蠲痹汤含药血清调控线粒体自噬抑制白细胞介素1β诱导的关节软骨细胞损伤

背景:软骨细胞线粒体自噬的缺陷会引起细胞凋亡和基质消失等软骨细胞退行性病变的变化。目的:探讨蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β诱导的大鼠膝关节软骨细胞炎症反应和凋亡的影响及可能作用机制。方法:50只雄性SD大鼠随机给予生理盐水、蠲痹汤低、中、高剂量(1.24,2.48,4.96 g/kg)、塞来昔布(阳性药物),连续灌胃2周后获得含药血清。①分离软骨细胞,将其随机分为对照组、白细胞介素1β组、蠲痹汤低、中、高剂量含药血清组及阳性药物血清组。CCK-8法检测细胞存活率、免疫荧光双染检测线粒体自噬水平、免疫荧光检测磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶水平、Western blot检测PTEN诱导激酶1/Parkin通路相关蛋白和裂解的半胱氨酸蛋白酶蛋白3表达、ELISA检测炎症因子水平;②分别采用PTEN诱导激酶1 siRNA和Compound C进行干预,探究AMPK/PTEN诱导激酶1/Parkin通路在蠲痹汤含药血清调控线粒体自噬中的作用。结果与结论:①与对照组比较,白细胞介素1β组软骨细胞存活率、Ⅱ型胶原蛋白表达、磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶、PTEN诱导激酶1、Parkin和微管相关蛋白1轻链3蛋白水平以及线粒体自噬水平明显降低(P<0.05),而裂解的半胱氨酸蛋白酶蛋白3蛋白水平、白细胞介素6、白细胞介素8和肿瘤坏死因子α水平显著升高(P<0.05);与白细胞介素1β组比较,蠲痹汤各剂量含药血清组和阳性药物血清组上述各项指标呈现相反的变化(P<0.05);②PTEN诱导激酶1 siRNA可显著抑制蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β处理软骨细胞线粒体自噬的影响,降低蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症与凋亡的保护作用;Compound C逆转了蠲痹汤含药血清对白细胞介素1β处理软骨细胞中PTEN诱导激酶1/Parkin信号通路的影响。结论:蠲痹汤含药血清通过影响线粒体自噬水平来抑制软骨细胞炎症和凋亡,从而减轻白细胞介素1β诱导的软骨细胞退化,其机制可能与调控AMPK/PTEN诱导激酶1/Parkin通路有关。

蠲痹通络口服液改善2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的效用评价研究

目的 评价蠲痹通络口服液对2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的改善效应。方法 小鼠给予高脂高糖饲料联合链脲霉素(STZ)腹腔注射构建2型糖尿病小鼠模型,分别给予阳性药二甲双胍(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))、蠲痹通络口服液低剂量(3.9 g·kg^(-1)·d^(-1))与高剂量(7.8 g·kg^(-1)·d^(-1)),连续给药35 d。采用热板法检测动物疼痛潜伏期;测定受试动物空腹血糖值、胰岛素值、糖化血红蛋白值;采用生化试剂盒检测小鼠血清总胆固醇(T-CHO)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与氧化应激标志物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及氧化产物丙二醛(MDA)表达;采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6与IL-10水平;采用HE染色考察模型小鼠坐骨神经损伤情况;采用TUNEL法检测小鼠坐骨神经凋亡情况;采用Western blot法检测小鼠坐骨神经凋亡信号通路蛋白cleaved Caspase-3、Caspase-3,神经丝蛋白NF-L、NF-H与氧化应激信号通路蛋白Nrf2、HO-1表达。结果 高剂量蠲痹通络口服液缩短模型小鼠热痛反应潜伏期(P<0.01);下调模型小鼠空腹血糖与糖化血红蛋白(P<0.01),上调空腹血浆胰岛素(P<0.01);下调血清T-CHO、TG、LDL-C水平(P<0.01),上调HDL-C水平(P<0.01);下调血清中促炎因子TNF-α、IL-1β与IL-6水平(P<0.05),上调抗炎细胞因子IL-10水平(P<0.01);抑制坐骨神经结构破坏与凋亡(P<0.05);下调凋亡通路蛋白cleaved Caspase-3与Caspase-3的比值(P<0.01);上调坐骨神经组织神经丝蛋白NF-L与NF-H表达(P<0.05,P<0.01);上调抗氧化应激蛋白Nrf2与HO-1的表达(P<0.01)。结论 蠲痹通络口服液具有改善2型糖尿病模型小鼠坐骨神经细胞凋亡的作用,可能与其改善氧化应激与炎性应激作用相关。

