前列腺毛细血管内皮细胞屏障功能研究

目的 分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外研究大鼠前列腺毛细血管内皮细胞的屏障功能。方法 采用细胞生长特性选择法分离培养大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,用第Ⅷ因子相关抗原抗体对分离培养的前列腺毛细血管内皮细胞进行免疫学鉴定。免疫组化观察毛细血管内皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,采用跨膜电阻测量仪检测毛细血管内皮细胞的跨膜电阻,用酚红渗漏实验检测其通透性,以大鼠肺毛细血管内皮细胞、脑毛细血管内皮细胞作为阴性与阳性对照。结果 成功分离大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,呈铺路石样生长。第Ⅷ因子相关抗原抗体的免疫荧光结果显示：分离培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞胞浆表达绿色荧光,提示分离的细胞为毛细血管内皮细胞;免疫组化结果显示紧密连接蛋白claudin-1在相邻的毛细血管内皮细胞之间表达;体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞,阴性对照组肺毛细血管内皮细胞,阳性对照组脑毛细血管内皮细胞的跨膜电阻峰值分别可以达到（142.2±3.1）、（43.3±3.5）、（248.2±6.2）Ω/cm2,并稳定保持2-3 d,三者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。酚红渗漏实验结果显示前列腺毛细血管内皮细胞、阳性对照组脑毛细血管内皮细胞随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低,阴性对照组肺毛细血管内皮细胞酚红渗透量随跨膜电阻的改变变化趋势不明显。结论 大鼠前列腺毛细血管内皮细胞与脑毛细血管内皮细胞等屏障内皮相比拥有相似的结构功能,体外培养的大鼠前列腺毛细血管内皮细胞具有屏障特性,可以作为血前列腺屏障研究的体外模型。

医用硅纳米粒跨越血前列腺屏障的实验研究

目的 研究硅纳米颗粒跨越血前列腺屏障的生物学特性。 方法 化学方法制备硅纳米颗粒。加入HT10 80细胞培养转化 4 8h后观察纳米粒进入细胞内的分布情况。小白鼠 12 0只 ,按一定的浓度梯度 (0 .0 0 5、0 .0 10、0 .0 15、0 .0 2 0、0 .0 2 5ml/g)腹腔或尾静脉注射硅纳米悬液每组 2 0只 ;另 2 0只作对照。 96h后每实验组随机处死 10只 ,电镜下观察硅纳米在细胞及前列腺组织的分布 ;观察动物 2周内的毒性反应及死亡情况。 结果 电镜观察证实硅纳米颗粒进入HT10 80细胞内。注射硅纳米悬液的小白鼠前列腺细胞及间质细胞内均可见到硅纳米颗粒 ,细胞内超微结构及细胞核无明显改变 ;各实验组小白鼠体重、饮食、排便及活动情况与对照组相比均未见明显异常。 结论 硅纳米颗粒可跨越血前列腺屏障和细胞生物膜屏障 ,可能成为前列腺疾病治疗一种很有应用前景的给药载体。

血-前列腺屏障的假说及其对前列腺炎研究的意义

在慢性前列腺炎的研究工作中,血-前列腺屏障的研究是个被忽视的领域。在Pubmed等医学类数据库中找不到一篇关于血-前列腺屏障的研究综述。甚至找不到一个关于它的令人满意的定义。我们的研究目的,就是尝试从不同研究领域的文献中寻找有关"血-前列腺屏障"的理论和实验的依据,提出一个建立在非相关文献间的隐含联系中的假说。我们相信,血-前列腺屏障是客观存在的,而且在前列腺炎的发病机制中扮演着关键性的角色。

美帕曲星联合非那雄胺重建CAP大鼠模型血-前列腺屏障

目的:研究美帕曲星联合非那雄胺在重建慢性非细菌性前列腺炎(Chronic abacterial prostatitis,CAP)大鼠模型血-前列腺屏障方面的疗效。方法:成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只,采用去势后苯甲酸雌二醇0.25mg/(kg·d)皮下注射4周的方法诱导CAP模型。将大鼠随机分为对照组、吲哚美辛治疗组、美帕曲星联合非那雄胺治疗组、安慰剂组。药物干预时间为4周。治疗结束后,比较各组大鼠前列腺组织学表现。结果:吲哚美辛显著减少了前列腺内炎细胞浸润。美帕曲星联合非那雄胺治疗未能对前列腺间质炎细胞浸润发挥作用,但是阻止了炎细胞向前列腺腺管内的渗透。结论:美帕曲星联合非那雄胺重建了CAP大鼠前列腺腺管上皮(血-前列腺屏障)的屏障功能,在治疗慢性前列腺炎方面具有令人感兴趣的应用前景。

