温肺化痰方对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者外周血中性粒细胞弹性蛋白酶、表皮生长因子受体表达的影响

目的观察温肺化痰方药对痰湿蕴肺证慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)急性加重期患者外周血中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)和表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)表达的影响。方法将60例COPD急性加重期痰湿蕴肺证患者随机分为治疗组和对照组各30例。两组患者均接受西医基础治疗,治疗组加用温肺化痰方药,对照组加用氨溴索针剂,10d为1个疗程。观察并比较两组临床疗效,治疗前后分别检测两组患者血清NE、EGFR水平。结果两组临床疗效的分布比较,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组优于对照组;与治疗前比较,两组治疗后血清NE和EGFR均显著降低(P<0.05);治疗组血清EGFR降低值显著小于对照组(P<0.05)。结论温肺化痰方药可能通过调节NE、EGFR的表达,改善COPD急性加重期患者的气道黏液高分泌状态。

硫酸镁联合硫酸沙丁胺醇雾化吸入对支气管哮喘急性发作期患儿外周血中性粒细胞弹性蛋白酶水平的影响研究

目的研究硫酸镁联合硫酸沙丁胺醇雾化吸入对支气管哮喘急性发作期患儿外周血中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）水平的影响。方法将148例支气管哮喘急性发作期患儿分为一般组与联合组，各74例。一般组采用硫酸沙丁胺醇雾化吸入治疗，联合组在一般组基础上加用硫酸镁雾化吸入治疗，观察两组疗效。结果联合组治疗总有效率97．30％，一般组72．97％，P〈0．05；两组治疗后FEV．、FVC、PEF肺功能指标与治疗前比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05），且联合组治疗后改善程度明显大于一般组（均P〈0．05）；两组治疗后NE含量与治疗前相比，均明显降低（均P〈0．05），联合组治疗后NE含量降低程度明显大于一般组[（0．64±0．15）比（1．32±0．17），P〈0．05]。结论采用硫酸镁联合硫酸沙丁胺醇雾化吸入治疗支气管哮喘急性发作期患儿安全有效，可降低患儿外周血NE含量，改善其慢性炎症体质。

血清中性粒细胞弹性蛋白酶与育龄期女性复发性单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的关系

目的探讨血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)与育龄期女性复发性单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的关系。方法纳入2021年1月至2022年4月天津市第一中心医院就诊的100例单纯疱疹病毒感染患者,所有患者均在入院后接受统一的抗病毒治疗方案,测定所有患者治疗前及治疗1、2、3、4个月时血清NE水平。将55例治疗有效患者纳入有效组,45例治疗无效患者纳入无效组。比较分析两组患者的基线资料,通过单因素分析及多因素logistic回归模型,分析血清NE与单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的关系。结果无效组患者的性生活频次、血清NE、C反应蛋白(CRP)高于有效组,白细胞介素-2(IL-2)水平低于有效组,差异有统计学意义(P<0.05)。无效组患者治疗前及治疗1、2、3、4个月血清NE水平均高于有效组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,性生活频次、CRP、治疗前NE、治疗1个月NE、治疗2个月NE、治疗3个月NE及治疗4个月NE是影响单纯疱疹病毒感染抗病毒治疗效果的相关因素(P<0.05)。经限制性立方样条模型(RCS)分析,单纯疱疹病毒感染患者治疗前血清NE水平与抗病毒治疗无效的关联呈非线性曲线型剂量反应关系,当治疗前血清NE水平>113.865ng/ml时,患者抗病毒治疗无效风险随指标水平升高而逐渐增加。结论单纯疱疹病毒感染患者血清NE水平与抗病毒治疗效果有关,治疗前血清NE水平高可能提示患者抗病毒治疗无效的风险较高。