针刺运动疗法联合自拟蠲痹止痛汤治疗梨状肌综合征的临床效果

目的探讨针刺运动疗法联合自拟蠲痹止痛汤治疗梨状肌综合征的临床效果。方法将2022年8月至2023年10月于河南中医药大学第三附属医院就诊的79例梨状肌综合征患者按随机数字表法分对照组和研究组,给予对照组针刺运动疗法治疗,给予研究组针刺运动疗法联合自拟蠲痹止痛汤治疗,观察两组治疗前后的临床症状积分、麦吉尔疼痛问卷表(MPQ)评分、髋关节Harris评分和梨状肌厚度,评价两组临床疗效。结果治疗后,研究组临床症状积分、疼痛分级指数评分、视觉模拟疼痛评分、现时疼痛强度和MPQ总分低于对照组,髋关节Harris评分高于对照组(P<0.05)。治疗后研究组患侧梨状肌厚度低于对照组(P<0.05)。研究组的临床总有效率高于对照组(P<0.05)。结论针刺运动疗法联合自拟蠲痹止痛汤治疗梨状肌综合征的效果较好,能有效改善临床症状,缓解臀部疼痛,降低患侧梨状肌厚度,促进髋关节功能恢复,且安全性较好。

乌威蠲痹汤加减对肩关节镜下冻结肩松解术后疼痛的临床观察

目的观察冻结肩通过肩关节镜下关节囊松解术后再配合乌威蠲痹汤口服临床疗效观察。方法选取符合入组条件48例风寒湿型冻结肩的病人,按照就诊顺序分为治疗组与对照组。2组患者均行肩关节镜松解,对照组在术后第1 d起就口服(国药准字H20010734)尼美舒利分散片50mg/片,每日2次;治疗组在对照组的基础上术后服用中药乌威蠲痹汤,每天2次,连服2周。术后即指导功能锻炼,记录术前、术后1月、6月、12月的肩关节功能活动度、视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分、美国肩肘外科医师协会(american shoulder and elbow surgeons,ASES)评分、constant-murley肩关节功能评分及UCLA评分,并进行最终的疗效评估。结果2组患者在入组前及相关评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组在术后1月、6月、12月VAS疼痛评分、ASES评分、constant-murley评分及UCLA评分明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肩关节镜下360°的松解结合中药乌威蠲痹汤对于风寒湿型冻结肩患者,能够有效缓解术后疼痛,促进肩关节功能的恢复。

蠲痹汤外敷对膝关节单髁置换术后快速康复的疗效观察

目的观察中药蠲痹汤外敷对膝关节单髁置换术后疼痛、肿胀、关节活动度、血栓形成及康复的影响。方法选取膝骨关节炎行单髁置换术后患者120例,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组60例。对照组术后给与止痛、预防血栓常规治疗;观察组在对照组的基础上给予蠲痹汤药物外敷治疗。术后1、3、5、7天,采用疼痛视觉模拟评分法(VAS)评估患者疼痛情况、测量患侧肿胀、膝关节活动度,术后3天通过彩超评估下肢静脉血栓形成情况,评定蠲痹汤对膝关节单髁置换术后快速康复的影响。结果术后3、5、7天观察组组在疼痛、肿胀及关节活动度方面优于对照组(P<0.05),术后3天,观察组血栓发生率低于对照组(P<0.05)。结论膝关节单髁置换术后蠲痹汤外敷能有效减轻下肢的疼痛、肿胀,提高膝关节活动度,降低血栓发生率,加速膝关节单髁置换术后患者的快速康复。

除湿蠲痛汤加味治疗膝骨关节炎急性期寒湿痹阻证31例临床观察

目的:探讨除湿蠲痛汤加味对膝骨关节炎(KOA)急性期寒湿痹阻证患者的临床效果。方法:回顾分析2021年7月~2023年2月在我院就治的KOA急性期寒湿痹阻证患者共62例,以随机数字表法分入两组各31例。对照组参考相关指南服用西药;观察组常规西药同对照组,增服除湿蠲痛汤加味治疗。两组观察4周。比较两组疗效、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)与疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、寒湿痹阻证单项症状评分。结果:4周疗程后,观察组总有效率明显高于对照组;两组WOMAC和VAS评分较治疗前下调,同时观察组下调更显著(P<0.05);两组寒湿痹阻证单项症状评分较治疗前减少,同时观察组下调更加显著(P<0.05)。结论:除湿蠲痛汤加味治疗KOA急性期寒湿痹阻证患者的临床效果明显,能改善临床症状和寒湿痹阻证单项症状评分,减轻疼痛。