大鼠前列腺上皮细胞体外培养及其屏障功能的初步研究

目的:体外培养大鼠前列腺上皮细胞,并观察其屏障功能。方法:体外培养大鼠前列腺上皮细胞,采用免疫组化观察腺上皮细胞之间紧密连接蛋白claudin-1的表达,光镜以及电镜观察大鼠前列腺上皮细胞的结构组成。采用跨膜电阻测量仪检测前列腺上皮细胞的跨膜电阻,采用酚红渗漏实验检测前列腺上皮细胞的通透性。结果:大鼠前列腺上皮细胞在体外培养可以形成紧密的单层细胞结构,紧密连接蛋白在相邻的腺上皮细胞之间表达,透射电镜结果显示相邻的单层腺上皮细胞之间存在紧密连接。体外培养的大鼠前列腺上皮细胞跨膜电阻在培养第8天可以达到(201.3±3.5)Ω/cm2,酚红渗漏实验显示随着细胞单层跨膜电阻的增加,基底侧的酚红浓度减低。结论:大鼠前列腺上皮细胞具有与脑毛细血管内皮细胞、肠上皮细胞等具有屏障功能的细胞相似的结构和功能,体外培养的大鼠前列腺上皮细胞具有屏障特性,可以作为血前列腺屏障研究的体外模型。

闭合蛋白4在前列腺癌组织中的表达及其与血-前列腺屏障的相关性

目的探讨闭合蛋白4在前列腺癌组织中的表达及其与血-前列腺屏障的相关性。方法收集2008年1月至2015年1月重庆医科大学附属第一医院29例住院治疗前列腺癌患者的癌标本,采用免疫组织化学方法检测癌组织中闭合蛋白4表达，分析闭合蛋白4表达强度与Gleason分级评分和术前血清前列腺特异性抗原（PSA）水平的相关性。结果29例患者癌组织中闭合蛋白4均表达阳性。癌组织中闭合蛋白4的表达强度与Gleason分级评分无显著相关性（r=0.2,P=0.8），血清PSA水平与闭合蛋白4表达强度和Gleason分级评分均有显著相关性（均P＜0.05）。结论闭合蛋白4在前列腺癌患者癌组织中的表达与血清PSA水平有关，闭合蛋白4可能参与构成血-前列腺屏障。

β-actin在无菌性前列腺炎大鼠模型中免疫抑制治疗前后的表达及意义

目的:检测β-actin在大鼠慢性无菌性前列腺炎(nonbacterial chronic prostatitis,CAP)动物模型免疫抑制治疗前后的表达,探讨其与慢性无菌性前列腺炎发病机制的相关性.方法:成年Sprague-Dawley大鼠40只,随机分成4组:正常对照组(A),单纯造模组(B),造模后免疫抑制治疗组(C),造模后安慰剂治疗组(D).采用去势后苯甲酸雌二醇皮下注射30d造模,成功复制出大鼠无菌性前列腺炎模型.采用免疫组化SP法分别检测β-actin在各组中的表达,并对检测结果进行统计学分析.结果:单纯造模组β-actin表达明显减弱,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05).经过环孢素A免疫抑制治疗后β-actin表达明显恢复,与单纯造模组相比有显著性差异(P<0.05).而安慰剂治疗组β-actin表达几近消失,染色面积为(0.22±0.31)%,与环孢素A治疗组相比均有显著性差异(P<0.01).结论:β-actin作为紧密连接中的关键性调节因子,在慢性无菌性前列腺炎的发病过程中可能具有重要的调节作用.

慢性前列腺炎病理生理模式图假说

慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)在泌尿外科临床研究中备受关注。在过去的几十年里,许多新方法被用于CP/CPPS的病因学、病理生理学机制、治疗学的研究。CP/CPPS的病因学仍不清楚。微生物的、理化的、尿流动力学的和免疫学的因素都曾得到关注,但没有一项成为定论。CP/CPPS的组织病理学改变相对比较清楚,但是导致慢性炎症和症状迁延不愈的病理生理学变化尚不清楚。我们的研究目的,就是尝试从不同研究领域的文献中寻找有关CP/CPPS病理生理学机制的理论的和实验的依据,提出一个建立在非相关文献间的隐含联系中的假说。

欣复欢治疗细菌性前列腺炎17例临床分析

多年来,对细菌性前列腺炎,特别是慢性细菌性前列腺炎,由于其特殊的血-前列腺屏障的存在,药物治疗效果一直不太理想。近年来,我们应用欣复欢对17例慢性细菌性前列腺炎病人进行治疗,获得较满意的效果,现报告如下。

