活动性梅毒患者梅毒血清特异性抗体水平与体内免疫球蛋白水平的相关性研究

目的:探究活动性梅毒患者梅毒血清特异性抗体水平(TPAb)与体内免疫球蛋白A/E/M/G(IgA/E/M/G)及IgG亚型的相关性,为临床梅毒的综合诊疗与预后评估提供依据。方法:选取2023年就诊于苏州大学附属第一医院的活动性梅毒患者,根据梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)分为1∶4+与1∶16+两组,另选取健康对照组,均进行化学发光微粒子免疫检测(CMIA)测定TPAb,免疫比浊法测定IgA/E/M/G及IgG1/2/3/4含量。结果:本次共纳入活动性梅毒患者206例(男性125例,女性81例),年龄(46.05±19.58)岁。相对健康对照组,可见活动性梅毒组IgG2降低,TPAb、IgA/E/M/G和IgG1/3/4水平均升高,其中TPAb、IgE、IgG1/2/3水平差异具有统计学意义(P<0.05)。相比于健康对照组,TRUST 1∶4+组TPAb、IgE、IgG2差异具有统计学意义,TPAb与IgE、IgG2/4存在相关性;而TRUST 1∶16+组TPAb、IgA/E/M/G、IgG1/2/3水平差异均具有统计学意义,TPAb与IgE、IgG4存在相关性(P<0.05)。另外,TRUST阳性组之间的TPAb、IgG和IgG1/3水平差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:不同TRUST滴度的活动性梅毒患者TPAb与Ig水平存在较大差异,TPAb联合Ig可用于监测梅毒活动性强弱,IgA/M/G及IgG1/3可能成为候选生物标志物。

应用日本血吸虫病患者血清特异性抗体亚类考核疗效

用纯化的日本血吸虫成虫３１／３２ＫＤ抗原建立的ＢＡ－ＥＬＩＳＡ系统检测慢性血吸虫病患者治疗前、后血清中的ＩｇＧ１，ＩｇＧ３和ＩｇＧ４抗体水平；同时用常规ＥＬＩＳＡ检测ＩｇＧ和ＩｇＭ特异抗体。结果表明：各类抗体均未见假阳性，亦未与肝吸虫病和肺吸虫病患者血清出现交叉阳性。提示ＩｇＧ１和ＩｇＧ４抗体的敏感性和特异性高，具有诊断和疗效考核的价值。

血吸虫病患者治疗前后特异性IgG4抗体的观察

[目的 ]观察血吸虫病患者治疗前后特异性IgG4抗体的变化。[方法 ]ELISA法。 [结果 ]2 7例血吸虫病患者治疗前SEA IgG4和AWA IgG4阳性率分别为 96 3%和 10 0 % ,平均OD值分别为 1 6 2和 0 72。治疗后 6月复查 18例 ,阳性率分别为 94 4%和 10 0 % ,平均OD值分别为 1 0 6和 0 5 6。治疗后 12月复查 2 7例 ,阳性率分别为 96 3%和 92 6 % ,平均OD值分别为 0 99和 0 5 8。 [结论 ]2 7例血吸虫病患者SEA IgG4和AWA IgG4治疗前后阳性率无明显变化 ,但抗体水平有所下降。

抗日本血吸虫膜蛋白特异性单链抗体的构建及表达

目的 用基因工程抗体技术构建抗日本血吸虫膜蛋白特异的单链抗体。 方法 用抗体框架区的通用引物 PCR扩增抗日本血吸虫膜蛋白特异性单克隆抗体 NP11- 4的 VH 及 VL 基因 ,测序分析其核苷酸序列。用VH 和 VL 基因在 p THA90质粒载体中构建成单链抗体基因并诱导表达。 结果 扩增获得 NP11- 4的 VH 和 VL基因 ,经测序分析确定为新发现的抗体可变区序列 ,构建成排列顺序为 VH- linker- VL 的单链抗体基因 ,经诱导表达出与硫氧环蛋白融合的单链抗体 ,大小约为 36 .2 k Da,以包涵体形式存在。 结论 成功地构建和表达了抗日本血吸虫膜蛋白特异性单链抗体。