温肾蠲痹汤联合柳氮磺吡啶及康复功能训练治疗强直性脊柱炎临床研究

目的:观察温肾蠲痹汤联合柳氮磺吡啶及康复功能训练治疗肾虚督寒型强直性脊柱炎(AS)的临床疗效。方法:选取60例肾虚督寒型AS患者,按随机数字表法分为对照组和观察组各30例。对照组给予柳氮磺吡啶联合康复功能训练治疗,观察组在对照组基础上给予温肾蠲痹汤治疗。2组均治疗12周。比较2组临床疗效,中医证候、腰背痛、强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)、强直性脊柱炎功能指数(BASFI)评分,枕墙距、指地距、Schober试验、胸廓活动度及实验室指标。结果:治疗后,观察组总有效率93.33%,高于对照组80.00%(P<0.05)。2组中医证候、腰背痛、BASDAI、BASFI评分均较治疗前降低(P<0.05),观察组中医证候、腰背痛、BASDAI、BASFI评分均低于对照组(P<0.05)。2组枕墙距、指地距均较治疗前减小,Schober、胸廓活动度均较治疗前增大(P<0.05),观察组枕墙距、指地距均小于对照组(P<0.05),Schober试验大于对照组(P<0.05)。胸廓活动度组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、红细胞沉降率(ESR)、C-反应蛋白(CRP)水平均较治疗前降低(P<0.05),观察组TNF-α、ESR、CRP水平均低于对照组(P<0.05)。2组白细胞介素-17 (IL-17) mRNA、白细胞介素-23 (IL-23)mRNA、辅助性T细胞17 (Th17)、Th17/调节性T细胞(Treg细胞)水平均较治疗前降低(P<0.05),Treg水平均较治疗前升高(P<0.05);观察组IL-17 mRNA、IL-23 mRNA、Th17、Th17/Treg水平均低于对照组(P<0.05),Treg水平高于对照组(P<0.05)。结论:温肾蠲痹汤联合柳氮磺吡啶及康复功能训练治疗肾虚督寒型AS,可改善患者的症状、体征及脊柱功能,抑制机体的炎症反应,提高临床疗效。

补肾蠲痹汤联合甲氨蝶呤治疗老年类风湿关节炎的临床效果

目的研究补肾蠲痹汤与甲氨蝶呤联合使用对老年类风湿关节炎的治疗效果。方法回顾性选取2019年10月—2022年10月汉川市人民医院收治的118例老年类风湿关节炎患者的临床资料,以不同治疗方式分为两组,对照组(58例)给予口服甲氨蝶呤片治疗,观察组(60例)采用口服甲氨蝶呤片+补肾蠲痹汤治疗。比较两组晨僵时间及中医证候积分、视觉模拟评分法、类风湿性关节炎28个关节疾病活动评分、健康评估问卷评分、炎症因子水平、不良反应、治疗有效率。结果治疗后,观察组晨僵时间短于对照组,中医证候积分、视觉模拟评分法评分、类风湿性关节炎28个关节疾病活动评分及健康评估问卷评分低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,观察组红细胞沉降率、类风湿因子、C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6水平低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。治疗后,两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗有效率为95.00%(57/60),高于对照组的82.76%(48/58),差异有统计学意义(χ^(2)=4.505,P<0.05)。结论与单独使用甲氨蝶呤相比,补肾蠲痹汤与甲氨蝶呤联合使用在改善老年类风湿关节炎的临床症状方面具有更显著的优势,还能有效降低炎症因子水平,同时不增加不良反应的发生风险。

蠲痹汤合肩三针电针对关节镜下肩袖损伤修复术后镇痛及抗炎的作用机制研究

目的 探讨蠲痹汤合肩三针电针对关节镜下肩袖损伤修复术后镇痛及抗炎的作用机制。方法 选择100例寒湿痹阻型肩袖损伤患者为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(50例,脱落3例)、治疗组(50例,脱落2例)。两组均予全关节镜下肩袖损伤修复术,术后予玻璃酸钠注射液腔内注射、常规康复锻炼;治疗组再予蠲痹汤合肩三针电针治疗。分析两组术后1周、2周的镇痛效果及抗炎作用,治疗5周中用药安全性,术后8周的总有效率。采用视觉模拟评分法(visual analogue scale, VAS)评估肩关节疼痛程度。肩关节功能(肩关节活动范围、肩关节肌力强弱、日常生活能力)采用中文版Constant-Murley评分量表评估。血清疼痛指标P物质(substance P,SP)采用化学发光免疫分析法检测,β-内咖肽(β-endorphin, β-EP)采用酶联免疫吸附法检测。血清炎症因子白介素(interleukin, IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α及超敏C反应蛋白(high-sensitivity C reactive protein, hs-CRP)采用酶联免疫吸附法检测。结果 术后8周疗效评估,总有效率对照组为91.5%(43/47)、治疗组为100.0%(48/48),组间差异显著(P<0.05)。经不同治疗2周后,两组VAS评分、血清(SP、β-EP、IL-6、TNF-α、hs-CRP)水平均显著下降(P<0.05);术后(1周、2周),治疗组VAS评分、血清(SP、β-EP、IL-6、TNF-α、hs-CRP)水平均低于同期对照组,组间差异显著(P<0.05);术后8周,两组肩关节疼痛程度评分低于同组治疗前(P<0.05),肩关节活动范围、肩关节肌力强弱、日常生活能力评分高于同组治疗前(P<0.05),治疗组患者关节疼痛程度评分低于对照组P<0.05,肩关节活动范围、肩关节肌力强弱、日常生活能力评分高于对照组(P<0.05)。两组治疗过程中总不良反应率组间比较(P>0.05)。结论 蠲痹汤联合肩三针电针对关节镜下肩袖损伤修复术后疗效显著,安全可靠,能快速缓解患者术后肩关节疼痛、改善肩关节功能、提高日常生活能力;其机制可能与下调血清SP、β-EP、IL-6、TNF-α、hs-CRP水平相关。

