃癌T淋巴细胞亚群平衡及胃肠激素的影响

目的分析益气健脾方联合蟾酥注射液治疗晚期胃癌效果及对患者T淋巴细胞亚群平衡及胃肠激素的影响。方法采取随机数字表法将纳入的85例晚期胃癌患者(2021年3月—2022年12月收治)分为两组,对照组患者(42例)采取化疗治疗,中医方案组(43例)患者化疗治疗基础上结合益气健脾方及蟾酥注射液治疗,指标观察:各组疗效、治疗不良反应、中医证候积分(上腹痛及恶心呕吐、食欲减退、消瘦乏力、呕血黑便等)变化及肿瘤标志物水平变化、炎症因子指标变化及T淋巴细胞亚群指标变化、胃肠激素指标变化、肿瘤生活质量评分标准(Karnofsky performance status, KPS)变化。结果对照组与中医方案组治疗总有效率比较[52.38%(22/42)vs 76.74%(33/43)],P<0.05;中医方案组患者不良反应少于对照组(P<0.05);各组治疗前中医证候积分(上腹痛、恶心呕吐、食欲减退、消瘦乏力、呕血黑便等)、糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)及糖类抗原72-4(carbohydr ateantigen72-4,CA72-4)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)等肿瘤标志物水平、白介素-6(interleukin 6,IL-6)、白介素-8(interleukin 8,IL-8)与肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等炎症因子指标、CD_(4)^(+)T淋巴细胞(cluster of differentiation 4,CD_(4)^(+))、CD_(8)^(+)T淋巴细胞(cluster of differentiation 8,CD_(8)^(+))、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)等T淋巴细胞亚群指标、胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogenⅠ,PGⅠ)与胃蛋白酶Ⅱ(pepsinogenⅡ,PGⅡ)、胃液素(gastrin, GAS)等胃肠激素、KPS评分等指标比较,均P>0.05;治疗后各组患者中医证候积分(上腹痛、恶心呕吐、食欲减退、消瘦乏力、呕血黑便等)、CA19-9及CA72-4、CEA、IL-6、IL-8及TNF-α水平均降低,中医方案组比对照组更低(P<0.05);对照组患者治疗后CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)指标无显著变化(P>0.05),中医方案组CD_(4)^(+)上升,CD_(8)^(+)下降,CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)指标上升(P<0.05);治疗后各组患者PGⅠ及PGⅡ、GAS水平及KPS评分均上升,中医方案组PGⅠ及PGⅡ、GAS水平及KPS评分均高于对照组(P<0.05)。结论益气健脾方联合蟾酥注射液治疗晚期胃癌有助于提升晚期胃癌治疗效果,改善患者病症,调节T淋巴细胞亚群平衡及胃肠激素,抑制机体炎症反应,提升患者生活质量,减少不良反应,治疗安全可靠。

蟾酥注射液对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用

为研究蟾酥注射液对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用,采用免疫药理学方法制造免疫低下的动物模型,测定脾脏重量并计算脾脏指数;ELISA方法检测IgG,IgG1,IgG2b抗体水平;MTT法检测脾淋巴细胞增殖反应;ELISA方法检测细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-10)水平。测定结果表明,蟾酥注射液能够提高免疫低下小鼠脾脏指数,提高抗体水平;在ConA或者LPS刺激下提高脾细胞增殖率,促进淋巴细胞分泌细胞因子,说明蟾酥注射液在一定剂量下能够缓解氟苯尼考引起的免疫抑制。