弹性蛋白酶调节中性粒细胞炎性募集的功能研究

目的:探索中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对中性粒细胞炎性募集的影响。方法:采用外源性弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠盐预处理小鼠骨髓来源的中性粒细胞,通过腹膜炎过继性迁移、细胞体外趋化、流动室黏附、免疫荧光染色、细胞伸展等实验,检测NE的抑制对中性粒细胞体内炎性募集、体外趋化、牢固黏附、细胞极化与伸展能力的影响;利用流式细胞术及鲁米诺化学发光系统检测NE的抑制对中性粒细胞吞噬及活性氧(ROS)释放能力的影响。结果:西维来司钠盐预处理显著减弱了中性粒细胞体内炎性募集(P<0.001);减弱了中性粒细胞在体外趋化过程中对催化剂方向性的感知(P<0.05),减慢了趋化速率(P<0.05),降低了趋化距离(P<0.05);减少了中性粒细胞在炎性内皮细胞表面形成牢固黏附的能力(P<0.000 1),抑制了中性粒细胞对细菌的吞噬能力(P<0.01);但对中性粒细胞的伸展、极化及ROS的释放均无显著影响。结论:NE的抑制显著损害了中性粒细胞在体内外的炎性募集级联反应及吞噬作用,但对中性粒细胞的伸展、极化、ROS释放等功能无显著影响。

中性粒细胞弹性蛋白酶在支气管扩张中的生物学功能及中药干预研究进展

中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)是中性粒细胞原代颗粒中的一种主要蛋白酶,参与支气管扩张复杂病理的发生、发展,具有调节炎症反应、控制感染、增加黏液分泌、降解细胞外基质和细胞因子及损害免疫系统等多种生物学功能,与疾病预后有关,可作为临床治疗结果的预测因子和可能的治疗靶点。尚未有大量高级别临床研究证明内源性及外源性NE抑制剂对支气管扩张的疗效。中医药发挥其多靶点、多途径、精准施治等作用干预NE介导的支气管扩张,在改善临床症状、减少急性加重次数、减轻气道炎症反应等方面具有优势。该文综述NE在支气管扩张中的主要生物学功能,以及中医药干预NE介导的气道炎症的进展,期望为临床和科研提供有价值的参考依据。

中性粒细胞弹性蛋白酶在支气管扩张症中的研究进展

支气管扩张症(BE)主要是中性粒细胞驱动的慢性气道炎症,中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)是中性粒细胞储存并释放水解功能最为强大的蛋白酶,通过损伤气道黏膜屏障、抑制气道免疫反应以及调节炎症等多种途径参与BE的发病机制。NE是目前BE最具潜力的生物标志物,针对NE靶向疗法正在开发过程中。本文就NE的特性、参与BE的作用机制、作为潜在生物标志物及治疗靶点的应用前景方面进行综述,期望为BE诊断、评估及个性化治疗提供新的视野。

中性粒细胞弹性蛋白酶在急性呼吸窘迫综合征中的研究现状

中性粒细胞弹性蛋白酶是中性粒细胞嗜天青颗粒中的主要蛋白酶,在抵御感染中发挥重要作用。然而,大量释放的中性粒细胞弹性蛋白酶可能导致过度炎症反应,加剧肺组织损伤,诱发急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的发展。西维来司他钠作为一种特异性中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂,在缓解中性粒细胞弹性蛋白酶诱发的病理过程中具有明显的潜力,并在临床急性呼吸窘迫综合征的治疗中受到广泛的关注。本文将深入探讨中性粒细胞弹性蛋白酶的生物学特性及其在急性呼吸窘迫综合征病理生理中的作用机制,以及西维来司他钠在急性呼吸窘迫综合征临床管理中的应用,为深入理解该药物在急性呼吸窘迫综合征治疗中的作用机制提供重要线索。

中性粒细胞弹性蛋白酶及其抑制剂在脓毒症相关ARDS中作用的研究进展

脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是脓毒症严重并发症之一,其患病率和死亡率居高不下。中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在其病理生理过程中发挥了重要作用,参与了肺泡-毛细血管屏障破坏、氧化应激和炎症反应、自噬和细胞死亡等多个过程。西维来司他钠作为唯一上市的特异性NE抑制剂(NEI),在减轻炎症反应和保护肺组织中显示出巨大的潜力。该文主要对NE及NEI在脓毒症相关ARDS中的作用机制进行概述,并简要探讨脓毒症相关ARDS和西维来司他钠的潜在治疗方案,以期为临床治疗提供参考。

中性粒细胞弹性蛋白酶与慢性阻塞性肺疾病关系的研究进展

慢性阻塞性肺疾病是一种常见且多发的呼吸系统疾病,以慢性炎症为主要特征,而中性粒细胞弹性蛋白酶作为一种重要炎性蛋白酶,它能消化、水解细胞外基质和上皮连接结构,损害气道上皮完整性、损伤肺组织,在该病的演变进展过程中具有重要意义。文章对两者的相关性进行综述与探讨,为中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂作为慢性阻塞性肺疾病临床用药提供新视野及一定理论基础。