基于肌筋膜理论指导下的针刺联合蠲痹汤治疗膝骨关节炎的临床疗效

目的:基于肌筋膜理论指导下的针刺联合蠲痹汤加减治疗寒湿痹阻证膝骨关节炎的临床效果。方法:选取2022年8月至2023年8月期间在漳州市中医院治疗的80例寒湿痹阻证膝骨关节炎患者作为研究对象,按照随机数字表法将患者随机分为对照组与观察组,各40例。其中采用蠲痹汤加减治疗作为对照组,采用蠲痹汤加减治疗的基础上联合基于肌筋膜理论指导下的针刺法治疗作为观察组。观察两组患者在治疗效果、中医证候积分、疼痛情况、膝骨关节炎指数、心理状态以及不良反应中的情况。结果:观察组患者的治疗总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患者各项中医证候积分(瘦弱少力、骨节肥大、头晕耳鸣)均较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患者视觉模拟疼痛评分(VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分均较对照组低,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患者焦虑自评量表、抑郁自评量表评分均较对照组高,差异具有统计学意义(P<0.05);两组患者不良反应率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:基于肌筋膜理论指导下的针刺法联合蠲痹汤加减治疗膝骨关节炎寒湿痹阻证的疗效显著优于对照组,观察组的治疗方案能够显著缓解患者疼痛等临床表现、改善患者心理状态,并且出现的不良反应情况较少,安全可靠。

蠲毒化浊益肾汤预防年轻乳腺癌化疗相关卵巢功能损伤的临床研究

目的评价蠲毒化浊益肾汤预防年轻乳腺癌患者化疗相关卵巢功能损伤的效果。方法63例经病理确诊的年轻乳腺癌患者,采用随机数字表法分为治疗组(31例)和对照组(32例)。对照组采用单纯化疗,治疗组化疗期间联合蠲毒化浊益肾汤口服。比较两组化疗后月经情况,化疗后围绝经期症状,血清雌二醇(E_(2))、卵泡刺激素(FSH)水平及低抗苗勒管激素(AMH)发生率。结果治疗组化疗后月经正常率29.03%,月经减少率54.84%,闭经率16.13%;对照组化疗后月经正常率12.50%,月经减少率43.75%,闭经率43.75%。两组化疗后月经变化情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组闭经患者化疗后(4.40±1.14)个月发生闭经晚于对照组的(2.50±0.94)个月,具有显著性差异(P<0.05)。化疗后,治疗组22.58%患者出现围绝经期症状,对照组50.00%患者出现围绝经期症状;两组化疗后有围绝经期症状患者占比有统计学差异(P<0.05)。化疗前治疗组和对照组血清E_(2)[(49.65±15.27)pg/ml VS(46.06±12.99)pg/ml]、FSH[(6.15±1.78)U/L VS (5.93±1.55)U/L]比较均无统计学差异(P>0.05)。化疗后6个月治疗组血清E_(2)水平为(27.01±7.89)pg/ml,血清FSH水平为(21.94±10.54)U/L;对照组血清E_(2)水平为(19.64±8.55)pg/ml,血清FSH水平为(32.91±17.81)U/L。治疗组血清E_(2)下降水平少于对照组,血清FSH上升水平少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组化疗后1年低AMH发生率35.48%(11/31),对照组化疗后1年低AMH发生率62.50%(20/32),两组比较差异具有统计学意义(χ^(2)=4.598,P=0.032<0.05)。结论年轻乳腺癌患者化疗期间服用蠲毒化浊益肾汤对卵巢功能具有保护作用,可减少月经紊乱及闭经的发生率、围绝经期症状的发生率及血清低AMH发生率,抑制血清E_(2)下降及FSH上升。

