红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)相关基因GYPA多态性与华支睾吸虫感染的相关性研究

目的分析华支睾吸虫高发人群与低感染人群的红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)相关基因GYPA的多态性,探讨红细胞跨膜糖蛋白与华支睾吸虫感染的相关性。方法 2019年12月~2020年6月随机筛查广西南宁市武鸣区(n=700)、贵港区(n=500)人群,分别采集抗凝血,检测血浆中的华支睾吸虫IgG抗体并提取白细胞中的DNA,通过基因测序的方法分析1200例标本GYPA基因全长外显子与部分内含子序列,以基因克隆方法鉴定碱基突变特征,使用卡方检验计算感染危险度。结果武鸣区华支睾吸虫IgG抗体阳性率62.7%(439/700),贵港区华支睾吸虫IgG抗体阳性率3.4%(17/500)(P<0.05)。GYPA基因中内含子2的第54位插入碱基C引起阅读框移码,突变比例:武鸣区华支睾吸虫感染阳性人群突变率23.9%(105/439),阴性人群49.4%(129/261);贵港区华支睾吸虫感染阳性人群突变率17.6%(3/17);阴性人群54.7%(264/483)(P<0.05)。结论武鸣区华支睾吸虫感染率明显高于贵港区。GYPA内含子2中第54位插入碱基C引起阅读框移码的突变率在华支睾吸虫感染阳性人群中远低于阴性人群,提示该位点突变是华支睾吸虫感染阴性人群的保护基因。需要深入研究该基因突变点与华支睾吸虫感染的相关机制,以利于疾病的早期诊断、输血管理、治疗与预防。

基于“血清学试验+分子生物学技术”对一例疑难血型的鉴定分析

目的通过分享一例ABO血型正反定型不符患者的血型鉴定分析过程,提高临床实验室对疑难血型的认识及处理能力,确保临床用血安全。方法采集贵阳市第二人民医院重症医学科一例ABO血型正反定型不符患者的血液标本,采用血型血清学试验和基因检测技术对患者ABO血型进行鉴定分析。结果患者样本ABO血型正定型为B型、反定型为AB型;不规则抗体筛查、直接抗人球蛋白试验和间接抗人球蛋白试验均为阴性,吸收放散试验提示红细胞上含有A抗原。PCR基因扩增及测序显示,样本基因与ABO★A1.02和ABO★B.01相符,基因型为A1/B型,表型为A1B型;ABO基因第6号外显子297A>G及第7号外显子467C>T、526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C、874C>G、930G>A出现多个位点基因突变,其中7号外显子874C>G基因突变尚未记录在国际输血协会。结论通过血型血清学试验和分子生物学技术最终判定患者ABO血型为A1B型,患者7号外显子上的874C>G基因位点突变可能是本研究首次报道的一个新发现。基因位点突变干扰血型的正确鉴定,联合运用血清学试验和分子生物学技术,对于正确鉴定血型和保证临床安全输血治疗具有重要意义。

DNA损伤修复能力对GPA基因突变频率的影响及其检测方法

血型糖蛋白 A(GPA)基因突变频率在作为生物剂量计及癌的风险预测方面最大的缺陷在于个体差异大。DNA损伤及修复能力是影响 GPA基因突变频率个体差异的的决定因素之一。随着现代分子生物学实验技术的发展 ,检测 DNA损伤及修复能力的方法不断出现 ,例如中性膜洗脱法、单细胞凝胶电泳、梯度电压凝胶电泳等 ,使得应用 DNA损伤及修复能力对