血液透析患者动静脉内瘘狭窄与中性粒细胞弹性蛋白酶水平的相关性

目的探讨血液透析患者动静脉内瘘狭窄与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)水平的相关性。方法回顾性选取2020年1月至2022年3月复旦大学附属中山医院青浦分院肾内科收治的维持血液透析的患者共109例,依据静脉内瘘建立后6~8周,经超声检查确认血液透析患者动静脉内瘘狭窄程度,动静脉内瘘狭窄超过50%的为狭窄组(n=61),动静脉内瘘狭窄低于50%的为非狭窄组(n=48)。对两组患者生化指标和血清中NE水平进行对比;分析动静脉内瘘狭窄与NE水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清中NE水平对血液透析患者动静脉内瘘狭窄的诊断价值;Logistic回归分析影响血液透析患者动静脉内瘘狭窄的危险因素。结果两组患者的年龄、性别构成比、糖尿病史、脑血管疾病史、冠状动脉疾病史、外周动脉疾病史、维持透析时间和透析超滤量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组患者的血红蛋白、超敏C-反应蛋白、白细胞计数、钙、磷、全段甲状旁腺素、尿酸、白蛋白、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。狭窄组患者的中性粒细胞与淋巴细胞比率值为3.92±1.31,明显高于非狭窄组(2.87±0.96),血清铁蛋白和NE水平分别为(296.36±129.18)、(431.73±212.42)ng/mL,明显高于非狭窄组[(142.42±69.37)、(192.51±132.39)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。血液透析患者动静脉内瘘发生狭窄与NLR、SF和NE水平呈现正相关(r=0.297、0.265、0.313,P<0.05);NE水平诊断血液透析患者动静脉内瘘发生狭窄的ROC曲线下面积明显大于NLR、SF。NLR、SF、NE高表达是血液透析患者动静脉内瘘发生狭窄的危险因素。结论血清中NE水平可能与血液透析患者动静脉内瘘狭窄的发生有相关性,可作为炎症指标来预测动静脉内瘘狭窄。

Cdc42蛋白参与中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的人气道上皮细胞黏蛋白高分泌

目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)与中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)5AC高分泌的关系。方法体外培养人气道上皮细胞(16HBE),以Cdc42 siRNA和NE进行干预,将细胞分为6组:对照组、NE组、NE+Cdc42 siRNA组、Cdc42 siRNA组、阴性siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Cdc42蛋白的相对含量,ELISA和免疫荧光检测各组细胞MUC5AC蛋白的表达水平。结果与对照组相比,NE组Cdc42蛋白含量明显增加(P<0.05),细胞MUC5AC蛋白表达水平亦显著增高(P<0.001);与NE组比较,NE+Cdc42 siRNA组的MUC5AC蛋白水平显著降低(P<0.05),其Cdc42蛋白含量亦明显降低(P<0.001);Cdc42 siRNA组以及阴性siRNA组的Cdc42蛋白、MUC5AC蛋白含量相较于对照组变化不大(P>0.05)。结论Cdc42在NE诱导的气道上皮细胞黏液高分泌的形成过程中可能发挥着重要的介导作用。

中性粒细胞活化与急性肾综合征出血热疾病严重程度的相关性

目的探讨中性粒细胞活化在肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)发病机制中的作用。方法纳入21例HFRS患者(观察组)和18例健康者(对照组),按病情将观察组分为轻/中型组和重/危重型组,进行组间比较。检测各组血清中性粒细胞活化后产物包括髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、人中性粒细胞弹性蛋白酶(human neutrophil elastase,HNE)、中性粒细胞细胞外陷阱(neutrophil extracellular traps,NETs)表达水平。比较观察组和对照组,轻/中型组和重/危重型组间表达差异。结果重/危重型组血中性粒细胞计数、尿素氮、血肌酐(Scr)水平显著高于轻/中型组(均P<0.05),血小板计数(PLT)明显低于轻/中型组(P<0.05)。观察组血清MPO、HNE、NETs表达水平显著高于对照组(均P<0.05);与轻/中型组相比,重/危重型组患者血清NETs表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。HFRS血清HNE水平与Scr正相关(r=0.472,P<0.05)。结论中性粒细胞活化可能与HFRS疾病严重程度有关,抑制NETs形成可能是未来HFRS的潜在治疗靶点。