蠲瘤散结方对人肺腺癌A549细胞增殖和糖酵解的调控作用及机制研究

目的研究蠲瘤散结方对肺腺癌A549细胞增殖和糖酵解得影响,并探讨其潜在的分子机制。方法CCK-8法(cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度蠲瘤散结方(2、4、6、8、10、12 mg·mL^(-1))处理A549细胞24 h和48 h后的细胞活力。将A549细胞分为对照组和蠲瘤散结方低、高(3、6 mg·mL^(-1))浓度组,加药干预24 h,细胞克隆形成实验检测A549细胞增殖情况;流式细胞术检测A549细胞周期;试剂盒检测细胞上清液中葡萄糖消耗量、乳酸生成水平;测量仪检测细胞上清液酸碱度(potential of hydrogen,pH值);实时荧光定量逆转录PCR(real-time RT-PCR,RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(western blot,WB)检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷酸化的蛋白激酶B(phosphorylation protein kinase B,p-AKT)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、葡萄糖转运体1(facilitative glucose transporter,Glut1)、己糖激酶2(hexokinase2,HK2)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)基因和蛋白的表达。使用AKT激活剂后,试剂盒检测细胞上清液液中葡萄糖消耗量、乳酸生成水平;pH测量仪检测细胞上清液pH值;CCK-8检测A549细胞增殖,RT-qPCR和Western blot检测AKT(p-AKT)、Hif-1α、Glut1、HK2、PKM2、LDHA基因和蛋白的表达。结果蠲瘤散结方抑制A549细胞增殖(P<0.05),与对照组比较,蠲瘤散结方低、高(3、6 mg·mL^(-1))浓度组细胞克隆形成率降低(P<0.05,P<0.01),G0/G1期细胞比率下降(P<0.05,P<0.01),细胞上清液中葡萄糖消耗量以及乳酸生成量下降(P<0.05,P<0.01),AKT(p-AKT)、Hif-1α、Glut1、HK2、PKM2、LDHA基因和蛋白的表达下降(P<0.05,P<0.01)。使用AKT激活剂后,与蠲瘤散结方高浓度组比较,蠲瘤散结方联合AKT激活剂用药组细胞上清液葡萄糖消耗量和乳酸生成量上升(P<0.05,P<0.01),pH值下降(P<0.05),细胞增殖活力上升(P<0.05),AKT(p-AKT)、Hif-1α、Glut1、HK2、PKM2、LDHA基因和蛋白的表达上升(P<0.05)。结论蠲瘤散结方对A549细胞的增殖和糖酵解具有抑制作用,其机制可能与调控AKT信号通路有关。

清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的UPLC特征图谱建立及成分分析

目的建立清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的特征图谱,初步推断该方中影响临床治疗效果的主要挥发油类活性成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取清上蠲痛汤标准汤剂中挥发油,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立15批样品的超高效液相色谱(UPLC)特征图谱并进行相似度评价;采用超高效液相色谱四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF/MS)法对标准汤剂挥发油类成分进行指认、鉴定;采用气质联用(GC-MS)法分析其挥发油类成分组成。结果15批清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的UPLC特征图谱的相似度在0.949~0.997之间;共得到12个共有峰,经UPLC-Q-TOF/MS鉴定主要成分为甲基丁香酚、E-藁本内酯、E-正丁烯基苯酞等。GC-MS共鉴定出23个成分,主要为3,4,5-三甲氧基甲苯、百秋李醇、Z-藁本内酯等。结论建立了清上蠲痛汤标准汤剂挥发油的特征图谱,初步推断甲基丁香酚、藁本内酯、E-正丁烯基苯酞、百秋李醇、3,4,5-三甲氧基甲苯可能是影响清上蠲痛汤挥发油临床治疗效果的主要活性成分。