放射诊疗工作人员血型糖蛋白A基因突变频率及其相关因素的研究

目的 探讨血型糖蛋白A（GPA）基因突变频率用于辐射危险评价及预测电离辐射诱发肿瘤风险的可行性。方法 采用固定人群分层随机抽样的方法,选取上海市放射诊疗工作人员336例（按工种分为X射线影像诊断组、CT影像诊断组、介入放射学组和放射治疗组）,健康对照组112例;其中,经血型鉴定为MN杂合个体的放射诊疗工作人员为176例,健康对照者为58例。分离、固定、荧光免疫标记外周血红细胞后,应用流式细胞仪,按照BR6-1W1方法,分析GPA基因突变频率;采用胞质分裂阻断微核＋3-氨基苯甲酰胺指数实验（CB微核＋3AB指数实验）,检测DNA损伤修复能力以反映研究对象的个体易感性。结果 放射诊疗工作人员GPA基因突变频率明显高于健康对照组（t = 2.29~11.48,P〈0.05）,尤其是介入放射学组的GPA NO基因突变频率明显高于X射线影像诊断组（t = 2.01,P〈0.05）。GPA NO基因突变频率受放射工龄、累积剂量和3AB指数的影响作用明显,而GPA NN基因突变频率仅受放射工龄影响,与累积剂量和3AB指数的相关性不明显。结论 对于职业低剂量电离辐射受照人群,GPA NO基因突变频率可较好地反映电离辐射诱发的DNA损伤效应和个体的辐射易感性,较GPA NN基因突变频率更适宜和敏感。

ABO疑难血型鉴定1例

目的鉴定正定为“O”,反定为“A”型的自身免疫性溶血性贫血患者ABO血型。方法采用ABO正反定型、吸收放散试验、唾液血型物质测定、ABO基因分型及测序。结果患者正定为“O”型,反定为“A”型。根据吸收放散试验、唾液血型物质测定,证实患者红细胞有A抗原,唾液中含A血型物质,其母亲及儿子为A型,父亲为O型;血型血清学及家系调查可考虑患者血型为Am型;基因分型结果患者的基因型为AO,父亲、母亲和儿子的基因型分别为OO、AA、AO,患者及其儿子和母亲的A基因测序未发现基因突变。结论本例患者ABO血型为A1型,其正定型为O型,可能是疾病引起A抗原减弱所致。在临床输血实践中,出现正、反定型不符时,基因分裂及测序可提供准确的ABO定型结果。

体内基因突变试验研究进展

遗传毒性研究是新药非临床安全性评价的重要内容之一。由于遗传毒性体外细胞试验不能完全反映整体动物系统对受试物的吸收、分布、代谢和排泄等情况,而且试验结果的假阳性率过高,因此采用体外细胞试验进行药物安全性评价尚存在一定局限性。为了进一步完善对致突变风险的控制,尚需建立更加灵敏的体内基因突变试验方法。本文主要就体内基因突变试验的基本原理、优缺点及基本应用等研究进展进行综述,并对这些体内试验的发展和完善提出一些展望。

个体辐射敏感性对医用X射线工作者GPA基因突变频率的影响

目的 探讨个体辐射敏感性对GPA基因突变频率的影响及其校正方法。方法 利用彗星实验、CB微核 +3AB指数实验和多元线性回归统计分析方法 ,检测个体辐射敏感性及其对X射线工作者GPA基因突变频率剂量 效应曲线的影响 ,建立多元线性回归方程。结果 X射线工作者的辐射敏感性存在个体差异 ,个体辐射敏感性是GPA基因突变频率变异的影响因素 ;个体的辐射敏感性较高者 ,GPA基因突变频率较高 ;经个体辐射敏感性校正后GPA基因突变频率与剂量的相关性加强 ,GPAN基因突变频率的多元线性回归曲线方程 :YN=2 4 7× 10 - 6 +0 5× 10 - 6 X1 - 99 5× 10 - 6X2 +1 7× 10 - 6 X3,总相关系数r=0 6 73(P <0 0 1)。结论 用个体辐射敏感性指标校正个体差异 ,改善了GPA基因突变频率剂量 效应关系 ;多元回归方程估算的累积剂量更接近估算的物理剂量 ;减少了GPA基因突变频率估算累积剂量和预测癌患风险的不确定度。

中国汉族人群Jk(a-b-)表型遗传基础研究

目的Kidd血型抗原由JK基因编码,JK基因第838位G】A的单碱基突变决定了JK*A/JK*B多态性,使Kidd血型系统在人群中表现Jk(a+b-),Jk(a-b+)和Jk(a+b+)3种表现型。Jk(a-b-)是1罕见的稀有血型,亦称之为Jknull血型,由JK基因突变所致,本研究的目的是了解中国汉族人群Jk(a-b-)表现型的频率和遗传基础。方法通过对20万中国汉族献血者的大规模尿素筛选试验和随后的血清学抗原抗体凝集试验,鉴定出Jk(a-b-)表型个体16例。采用限制性内切酶MnlⅠ,通过RCR-RFLP分析进行JK基因初步分型,并进一步对编码JK基因的启动子和11个外显子,