不同人群抗SARS冠状病毒特异性抗体血清学检测与分析

目的 :探索不同人群中抗SARS冠状病毒特异性抗体的发生、发展及分布规律 ;评价间接ELISA方法检测SARS冠状病毒IgG、IgM特异性抗体试剂盒及改进方法。 方法 :分别获取SARS流行前无偿献血者标本 3990份 ,一线抗SARS医务人员标本 397份和临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,采用ELISA方法进行SARS冠状病毒特异性抗体检测。结果 :SARS流行前无偿献血者标本 3990份共检出IgG抗体阳性标本 16份 ,阳性率为 0 .4 0 % ;IgM抗体阳性标本 0份 ,阳性率为 0 %。一线抗SARS医务人员标本 397份 ,共检出IgG抗体阳性标本 2份 ,阳性率为 0 .5 0 % ;IgM抗体均为阴性。临床确诊的SARS患者标本 15 7份 ,共检出IgG抗体阳性标本 119份 ,阳性率为 75 .79% ;IgM阳性标本 6 8份 ,阳性率为 4 3.31%。结论 :一线抗SARS医务人员与SARS流行前无偿献血者IgG、IgM抗体阳性率无显著差异 (P =0 .76 >0 .0 5 ) ;采用该SARS冠状病毒 (变异株 )IgG抗体试剂盒检测SARS流行前无偿献血者人群存在一定的阳性率 ,说明该试剂盒包被的抗原与其它免疫球蛋白 (IgG)有交叉反应 。

3种血清学特异性抗体检测在梅毒螺旋体检测中的比较研究

梅毒(syphilis)属于一种性传播疾病,病原体为苍白密螺旋体(TP)苍白亚种,又称梅毒螺旋体。近年来,TP的感染率仍持高不下,虽然用于检测TP特异性抗体的检测方法越来越多,梅毒血清学诊断仍具有挑战性,而且两次检测结果的不一致使临床决策变得困难[1]。因此,本研究选择了3种TP特异性抗体的检测与TPPA测试相比,从而比较其诊断价值的差异性。

重组日本血吸虫特异性IgE相关蛋白的纯化及免疫学活性鉴定

目的 纯化重组日本血吸虫特异性IgE抗体相关蛋白和鉴定其免疫原性。 方法 大量表达Sj43B/pGEX 6p 1 /BL2 1重组克隆菌 ,超声粉碎后离心获得融合表达的重组蛋白包涵体。经TNMFX缓冲液分步洗涤后 ,将包涵体溶解液经FPLC分离 ,获得重组融合蛋白组分 ,再经巯基二硫键转换复性后 ,用于免疫小鼠获得抗血清 ,分别用dot ELISA法和Westernblotting法对融合蛋白引起的特异性血清抗体同型反应进行鉴定。 结果 分步洗涤可有效去除重组蛋白包涵体沉淀中混杂的多数杂蛋白成分 ,FPLC分离可获得高纯度重组蛋白。用复性后的重组融合蛋白免疫小鼠 ,其中目的蛋白可引起特异性IgE抗体反应 ,而担体蛋白 2 6kDaGST不引起特异性IgE应答 ,可引起特异性IgG抗体反应 ,目的蛋白则否。 结论 重组质粒Sj43B/pGEX 6p 1表达的融合蛋白 ,其目的蛋白部分免疫小鼠可产生特异性IgE抗体。

ELIB检测并殖吸虫病患者治疗前后血清中特异性短程抗体的研究

目的 寻找具有诊断和考核疗效价值的特异性抗原组分。方法 应用ELIB对 19例并殖吸虫病人在治疗前和治愈后血清中特异抗体水平的动态变化进行了研究。结果 并殖吸虫病患者经有效药物治愈后 0 5年、1年、3年、5年连续采血 ,经ELIB试验连续观察的结果表明 ,其中分子量为 6 7kDa和 82kDa的两条区带在治疗前显色明显 ,而且治愈后显色反应减弱和消失较为明显和迅速 ,治愈后 5年的消失率可达 94 7% (18/ 19) ,且与其他吸虫无交叉反应。结论 ELIB检测 6 7/82kDa抗原组分可作为并殖吸虫病诊断和疗效考核的有效方法。