蠲哮汤调节三型固有淋巴样细胞治疗肥胖哮喘小鼠机制

目的探讨蠲哮汤(Juanxiao decotion,JXD)调节三型固有淋巴样细胞(type 3 innate lymphoid cells,ILC3s)治疗肥胖型哮喘的可能作用机制。方法60只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组(60%高脂饲料^(+)OVA)、JXD组(低、中、高剂量分别为8.5、17、34 g/kg)、地塞米松组(1 mg/kg),每组10只。除正常组,其余组高脂饲料喂养12周后,OVA致敏及雾化激发建立肥胖哮喘模型。首次雾化起,JXD低、中、高剂量组及地塞米松组给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,持续7 d。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺部病理改变,全自动生化仪检测血脂四项及肺泡灌洗液(alveolar lavage fluid,BALF)炎症细胞分类计数,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测BALF和血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)水平,肺组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)、C-C趋化因子受体17(CCL17)水平,流式细胞术分析肺和外周血中IL-17A^(+)ILC3、IL-22^(+)ILC3水平,Western blot检测肺组织中STAT3蛋白磷酸化水平。结果与正常组相比,模型组小鼠气道炎性细胞浸润,气道壁增厚,经地塞米松和JXD中、高剂量干预后小鼠肺部炎症情况得到改善,其中高剂量效果更明显。与正常组相比,模型组小鼠肺组织中IL-1β、IL-17A^(+)ILC3、IL-13、CCL17水平显著升高(P<0.05),IL-22^(+)ILC3比例和P-STAT3蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,经JXD中、高剂量干预后肺组织中IL-1β、IL-17A^(+)ILC3、IL-13、CCL17水平显著下降,IL-22^(+)ILC3比例和P-STAT3表达明显增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论JXD能改善肥胖哮喘小鼠机体炎症环境,减轻肺部炎症和过敏反应,其机制可能与调节ILC3分泌细胞因子功能有关。

益气蠲痹方治疗脾失健运型膝骨关节炎性滑膜炎临床研究

目的:观察益气蠲痹方治疗脾失健运型膝骨关节炎性滑膜炎(knee synovitis,KS)的临床疗效。方法:将70例患者随机分为试验组(35例,后脱落3例,纳入32例)和对照组(35例,后脱落5例,纳入30例)。对照组给予塞来昔布胶囊口服,试验组予以益气蠲痹方口服,两组连续治疗3周。评价治疗前后症状评分、视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(Western Ontario and McMaster Universities Osteoarthritis Index,WOMAC)评分、膝关节肿胀程度评分等情况,评估不良反应发生情况。结果:治疗后试验组总有效率[93.75%(30/32)]高于对照组[83.33%(25/30)](P<0.01);两组治疗后VAS评分、WOMAC评分及关节肿胀程度评分相比治疗前均降低(P<0.05),且试验组下降幅度大于对照组(P<0.05)。治疗后对照组症状总评分及关节肿胀、关节疼痛、关节活动不利及乏力等症状评分较治疗前降低(P<0.05),但腹胀纳呆、便溏、面黄肌瘦症状评分变化不明显(P>0.05);试验组症状总评分及各症状评分均较治疗前降低(P<0.05);两组在关节活动不利症状评分的改善方面效果相当(P>0.05),但试验组在关节肿胀、关节疼痛、腹胀纳呆、便溏、面黄肌瘦、乏力症状评分的改善方面优于对照组(P<0.01)。结论:益气蠲痹方治疗脾失健运型KS患者,在改善患者腹胀纳呆、便溏、面黄肌瘦等伴随症状上优势明显,并且在治疗期间未出现明显不良反应。

加减益肾蠲痹汤治疗早期活动性强直性脊柱炎肾虚督寒证的临床疗效观察

目的:观察加减益肾蠲痹汤对于早期活动性强直性脊柱炎(AS)肾虚督寒证的临床疗效。方法:选取符合纳入标准的肾虚督寒证AS患者52例,使用区组随机分组法将其随机分为对照组及观察组,每组各26例。对照组口服双氯芬酸钠缓释片,1次/d,75 mg/次;柳氮磺吡啶肠溶片,3次/d,75 mg/次,同时口服安慰汤剂。观察组在对照组治疗方案基础上服用加减益肾蠲痹汤治疗;两组均治疗4周。比较两组治疗前后MASEI评分、骶髂关节血流分级、RI指数、BASDAI评分及中医证候积分变化情况,监测不良反应发生情况并比较两组临床疗效。结果:观察组总有效率96.2%(25/26)优于对照组总有效率73.1%(19/26),差异具有统计学意义(P<0.05);与治疗前比较,两组患者治疗后MASEI评分、骶髂关节血流分级及RI指数、BASDAI评分、中医证候积分均改善,差异具有统计学意义(P<0.05),且观察组上述指标优于对照组(P<0.05);对照组不良反应发生率23.1%(6/26),观察组不良反应发生率15.4%(4/26),两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:加减益肾蠲痹汤可有效缓解早期活动性AS肾虚督寒证患者的附着点炎,改善骶髂关节炎症,降低疾病活动度,且安全性较高。

《临证指南医案》“通阳蠲饮法”辨治痰饮思路探析

探究叶天士“通阳蠲饮法”治疗痰饮的方药规律。叶天士认为痰饮病机属阳衰阴盛,饮邪上逆是痰饮病的典型特征。而治则方面,法遵仲景“温药和之”又多有发挥,认为温不是方法,而是目的,拓展温的概念为温阳、通阳、温养。治法方面,细化“通阳蠲饮法”为轻苦微辛开宣太阳、苦降辛通理运中阳、辛热淡渗温固肾阳。阐释叶天士治痰求本、重视宣畅气机、辨证四诊合参、详于三因制宜的个人特色。文章通过总结《临证指南医案》痰饮类案,管窥叶天士“通阳蠲饮法”治疗痰饮的方药规律,不揣谫陋,以飨诸君。