超声微泡辅助间充质干细胞携载姜黄素胶束对大鼠前列腺炎的作用

慢性细菌性前列腺炎(CBP)是一种常见的男性泌尿系统疾病,而骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有趋向炎症组织、分泌抗炎物质的特性;因此,本研究探索了借助超声联合微泡(USM)打开血-前列腺屏障(BPB),以辅助骨髓间充质干细胞携载姜黄素胶束(BMSCs-CM)对大鼠慢性细菌性前列腺炎治疗效果的影响。实验通过密度梯度离心和表面抗原检测方法分离鉴定BMSCs,采用细胞存活与胞内姜黄素荧光定量筛选构建BMSCs-CM的最佳参数,利用荧光成像显示USM辅助BMSCs-CM在前列腺组织的靶向富集,以前列腺指数和炎症因子水平评估USM辅助BMSCs-CM对CBP的治疗效果。结果发现,质量浓度为100μg/mL的姜黄素胶束与BMSCs共同孵育4 h为构建BMSCs-CM的最佳条件;USM能显著促进BMSCs-CM在前列腺炎组织的富集,同时USM辅助BMSCs-CM处理可有效降低大鼠CBP的炎症反应。该研究结果为CBP的临床治疗提供了新思路。

IPP软件HSI选色系统分析前列腺癌组织中闭合蛋白-4与血-前列腺屏障相关性

血清tPSA（prostate specific antigen，PSA）值升高反映血-前列腺屏障的完整性的破坏。闭合蛋白4（claudin-4，CLADN-4）是一般屏障中紧密连接的重要组成部分，为了探讨前列腺癌组织中闭合蛋白4与血-前列腺屏障的相关性，本研究收集2008年1月至2015年1月上海市浦东新区人民医院29例住院治疗前列腺癌患者的癌标本，均采用免疫组织化学方法检测癌组织中闭合蛋白4的表达，应用放射免疫法测定术前血清前列腺特异性抗原（tPSA）值，利用IPP（Image-pro plus）软件HSI选色系统分析闭合蛋白4表达强度与血清PSA值的相关性。研究显示，29例患者癌组织中均检测到闭合蛋白4阳性表达，且血清PSA值与闭合蛋白4表达强度具有显著相关性（p〈0．05）。本研究表明，闭合蛋白4在前列腺癌患者癌组织中的表达强度与血清PSA值相关，闭合蛋白4可能参与血-前列腺屏障的组成。

低频超声联合微泡对比剂开放血-前列腺屏障的研究进展

前列腺疾病是老年男性的常见病，发病率逐年上升且呈现年轻化趋势。我国50岁以上的男性人群中，约70％的男性患有各种前列腺疾病，包括前列腺炎、前列腺增生及前列腺癌，近年来，随着人们生活方式的改变、人口的老龄化以及诊断水平的不断提升，我国前列腺癌的发病率呈明显上升趋势，欧美国家，前列腺癌在男性肿瘤中占27．1％，是最常见的男性肿瘤，其死亡率高居癌症死亡率的第二位，仅次于肺癌。

大鼠血-前列腺屏障中occludin蛋白的表达数量与Ⅲ型前列腺炎的相关性研究

目的:检测Ⅲ型前列腺炎大鼠血-前列腺屏障中紧密连接蛋白(occludin蛋白)的表达数量,探讨其表达数量与Ⅲ型前列腺炎的相关性。方法:将30只雄性3月龄SD大鼠随机分成三组(n=10):对照组(A组),假手术组(B组),Ⅲ型前列腺炎模型组(C组)。A组正常饲养不做特殊处理,B组在大鼠前列腺内注入20μl生理盐水,C组在大鼠前列腺内注入20μl完全弗氏佐剂。7天后处死大鼠,取前列腺组织。用免疫组织化学法测定三组大鼠前列腺组织中occludin蛋白的表达量。结果:A组与B组大鼠前列腺腺管上皮中occludin蛋白的表达数量均高于C组(P<0.05),但A、B两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血-前列腺屏障中occludin蛋白的表达数量与Ⅲ型前列腺炎的发生具有相关性;Ⅲ型前列腺炎中血-前列腺屏障中occludin蛋白的表达数量降低。

超声声致孔隙效应致兔前列腺损伤的初步研究

目的探讨超声联合造影剂微泡的声致空隙效应开放血-前列腺屏障时对前列腺的损伤作用。方法15只健康8月龄性成熟新西兰兔，随机分为单纯微泡（MB）组、单纯超声（US）组、超声联合微泡（US＋MB）组，超声波直接辐射前列腺，光镜、电镜、细胞凋亡指数（AI）观察前列腺组织损伤的情况。结果MB组与US组前列腺组织在光镜下均未见明显异常，胞浆、细胞核染色均匀，腺体上皮组织排列整齐、完整，腺管腔内未见明显改变；US＋MB组腺体上皮组织细胞排列紊乱，腺管腔内可见大量嗜伊红染的液体。透射电镜下MB组与US组前列腺组织微血管内皮细胞排列整齐，细胞间紧密连接形态正常；US＋MB组可见线粒体肿胀，微血管内皮细胞间隙增宽，细胞间桥连接断裂，红细胞漏出等改变。US＋MB组AI明显高于MB组与US组（P〈0．01），而US组则明显高于MB组（P〈0．01）。结论利用超声联合造影剂微泡的声致孔隙效应开放血-前列腺屏障的同时可造成前列腺组织损伤。