检测特异性抗体用于日本血吸虫病疗效考核的研究

为探讨特异性ＩｇＧ及其亚类对日本血吸虫病的疗效考核价值，用直接ＥＬＩＳＡ及间接ＥＬＩＳＡ 方法检测了２６４ 份治疗前和治疗后不同时间慢性血吸虫病病人以及５０ 份正常人血清中虫卵抗原（ＳＥＡ）和成虫抗原（ＡＷＡ）特异性ＩｇＧ、ＩｇＧ１ 和ＩｇＧ４。结果ＩｇＧＳＥＡ 及ＩｇＧ４ＳＥＡ在治疗后３ 个月出现有显著意义的下降且于治疗后１２ 个月降至正常；ＡＷＡ特异性抗体均于治疗后６ 个月才下降，其中仅ＩｇＧ４ＡＷＡ 于治疗后１２ 个月降至正常；ＩｇＧ４ＳＥＡ／ＡＷＡ 在治疗后１２ 个月时的阴转率最高（９７．７ ％） ，ＩｇＧＳＥＡ 次之（７５％ ）。表明治疗后ＳＥＡ 特异性ＩｇＧ 及ＩｇＧ４ 下降较ＡＷＡ特异性抗体快；ＩｇＧ４ 为一短期抗体，尤其ＩｇＧ４ＳＥＡ，可作为判断日本血吸虫病是否治愈的指标。

小鼠特异性抗体与效应细胞在体外协同杀伤日本血吸虫童虫作用的研究

在体外试验系统中,特异性抗血清或各种效应细胞单一因素与日本血吸虫童虫作用,对童虫一般不出现有意义的杀伤作用。但当两者共同作用于虫体时,则可使粘附各种效应细胞的童虫比率和童虫死亡率显著增高。这种作用在一定范围内随着特异性抗体的浓度、效应细胞与童虫的比率(效一靶比率)和孵育时间的增加而增强。在同样条件下,一般均以巨噬细胞(Mφ)和嗜酸性粒细胞(Eos)的作用较强,中性粒细胞(Neu)作用较差。显微镜下观察可见Mφ和Eos紧密粘附于虫体表面,致虫体表面出观明显损伤。而Neu在虫体粘附一定时间后自由体脱落,童虫结构相对比较完整。

SCP合剂治疗血吸虫病患者前后超声影像及特异性抗体水平的变化

目的 研究用SCP合剂治疗日本血吸虫病患者的效果。方法 30例血吸虫病患者服用SCP合剂前后 ,观察超声影像及检测血清抗体IgG和IgG4 水平 ,以确定该合剂的临床效果。结果 经治疗后 1.5～ 3个月 ,肝实质超声影像显著改善者 15例 ;血清特异性抗体IgG水平显著上升 ,IgG4 水平明显下降。结论 用SCP合剂治疗血吸虫病患者 ,其肝实质病变显著减弱 。

疫区人群血吸虫特异性抗体IgE动态变化及影响因素的研究

用IHA法对湖北汉川县血吸虫病中度流行区3个村3～70岁人群进行特异性抗体IgE检测，对IHA阳性者检测IgE基线水平。吡喹酮化疗后3～7个月检测期终IgE水平。完成IHA阳性期终观察115人，其中化疗组84人，未化疗组31人；前者lgE阴转率78.57％，明显高于后者的阴转率24.14％，IgE的GMT下降幅度亦明显高于后者，结果显示化疗是致IgE水平下降的因素。Logistic回归分析发现，两组影响lgE动态的共同因素是啥酸性粒细胞计数（EOSCUT）和疫水接触指数（WCI）。

慢性日本血吸虫病患者唾液中特异性抗体的检测

[目的 ]研究日本血吸虫病患者唾液中抗血吸虫特异性抗体检测的可行性。 [方法 ]应用 EL ISA检测血吸虫病患者及正常人唾液中的抗血吸虫抗体并与血清中的特异性抗体比较。[结果 ]慢性血吸虫病患者唾液 32份 ,阳性 2 9份 (90 .6 % ) ,血清 32份 ,阳性 32份 (10 0 % ) ,经χ2 检验两者间差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。正常人唾液140份 ,阳性 8份 (5 .75 % ) ,正常人血清 15 6份 ,阳性 6份 (3.8% ) ,两者间差别无显著性意义 (P>0 .0 5 )。 [结论

梅毒螺旋体特异性抗体检测在血清学诊断中的应用研究

探讨梅毒螺旋体特异性抗体检测方法在血清学诊断中的应用研究。方法 收集来自我院各科室进行检查的403例患者的临床资料。采用 TPPA,化学发光,酶联免疫吸附试验。 三种方法进行了阳性检出率和酶联免疫吸附试验,并与化学发光试验进行了比较。最后的 TPPA试验表明,90个标本为阳性,313个标本为阴性;其中22.33%为阳性。对阳性样品,酶联免疫吸附试验的结果比化学发光试验的结果好,有显著性差异(P<0.05);对阴性样品,酶联免疫吸附试验与化学发光法比较,两种方法无显著性差异,P>0.05。ELISA与化学发光方法联用,其敏感性、特异性、准确率及正、负预测值均优于单一方法,差异有统计学意义(P<0.05)。与 TPPA相比, ELISA与化学发光两种方法的测定值无统计学意义,P>0.05。结论 对于梅毒螺旋体特异性抗体的检测在血清学的诊断研究中,采取ELISA检测联合化学发光法检测,具有和TPPA一致的检测结果,值得临床推广。