蠲痹汤基准样品指纹图谱的建立及4种成分的含量测定

目的建立蠲痹汤基准样品的指纹图谱,同时对龙胆苦苷、蛇床子素、甘草酸铵、11-羰基-β-乙酰乳香酸4种成分进行含量测定。方法采用超高效液相色谱法,明确其指纹图谱的峰归属和相似度范围。分别对龙胆苦苷、蛇床子素、甘草酸铵、11-羰基-β-乙酰乳香酸4种成分进行测定。结果15批蠲痹汤基准样品指纹图谱确定特征峰10个,相似度值均>0.90。龙胆苦苷、蛇床子素、甘草酸铵、11-羰基-β-乙酰乳香酸分别在相应范围内与其峰面积呈良好线性关系(r≥0.999);其平均回收率(n=9)分别为99.9%、98.7%、97.5%、100.5%,RSD≤2.5%。结论该方法具有较高的灵敏度、良好的重复性,为蠲痹汤基准样品及复方制剂质量标准的研究提供依据。

蠲痹方含药血清对绝经后膝骨关节炎大鼠软骨细胞自噬的影响及其作用机制

目的:探讨蠲痹方含药血清对绝经后膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)大鼠软骨细胞自噬的影响及其作用机制。方法:①绝经后KOA动物模型的建造和蠲痹方含药血清的制备。采用摘取大鼠卵巢,并切断膝关节内侧副韧带、前交叉韧带,摘除膝关节内侧半月板的方法,建造绝经后KOA大鼠模型。造模成功后,对模型大鼠进行蠲痹方浓缩液灌胃,制备蠲痹方含药血清。②大鼠软骨细胞的提取。分别取正常大鼠和模型大鼠的膝关节软骨分离、提取软骨细胞。③蠲痹方含药血清最佳作用浓度筛选。将模型大鼠软骨细胞分为模型组及1.25%、2.5%、5%、10%、20%含药血清组6组,除模型组外,其余各组分别加入相应体积分数的蠲痹方含药血清干预24 h。检测各组软骨细胞的活力,筛选蠲痹方含药血清最佳作用浓度。④蠲痹方含药血清对大鼠软骨细胞G蛋白耦联受体30(G protein-coupled receptor 30,GPR30)表达影响的检测。将模型大鼠软骨细胞分为模型组及1.25%、2.5%、5%、10%含药血清组,并取正常大鼠软骨细胞设为空白组。除模型组和空白组外,其他各组软骨细胞用相应体积分数的蠲痹方含药血清干预24 h。检测各组大鼠软骨细胞GPR30的相对表达量。⑤蠲痹方含药血清对大鼠软骨细胞自噬相关蛋白表达和AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路影响的检测。将模型大鼠软骨细胞分为模型组、含药血清组、含药血清+Compound C组、Compound C组,并取正常大鼠软骨细胞设为空白组。除模型组和空白组外,含药血清组、含药血清+Compound C组、Compound C组分别用10%蠲痹方含药血清、10%蠲痹方含药血清+Compound C及Compound C干预24 h。检测各组软骨细胞中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3β(microtubule-associated protein light chain 3 beta,MAPLC3β)、Beclin-1、p62,及AMPK/mTOR信号通路相关蛋白磷酸化AMP活化蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)的相对表达量。结果:①动物模型鉴定结果。造模8周后,可见造模大鼠膝关节表面软骨毛糙或缺损,关节间隙变窄,滑膜增生,绝经后KOA大鼠模型造模成功。②软骨细胞鉴定结果。甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定结果显示,所提取的细胞符合软骨细胞特征。③蠲痹方含药血清最佳作用浓度筛选结果。5%、10%、20%含药血清组细胞活力均高于1.25%、2.5%含药血清组和模型组(LSD-t=6.767,P=0.003,LSD-t=7.666,P=0.002,LSD-t=5.091,P=0.007;LSD-t=5.080,P=0.007,LSD-t=6.690,P=0.003,LSD-t=3.433,P=0.027;LSD-t=7.590,P=0.002,LSD-t=8.200,P=0.001,LSD-t=6.031,P=0.004);10%含药血清组细胞活力高于5%含药血清组和20%含药血清组(LSD-t=3.204,P=0.033,LSD-t=4.671,P=0.010)。④蠲痹方含药血清对大鼠软骨细胞GPR30表达影响的检测结果。