家蝇蛹凝集素的分离工艺和性质的初步研究

通过缓冲液浸提、戊二醛固定化红细胞吸附、亲和层析和凝胶过滤等方法 ,从家蝇蛹中分离纯化出一种对半乳糖专一的凝集素 .结果表明 ,亲和层析后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测家蝇蛹凝集素 (MPL)分子质量为 84ku .SephadexG 2 0 0凝胶过滤后 ,MPL分子质量为 86ku .家蝇蛹凝集素专一性识别D 半乳糖 ,其血凝活力对热不稳定 ,不依赖Ca2 +,在 pH 6～ 9之间稳定 .家蝇蛹凝集素对Escherichiacoli。

裙带菜凝集素的分离及性质研究

裙带菜(Undariapinnatifida)经Tris-HCl缓冲液粗抽提,然后进行硫酸铵分级实验,测定盐析范围为50%硫酸铵饱和度,经50%硫酸铵饱和度分级后,裙带菜凝集素(UPL)纯化倍数为7.7,总活力回收为167%,UPL粗抽提液中糖的质量分数为5.72%.该凝集素在pH为4.0～10.14时均有活性,但在pH为5.0～9.51时活性较高,pH等于4.0时活力保留25%,pH等于10.14时活力保留50%,该凝集素不被D-果糖、葡萄糖、γ-球蛋白所抑制.

鳞柄小奥德蘑凝集素的提取及性质研究

以鳞柄小奥德蘑粉为试材,采用磷酸缓冲溶液浸提凝集素,倍比稀释法测定其热稳定性、耐盐性、糖特异性和对多种血红细胞的凝集能力;以凝血活力为指标,采用单因素试验和正交实验优化了鳞柄小奥德蘑凝集素的提取工艺,以期研究鳞柄小奥德蘑凝集素的最佳提取工艺及其凝血活性。结果表明:鳞柄小奥德蘑凝集素可凝集兔、鸡、羊和人的血红细胞,对兔血红细胞的凝集能力最强,凝集能力无物种专一性和血型专一性;具有一定的耐热性和耐盐性,80℃及以上温度处理可显著降低其凝集能力,且随着处理时间的延长,凝集能力逐渐降低,80℃处理50 min或90℃处理10 min,凝集能力消失;含0~0.8 mol·L-1 NaCl的0.01 mol·L-1磷酸缓冲溶液对其凝集能力无显著性影响;特异性糖为N-乙酰-D-半乳糖胺。鳞柄小奥德蘑凝集素的最佳提取工艺为浸提液种类0.01 mol·L-1磷酸缓冲溶液,料液比1∶15 g·mL-1,浸提时间2 h,浸提液pH 7.0。