血吸虫病病人唾液中特异性抗体的检测

目的研究血吸虫病病人唾液中特异性抗体的诊断价值。方法用间接ELISA平行检测 5 0例血吸虫病病人和 5 5例正常人 (选自非血吸虫病疫区 )唾液中IgG和IgA抗体。结果血吸虫病患者唾液中IgG与粪检的阳性符合率为 78 0 % (39/5 0 ) ,与正常对照组 3 6 % (2 /5 5 )比较 ,差异有高度显著性 (P <0 0 0 1) ,唾液中IgA与粪检的阳性符合率为 8 0 % (4 /5 0 ) ,与正常对照组 5 5 % (3/5 5 )比较 ,两者差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论在血吸虫病患者唾液中可检测出特异性IgG抗体 ,可视为诊断血吸虫病的新途径。

探讨非特异和特异性梅毒抗体血清学筛查效果

目的研究在梅毒抗体血清学方法筛查中运用非特异和特异性抗体的检测作用。方法选取我院在2015年2月-2016年10月收治的395例确诊为感染过梅毒螺旋体的患者作为研究对象,将其随机分为两组。RPR组采用快速血浆反应素环状卡片进行试验,TPPA组采用梅毒螺旋体颗粒凝集试验方式,对患者的特异性与非特异性抗体进行检测,并对两组患者的实验结果进行收集结果进行对比分析。结果395例已感染梅毒螺旋体患者血清中非特异性抗体与特异性抗体均阳性的共297人,占75.2%(297/395);非特异性抗体阴性而特异性抗体阳性的共87人,占22.0%(87/395)。在现症感染的339例梅毒患者血清中,特异性抗体的检测率为100.0%(339/339),非特异性抗体的检测率为87.0%(295/339),两者比较,差异具有统计学意义(P<0.01),且二期梅毒患者血清中非特异性抗体的阳性率高于其他时期。在56例既往感染患者体内特异性抗体均为阳性,但非特异性抗体却已消失。结论非特异性抗体可作为为现症感染提示,也可用于临床治疗的疗效观察;而特异性抗体一般情况下用来确诊感染,不常用于疗效观察。两种抗体联合在一起进行检测,可以排除临床上出现的许多梅毒假阳性患者,增加确诊度。

慢性乙型肝炎患者血清中肝特异性自身抗体的检测

目的：阐明慢性乙型肝炎中是否也存在肝特异性自身抗体及其在病情转归中的作用。方法：以猴肝组织切片和可溶性肝抗原为抗原基质，用间接免疫荧光和蛋白质印迹法检测３３７例慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清中的自身抗体。结果：免疫荧光法显示乙型肝炎后肝硬化自身抗体总的阳性率（２４．０７％）高于慢性乙型肝炎组（１４．２９％），且两组均显著高于正常对照组。蛋白质印迹的阳性率各为４３．４２％和４２．５９％，两者无显著差异。两组病例靶抗原相对分子质量多集中在３．０万～５．５万之间，但肝硬化患者在相对分子质量２．５万和９．０万左右处的阳性条带均多于慢性肝炎患者。结论：慢性肝炎、肝硬化患者血清中存在抗肝组织自身抗体，其相对应的靶抗原有多种。进一步分离、鉴定有意义的靶抗原，并对其进行抗原表位、细胞表面表达等分析，将有助于探讨自身免疫在慢性肝炎发病及转归中的作用。

应用单克隆抗体检测牙鲆血清中抗淋巴囊肿病毒的特异性抗体

应用杂交瘤单克隆抗体技术制备10株分泌抗牙鲆免疫球蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞。利用单抗2H4,通过间接酶联免疫法(ELISA)对牙鲆血清中抗淋巴囊肿病毒(LCDV)特异性抗体进行了检测。结果表明:无外观症状的牙鲆血清中特异性抗体水平很低(平均OD值为0.092),个别鱼体偏高,证明已感染LCDV,处于潜伏期;患淋巴囊肿病且症状显现的牙鲆血清中特异性抗体水平升高(平均OD值为0.165),患淋巴囊肿病后处于恢复期的牙鲆抗体水平最高(平均OD值为0.231);健康牙鲆接种LCDV灭活疫苗后,特异性抗体水平显著升高。