禽流感病毒(H5N1亚型,Re-5株)血凝抑制抗原国家参考品的制备

为了研制用于禽流感病毒(AIV)H5N1亚型Re-5株重组疫苗检测的血凝抑制(HI)抗原参考品,试验采用国家现行的AIV H5亚型HI抗原制备方法,研制出AIV(H5N1亚型,Re-5株)血凝抑制抗原参考品,批号为200901。结果表明:经过8家单位对AIV(H5N1亚型,Re-5株)血凝抑制抗原协作标定,确定该批禽流感抗原的血凝效价为1∶(320±80);所研制的禽流感抗原均一稳定,无菌检验、剩余水分测定、真空度测定等各项指标均符合要求。说明该AIV(H5N1亚型,Re-5株)血凝抑制抗原可以作为国家参考品。

猪细小病毒血凝抑制试验抗原、阳性血清与阴性血清的制备与鉴定

猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)血凝抑制试验抗原、阳性血清和阴性血清在猪细小病毒制品的效力检验中不可或缺,对猪细小病毒相关生物制品的质量控制至关重要。试验采用PPV 7909株病毒同步接种PK-15细胞制备血凝抑制试验抗原,用制备的抗原乳化后免疫豚鼠制备阳性血清,同时用未免疫的阴性豚鼠制备阴性血清。对抗原、阳性血清和阴性血清进行鉴定,结果表明,制备的PPV血凝抑制试验抗原HA效价达1∶512;阳性血清HI效价达1∶1024;阴性血清HI效价小于1∶8,且特异性均良好。用制备的HI试验抗原与不同PPV疫苗株的阳性血清进行HI试验,同时,用制备的阳性血清、阴性血清与不同PPV疫苗株的灭活抗原进行HI试验。结果表明,制备的抗原与阳性血清具备良好的血清学交叉反应性,制备的阴性血清与不同疫苗株抗原均呈阴性反应,可用于PPV制品的统一评价。

鸡传染性支气管炎病毒(M41株)血凝抑制试验抗原的制备及检验

用传染性支气管炎病毒(IBV)M41株毒种接种11日龄鸡胚,收获感染鸡胚病毒液,将新鲜的病毒液用小型盒式超滤浓缩系统浓缩,然后用高速离心机离心,去上清,沉淀用原病毒液体积1/100的HA缓冲液悬浮,制备出100倍浓缩的IBV病毒液;将100倍浓缩的IBV病毒液中加入15%～20%的A型魏氏梭菌滤液,充分混匀,放37℃恒温振荡器感作2h,取出置2～8℃条件下48h。制备出了5批IBVM41株HI抗原。检验结果显示:5批HI抗原的性状均为白色混浊液体,底部有少量沉淀;无菌检验为阴性,HA效价为1:128～1:512,5批抗原与IB阳性血清呈阳性反应,HI效价为8log2,而与阴性血清、新城疫阳性血清、H9亚型禽流感阳性血清、H5亚型禽流感阳性血清及产蛋下降综合征阳性血清呈阴性反应,HI效价低于2log2。各项检验结果均符合要求。