脑脊液和血浆中性粒细胞外诱捕网标志物对结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎的鉴别诊断价值

目的探讨脑脊液、血浆中性粒细胞外诱捕网(NETs)标志物对结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎的鉴别诊断价值。方法选择结核性脑膜炎患者20例纳入结核性脑膜炎组、化脓性脑膜炎患者30例纳入化脓性脑膜炎组、因鉴别诊断需要进行腰椎穿刺术的脑脊液正常患者20例纳入正常对照组。采用ELISA法检测各组脑脊液及血浆NETs标志物[中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)-DNA复合物、髓过氧化物酶(MPO)-DNA复合物]。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评价脑脊液、血浆NETs标志物对结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎的鉴别诊断价值。结果正常对照组血浆NE-DNA复合物水平比较、结核性脑膜炎组、化脓性脑膜炎组脑脊液MPO-DNA复合物、NE-DNA复合物水平依次增高(P均<0.05)。化脓性脑膜炎组血浆NE-DNA复合物水平高于结核性脑膜炎组和正常对照组(P均<0.05),结核性脑膜炎组与正常对照组比较差异无统计学意义;三组血浆MPO-DNA复合物水平比较差异无统计学意义(P均>0.05)。脑脊液NE-DNA复合物、MPO-DNA复合物鉴别结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.961、0.945,灵敏度分别为92.36%、89.44%,特异度分别88.35%、85.29%;血浆NE-DNA复合物、MPO-DNA复合物鉴别结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎的AUC分别为0.720、0.709,灵敏度分别为84.62%、80.49%,特异度分别为80.18%、73.55%。结论与化脓性脑膜炎比较,结核性脑膜炎患者脑脊液MPO-DNA复合物、NE-DNA复合物水平及血浆NE-DNA复合物水平降低;脑脊液NETs标志物检测可能有助于结核性脑膜炎与化脓性脑膜炎的鉴别诊断。

重症肺炎患儿中性粒细胞弹性蛋白酶、血管细胞黏附分子-1的表达及其预后价值分析

目的探讨重症肺炎患儿中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达及其预后价值。方法选取2020年1月—2022年1月聊城市第二人民医院收治的108例重症肺炎患儿作为研究组。另选取同期该院体检的96例健康儿童作为对照组。比较两组血清NE、VCAM-1水平。随访21 d后统计重症肺炎患儿生存情况,采用单因素分析影响重症肺炎患儿死亡的因素,并对影响患儿死亡的因素进行一般多因素Logistic回归分析,采用Pearson相关性分析血清NE、VCAM-1水平与重症肺炎患儿的儿童危重病例评分(PCIS)的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清NE、VCAM-1水平预测重症肺炎患儿死亡的价值。结果研究组NE、VCAM-1水平高于对照组(P<0.05)。死亡组与存活组性别、年龄、肺不张、胸腔积液、治疗药物、体温、心率、呼吸频率、空腹血糖、白细胞计数、中性粒细胞、肿瘤坏死因子α、降钙素原、乳酸脱氢酶比较,差异无统计学意义(P>0.05)。死亡组休克、病变累及多个肺叶构成比及APACHEⅡ评分,C反应蛋白、NE、VCAM-1水平高于存活组(P<0.05)。一般多因素Logistic回归分析结果显示:血清NE[O^R=3.762(95%CI:1.513,9.354)]、VCAM-1[O^R=3.622(95%CI:1.457,9.006)]、APACHEⅡ评分[O^R=3.267(95%CI:1.314,8.124)]、病变累及多个肺叶[O^R=3.200(95%CI:1.287,7.955)]是影响重症肺炎患儿死亡的危险因素(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清NE、VCAM-1水平与重症肺炎患儿PCIS均呈负相关(r=-0.373和-0.544,均P<0.05)。血清NE、VCAM-1联合预测的敏感性、特异性和AUC分别为80.00%(95%CI:0.593,0.933)、97.59%(95%CI:0.916,0.998)、0.919(95%CI:0.851,0.963)。结论重症肺炎患儿血清NE、VCAM-1水平均异常升高,两者与预后密切相关,临床检测血清NE、VCAM-1水平可以作为预测患儿死亡的敏感指标。