蟾酥注射液联合阿帕替尼治疗晚期胃癌患者的疗效

目的观察蟾酥注射液液联合阿帕替尼治疗晚期胃癌患者的疗效。方法确诊为晚期胃癌(Ⅳ期)经二线及二线治疗失败后接受阿帕替尼治疗的患者50例为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组均为25例。对照组给予阿帕替尼单药口服,观察组在阿帕替尼治疗的基础上给予蟾酥注射液。治疗4个疗程后根据影像学结果评价两组患者的治疗效果,记录不良反应的发生情况,并检测患者外周血肿瘤标志物、免疫指标情况。结果(1)观察组总有效率(ORR)为20%,对照组ORR为8%,差异无统计学意义(P=0.221)。观察组疾病控制率(DCR)为76%,对照组DCR为48%,差异有统计学意义(P=0.041);(2)观察组毒副反应发生率低于对照组(P<0.05);(3)两组治疗前肿瘤标志物(CA199、CEA)水平无明显差异,用药后均明显下降,观察组优于对照组(P<0.05);(4)用药后观察组的免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IgG、IgA、IgM)变化水平优于对照组(均P<0.05)。结论蟾酥注射液可改善晚期胃癌阿帕替尼的治疗效果。

蟾酥注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

目的 比较蟾酥注射液加化疗与单纯化疗对晚期非小细胞肺癌的疗效、毒性反应及免疫功能的影响。方法 将83例晚期非小细胞肺癌患者随机分为两组。治疗组化疗同时加用蟾酥注射液20ml加5％葡萄糖液500ml静脉滴注，1次／d，连用8—10d。对照组单纯化疗。化疗方案为NP方案，即诺维本（NVB）联合顺铂（DDP），28d为1周期，连续两个周期。结果 治疗组有效率51．06％，对照组有效率为41．67％，差异无显著性（P〈0．05）。结论 蟾酥注射液配合化疗治疗晚期非小细胞肺癌，可降低化疗对患者免疫功能的影响，改善患者的生活质量。

蟾酥注射液对马立克氏病疫苗的保护作用

为了观察蟾酥注射液对鸡马立克氏病疫苗的调节作用,采用中药免疫药理学方法,选择不同浓度的蟾酥注射液与马立克氏病疫苗联合使用,作为试验组,免疫前及免疫后7日、14日和21日龄,通过静脉采集血液,采用MTT法,检测外周血T、B淋巴细胞增值率;采用显微镜计数法,计算血液中白细胞总数;采用鸡腹腔注射红细胞悬液,检测巨噬细胞吞噬力;采用黄嘌呤氧化酶法,测定血清中总的SOD活力;采用腹腔计数200个巨噬细胞所吞噬的红细胞数,计算吞噬百分率和吞噬指数的方法,检测巨噬细胞吞噬力;采用ELISA法,检测血清总抗体效价;采用胸腺、脾脏和法氏囊称重法,检测免疫器官指数。结果显示所有试验组中,蟾酥注射液均能够显著提高外周血T淋巴细胞的增值率;试验组中的高剂量组(0.25mg/mL)和中剂量组(0.1mg/mL),蟾酥注射液均能够显著提高血液中的白细胞总数;所有试验组中,蟾酥注射液均能够显著提高巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数;试验组中的高剂量组和中剂量组,蟾酥注射液均能够显著提高SOD含量;所有试验组中,蟾酥注射液对马立克氏病疫苗抗体的产生均有不同程度的促进作用;所有试验组中,蟾酥注射液能够显著促进机体免疫器官的发育。说明蟾酥注射液能从特异性免疫、非特异性免疫、免疫细胞和免疫分子等方面增强免疫活性,研究结果显示蟾酥注射液是马立克氏病疫苗有效的免疫增强剂。

蟾酥注射液佐剂对鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗免疫效果的影响

为了观察蟾酥注射液对鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗的调节作用,采用中药免疫药理学方法,选择不同浓度的蟾酥注射液与鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗联合使用,作为试验组。于7、14、21、28、35、42、49、56日龄,通过静脉采集血液,采用MTT法,检测外周血T、B淋巴细胞吸光度值(OD值);采用β-微量法,检测血清中新城疫和传染性支气管炎抗体效价。结果显示,所有试验组中,蟾酥注射液均能够显著提高外周血T、B淋巴细胞OD值,中剂量组(0.25mg/mL)T、B淋巴细胞OD值最大;蟾酥注射液能够显著提高血清中新城疫和传染性支气管炎抗体效价,中剂量组免疫后期抗体存在时间长,抗体高峰期持续时间也长。因此,说明蟾酥注射液是鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗有效的免疫佐剂。