模型组GPR30相对表达量低于空白组及5%、10%含药血清组(LSD-t=5.695,P=0.005,LSD-t=5.400,P=0.006,LSD-t=9.006,P=0.001),5%、10%含药血清组GPR30相对表达量均高于1.25%含药血清组(LSD-t=2.782,P=0.049,LSD-t=4.473,P=0.011),10%含药血清组GPR30相对表达量高于2.5%含药血清组(LSD-t=4.544,P=0.011)。⑤蠲痹方含药血清对大鼠软骨细胞自噬相关蛋白表达影响的检测结果。模型组、含药血清+Compound C组、Compound C组MAPLC3β相对表达量均低于空白组、含药血清组(LSD-t=6.855,P=0.002,LSD-t=8.675,P=0.001;LSD-t=5.096,P=0.007,LSD-t=5.931,P=0.004;LSD-t=5.560,P=0.005,LSD-t=5.354,P=0.006);模型组、Compound C组MAPLC3β相对表达量均低于含药血清+Compound C组(LSD-t=4.627,P=0.010,LSD-t=8.677,P=0.001)。模型组、Compound C组Beclin-1相对表达量低于空白组、含药血清组、含药血清+Compound C(LSD-t=12.912,P=0.000,LSD-t=7.401,P=0.002,LSD-t=5.360,P=0.006;LSD-t=2.950,P=0.042,LSD-t=5.484,P=0.005,LSD-t=3.903,P=0.018);含药血清+Compound C组Beclin-1相对表达量低于空白组(LSD-t=26.840,P=0.000)。含药血清组、空白组p62相对表达量低于模型组、含药血清+Compound C组、Compound C组(LSD-t=3.925,P=0.017,LSD-t=3.985,P=0.019,LSD-t=0.016,P=0.001;LSD-t=3.149,P=0.035,LSD-t=5.094,P=0.007,LSD-t=8.740,P=0.001),含药血清+Compound C组p62相对表达量低于Compound C组(LSD-t=3.455,P=0.026)。⑥蠲痹方含药血清对大鼠软骨细胞AMPK/mTOR信号通路影响的检测结果。含药血清组p-AMPK相对表达量高于模型组、Compound C组(LSD-t=3.623,P=0.022,LSD-t=6.537,P=0.003),空白组p-AMPK相对表达量高于模型组、含药血清+Compound C组、Compound C组(LSD-t=4.149,P=0.014,LSD-t=2.791,P=0.049,LSD-t=5.734,P=0.004),含药血清+Compound C组p-AMPK相对表达量高于Compound C组(LSD-t=5.958,P=0.004)。空白组、含药血清组、含药血清+Compound C组p-mTOR相对表达量均低于模型组(LSD-t=8.722,P=0.001,LSD-t=8.849,P=0.001,LSD-t=5.558,P=0.005),含药血清组、空白组p-mTOR相对表达量均低于含药血清+Compound C组、Compound C组(LSD-t=4.201,P=0.014,LSD-t=10.030,P=0.001;LSD-t=4.879,P=0.008,LSD-t=9.782,P=0.001),含药血清+Compound C组p-mTOR相对表达量低于Compound C组(LSD-t=6.934,P=0.002)。结论:蠲痹方含药血清作用于绝经后KOA大鼠软骨细胞,可增加细胞活力,并通过上调MAPLC3β、Beclin-1的表达和抑制p62的表达增强细胞自噬能力;其作用机制可能与促进GPR30表达,上调AMPK磷酸化水平,下调mTOR磷酸化水平,激活GPR30和AMPK/mTOR信号通路有关。

蠲郁安神方治疗肝郁气滞型失眠伴抑郁障碍

目的 观察蠲郁安神方治疗肝郁气滞型失眠伴抑郁障碍的临床疗效。方法 收集肝郁气滞型失眠伴抑郁障碍的患者60例,随机分为观察组和对照组,各30例。对照组单纯口服西药右佐匹克隆治疗,观察组采用蠲郁安神方加减进行治疗,2组均治疗15 d为1个疗程,共治疗2个疗程。比较2组治疗前后匹兹堡睡眠指数量表(PSQI)评价睡眠情况,采用汉密顿抑郁量表(HAMD)评价抑郁状况,使用中医证候积分表评价临床症状。结果 治疗后,观察组肝郁气滞型失眠伴抑郁障碍患者临床总有效率(90.0%,27/30)高于对照组(63.3%,19/30),观察组PSQI总评分、HAMD总评分和中医证候积分均显著低于对照组(P <0.05)。结论 蠲郁安神方治疗肝郁气滞型失眠伴抑郁障碍具有较好的临床疗效,值得临床推广。