金水六君煎及其拆方含药血清对人中性粒细胞弹性蛋白酶诱导A549细胞黏液高分泌的影响

目的探讨金水六君煎及其拆方对A549细胞黏液高分泌模型黏蛋白MUC5AC、MUC5B表达的影响。方法制备金水六君煎及其拆方、生理盐水大鼠血清,将人肺腺癌细胞A549分为空白对照组、模型组、金水六君煎组、养阴组、化痰组。采用人中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)25 nmol/L诱导A549细胞黏液高分泌,20%空白大鼠血清及含药血清进行干预。CCK8法测定细胞活性,实时荧光定量PCR法(rt-PCR)检测细胞MUC5AC mRNA、MUC5B mRNA表达,Western blotting检测细胞MUC5AC mRNA、MUC5B mRNA表达。结果各组细胞活性无明显差异。与空白组比较,模型组细胞黏蛋白MUC5AC m RNA、MUC5B m RNA与蛋白表达明显增多(P <0.05或P <0.01)。与模型组比较,金水六君煎组及养阴组MUC5AC mRNA、MUC5B m RNA表达明显降低(P <0.05);金水六君煎组及化痰组MUC5AC m RNA、MUC5B m RNA表达明显降低(P <0.01)。结论人中性粒细胞弹性蛋白酶可诱导A549细胞粘蛋白高表达,成功建立黏液高分泌细胞模型。金水六君煎及其拆方含药血清可明显抑制黏蛋白MUC5AC mRNA、MUC5B mRNA与蛋白表达。

异丙酚预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤早期中性粒细胞弹性蛋白酶活性及炎性因子表达的影响

目的探讨异丙酚预处理对大鼠脑缺血再灌注(IR)损伤早期中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性及炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β表达的影响。方法健康雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组(NC组)、IR组、异丙酚低剂量组(P1组,50 mg/kg)、中剂量组(P2组,100 mg/kg)和高剂量组(P3组,150 mg/kg)。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉局灶性IR损伤模型。各异丙酚组分别于脑缺血前10min经腹腔注射相应剂量的异丙酚。大鼠脑缺血2 h、再灌注24 h给予神经功能缺损评分,采用酶联免疫吸附法检测脑组织NE活性及TNF-α和IL-1β的表达。结果各异丙酚组神经功能缺损评分明显低于IR组(均P<0.01);与NC组比较,IR组和各异丙酚组脑组织NE活性及TNF-α、IL-1β表达明显升高(均P<0.01);与IR组比较,各异丙酚组NE活性及TNF-α、IL-1β表达明显降低(均P<0.01);P2组NE活性及TNF-α、IL-1β表达明显低于P1组和P3组(均P<0.01)。结论异丙酚预处理可抑制脑组织NE活化和TNF-α、IL-1β过度表达,降低炎性反应,对脑组织IR损伤早期具有保护作用;异丙酚100 mg/kg预处理的作用最佳。

自血疗法对支气管扩张症稳定期诱导痰中性粒细胞弹性蛋白酶的影响

目的:观察自血穴位注射疗法(简称自血疗法)对支气管扩张症稳定期诱导痰中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)的影响。方法:将60例支气管扩张症稳定期患者随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组予自血疗法,对照组常规口服西药罗红霉素胶囊、匹多莫德片、盐酸氨溴索片治疗。分别观察2组患者治疗前、治疗12周后、治疗停止后3月诱导痰NE含量。结果:治疗组与对照组比较,治疗前2组NE含量无明显差异(P>0.05);2组治疗12周后及治疗停止后3月NE含量均有显著性差异(P<0.05)。结论:自血疗法对支气管扩张症稳定期诱导痰NE有抑制作用。

中性粒细胞弹性蛋白酶在银屑病患者血清及皮损中的表达

目的观察中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)在银屑病患者皮损及血清中的表达水平,探讨其相关性。方法采用双抗体夹心ELISA法对20例寻常性银屑病患者(寻常性组)血清及皮损处组织液中NE的表达量进行检测,并与20名健康体检者(对照组)比较。银屑病患者病情严重程度采用银屑病皮损面积和严重性指数(PASI)评估。结果寻常性银屑病患者血清及皮损处组织液中NE表达水平显著高于对照组(P<0.01),其中进行期寻常性银屑病患者血清及皮损组织液中NE的表达水平要显著高于静止期,差异均有统计学意义(P<0.05)。寻常性银屑病患者血清中NE的表达水平与患者相应的PASI呈正相关(P<0.01)。结论NE可能参与了银屑病的发病,并与银屑病严重程度相关。