蟾酥注射液对小鼠免疫细胞影响的实验研究

为了观察蟾酥注射液对小鼠的免疫细胞增殖及其分泌细胞因子的作用,采用中药免疫药理学方法,选择不同浓度的蟾酥注射液作为试验组,分别与小鼠的脾淋巴细胞以及LPS或者ConA共同孵育48 h,检测细胞增殖水平的变化;将蟾酥注射液与小鼠腹腔巨噬细胞共培养,检测蟾酥注射液对巨噬细胞吞噬中性红能力的影响;将蟾酥注射液与自然杀伤细胞共培养,检测蟾酥注射液对NK细胞杀伤能力的影响;取脾细胞与蟾酥注射液共培养上清,ELSIA法检测蟾酥注射液对几种重要的细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-12)分泌水平的变化。结果显示蟾酥注射液在一定剂量范围内单独或者协同非特异性丝裂原(Con A或LPS)作用能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖能力(P<0.05或P<0.01);蟾酥注射液单独作用可以显著提高巨噬细胞吞噬中性红的能力;蟾酥注射液能够显著提高小鼠NK细胞对靶细胞的杀伤活性;同时蟾酥注射液能够显著增强小鼠脾淋巴细胞分泌Th1型细胞因子。说明蟾酥注射液在体外能够显著提高几种主要免疫细胞的增殖和功能,研究结果显示蟾酥注射具有显著的非特异性免疫增强作用。

康艾、参芪扶正、蟾酥注射液与介入联合治疗原发性中晚期肝癌的近期疗效观察

原发性肝癌主要由肝动脉供血,因而肝动脉内插管化疗栓塞术（transcatheter arterial chemoembolization,TACE）是目前对失去手术机会的中、晚期肝癌的有效治疗方法之一[1].但是肝癌患者通常免疫功能低下,而TACE术可使患者机体免疫功能进一步下降,直接影响治疗效果及生活质量.本研究旨在将康艾注射液、参芪扶正注射液、蟾酥注射液分别与TACE联合治疗原发性中晚期肝癌,观察近期疗效,进行比较.

蟾酥注射液抑制白血病HL-60细胞增殖及诱导其凋亡实验研究

目的 :探讨蟾酥注射液 (CHS)体外抑制白血病 HL- 6 0细胞增殖的机制。方法 :采用 MTT法检测 CHS对白血病 HL- 6 0细胞增殖的影响 ;采用 Giemsa染色和透射电镜技术观察 CHS处理的 HL- 6 0细胞形态学和超微结构变化 ;采用琼脂糖凝胶电泳检测 CHS处理的 HL- 6 0细胞的 DNA片段化。结果 :CHS2 4h对白血病细胞增殖出现抑制 (P<0 .0 5 )。 CHS处理的 HL- 6 0细胞光镜和电镜出现核着边、核碎片和凋亡小体 ;CHS处理的 HL- 6 0细胞 DNA电泳出现 DNA梯状图谱。 2 .2 5× 10 - 1 μg/ m l CHS作用 2 4,48,72 h后凋亡指数 (A1)高于阴性对照组 (P均 <0 .0 5 )。 2 .2 5 ,2 .2 5× 10 - 1 ,2 .2 5× 10 - 2 μg/ m1作用 48h的 HL- 6 0细胞 AI高于阴性对照组 (均 P<0 .0 5 )。结论 :CHS体外抑制白血病 HL- 6 0细胞增殖 ,并且诱导其凋亡。诱导凋亡可能是

复方蟾酥注射液治疗母猪子宫内膜炎疗效观察

母猪产后子宫内膜炎是一种常见的母猪产科疾病。在屡配不孕的淘汰母猪中50%以上是本病造成,给养猪业带来很大损失。临床上多应用抗菌药物治疗,由于大量抗生素的长期应用,致使病原菌抗药性增强,治疗效果不尽如人意[1-2]。为了提高对母猪子宫内膜炎的治疗效果,我们根据中医中药学理论研发出复方蟾酥注射液(国家发明专利复方蟾酥注射液及其制备方法。专利号:ZL 2014 1 0716222.3)。作为抗病毒、细菌和增强免疫力的双重功效的特效药物制剂,经我省多个规模化猪场的临床推广应用,对母猪子宫内膜炎疗效显著。

蟾酥注射液对原发性肝癌介入术后不良反应的防治作用

目的观察蟾酥注射液对原发性肝癌患者肝动脉化疗栓塞介入术(TACE)术后不良反应的防治作用。方法选择原发性中晚期肝癌患者80例,随机分为2组:单纯介入治疗组(对照组)40例,蟾酥注射液联合介入治疗组(治疗组)40例,2组均给予肝动脉化疗栓塞术,观察2组治疗后临床表现、肝功能损伤、骨髓抑制等情况,并进行比较。结果治疗组治疗后恶心、呕吐、发热、腹痛等症状及肝功能损伤、骨髓抑制等情况均明显轻于对照组,2组间比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论蟾酥注射液能减轻原发性肝癌TACE术后不良反应,显著提高患者生活质量,降低肝损伤及骨髓抑制情况。

蟾酥注射液联合抗生素治疗肺癌化疗后肺部感染疗效观察

目的观察蟾酥注射液对肺癌化疗后肺部感染抗生素的增效作用。方法 60例化疗后发生肺部感染的肺癌患者在接受抗生素治疗的同时,随机分成加用蟾酥注射液(治疗组)和不加用蟾酥注射液滴注(对照组)两组,每组30例,治疗后进行相关比较。结果临床疗效2组比较差异有统计学意义(P<0.05),临床症状、体征与X线片改善时间大幅缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论蟾酥注射液对肺癌化疗后肺部感染抗生素治疗,具有明显的增效作用,值得推广应用。

蟾酥注射液逆转HL60/阿霉素细胞多药耐药的机制

目的探讨蟾酥注射液(CHS)对人类白细胞多药耐药细胞系HL60/阿霉素细胞的逆转作用机制。方法 MTT法测定CHS预作用后HL60/阿霉素细胞对阿霉素的敏感性;流式细胞术考察CHS对HL60/阿霉素细胞周期的影响;免疫组化考察CHS对HL60/阿霉素细胞NF-κB、MRP、GST-π、iNOS蛋白表达的调节作用。结果 CHS可将阿霉素对HL60/阿霉素细胞的IC50值由34.1971μmol/L降至17.4393μmol/L,逆转倍数为1.9609倍;FCM显示CHS作用后HL60/阿霉素阻滞于G0/G1期、G2/M期,降低进入S期比例,并出现凋亡峰;免疫组化结果显示,CHS能下调HL60/阿霉素细胞中MRP、GST-π表达,上调NF-κB、iNOS的表达。结论蟾蜍注射液逆转HL60/阿霉素细胞的多药耐药性可能是通过下调MRP、GST-π的表达,上调NF-κB、iNOS的表达,促进HL60/阿霉素细胞凋亡,从而增加HL60/阿霉素细胞对药物的敏感性。

蟾酥注射液致麻疹样型药疹1例

1临床资料 患者女，21岁。因右耳疼痛2天在外院诊断为“右耳后淋巴结炎”，予蟾酥注射液（安徽凤阳科苑药业有限公司生产，批号34020603）20mL静脉滴注3天。第2天用药后感皮肤瘙痒，出现红斑。第3天全身皮疹增多，瘙痒加重，伴纳差乏力，遂来本院就诊。

蟾酥注射液预防肺癌手术后感染临床观察

目的探讨蟾酥注射液预防肺癌手术患者术后感染的临床疗效。方法选择2014年2月至2016年12月医院收治的肺癌手术患者120例,按随机数字表法分为基础组和治疗组,各60例,基础组患者术后实施常规抗感染治疗,治疗组患者在基础组基础上加用蟾酥注射液治疗。结果治疗组患者治疗后发热、肺部感染发生率为26.67%,明显低于基础组的71.67%(P<0.05);两组术后1 d C反应蛋白、白细胞计数水平对比无明显差异(P>0.05);治疗组术后3,7 d C反应蛋白、白细胞计数水平与基础组相比明显较低(P<0.05);治疗组住院时间与基础组相比明显较短(P<0.05)。结论蟾酥注射液治疗可有效预防肺癌手术患者术后感染。

蟾酥注射液对仔猪人工感染致病性大肠杆菌的保护作用试验

为探讨蟾酥注射液对仔猪致病性大肠杆菌感染的保护作用及其与免疫功能的关系,按体重给仔猪肌肉注射高(0.2 m L/kg),中(0.1 m L/kg),低(0.05 m L/kg)三种剂量的蟾酥注射液,每天1次,连用3 d;用穿心莲注射液(0.2 m L/kg)作为药物对照组。第4天用致病性大肠杆菌进行攻毒(肌肉注射3×109CFU/m L×4.0 m L),观察仔猪腹泻情况及测定外周血T淋巴细胞亚群的变化。结果显示,高、中剂量蟾酥注射液对人工感染猪致病性大肠杆菌具有保护作用,与穿心莲注射液对照组相似,但低剂量组效果稍差。不同剂量的蟾酥注射液在用药后对T淋巴细胞阳性率及猪CD4+细胞增殖均有显著的促进作用。结论:蟾酥注射液能增强猪的非特异性免疫功能,尤其是细胞免疫功能,对猪致病性大肠杆菌感染具有保护作用。

蟾酥注射液对马立克氏病预防作用的研究

为了研究蟾酥注射液的抗病毒以及抗病毒引发肿瘤的作用,采用鸡马立克氏病动物模型来评价蟾酥注射液对马立克氏病的预防效果。蟾酥注射液能减轻马立克氏病的临床症状和病理变化,降低致病率和死亡率,延长生存率,提高保护率和增重率。应用Kaplan-Meiermethod方法估计蟾酥注射液试验组的平均生存时间为(47.43±4.16)天,病毒对照组的平均生存时间为(28.50±3.66)天;应用Fisher’sexact检验分析组间生存率,蟾酥注射液试验组与病毒对照组差异显著(P<0.05);应用时序检验thelog-ranktest法分析组间增重率,蟾酥注射液试验组与病毒对照组差异极显著(P<0.01)。研究结果显示,蟾酥注射液能提高机体的免疫力,具有抗病毒和抗肿瘤的功能,对马立克氏病有较好的预防作用。

蟾酥注射液对小鼠淋巴细胞影响的研究

为了研究蟾酥注射液对机体淋巴细胞免疫功能的影响。选择不同浓度的蟾酥注射液作为试验组,分别与小鼠的脾淋巴细胞共同孵育48h,检测细胞增殖水平的影响;用ELSIA法检测蟾酥注射液对几种重要的细胞因子(IFN-γ、IL-2和IL-12)分泌的影响;应用流式细胞技术检测蟾酥注射液对小鼠脾中T淋巴细胞CD4/CD8表达和细胞周期的影响。结果显示:蟾酥注射液在一定剂量范围内能够显著增强小鼠脾淋巴细胞的增殖能力;能够显著增强IFN-γ、IL-2和IL-12分泌;能够显著提高小鼠脾中CD4+CD8-和CD4-CD8+表型的T淋巴细胞亚群百分率;能够显著提高小鼠脾中淋巴细胞进入S期的百分率。表明蟾酥注射液在体外能够显著提高淋巴细胞的增殖及功能,说明蟾酥注射能显著地增强机体特异性免疫功能。