使用GMA及PAS-Ⅲ2种添加液冷藏保存血小板的体外研究

目的比较2种不同添加液对4℃冷藏血小板的体外形态、活力和活化程度等指标的差异,分析特定的添加液对4℃冷藏血小板的保护作用。方法取8份单采血小板,将其一分为二,各保留35%血浆,分别添加葡萄糖甘露醇腺嘌呤血细胞保存添加液(GMA)和血小板保存添加液Ⅲ(PAS-Ⅲ)2种不同保存添加液,置4℃条件下保存,于5d后取样测定有关指标。结果在保存5d期间,GMA-PCs的低渗休克反应明显高于PAS-Ⅲ-PCs;而P-选择素的表达则显著低于后者;另外,前者IL-6的产生亦显著低于后者;2组PCs的血小板形变能力、GPⅠbα表达、乳酸生成无显著性差异。结论在4℃冷藏条件下采用血小板保存添加液替代血浆保存单采血小板,对保持血小板体外质量,GMA优于PAS-Ⅲ。

添加PAS-ⅢM液后不同机型采集的单采血小板质量对比

目的 探究对比两种不同机型的血细胞分离机采集的单采血小板添加PAS-ⅢM液后,检测体外与血小板活性有关的指标的差异。方法 将两种机型采集到的各6袋单采血小板,分离出血浆后加入PAS-ⅢM液,制备成PAS-ⅢM含量为70%的单采血小板,分别在实验的第1、5、7、9、13、14天对三组单采血小板检测血小板计数、MPV、PH值、HSR、PCO2、PO2、葡萄糖的含量。结果 比较添加PAS-ⅢM液单采血小板和未添加PAS-ⅢM液的单采血小板（对照组）,在实验的第5、7、9、13、14天,MPV、PCO2、PO2、葡萄糖含量差异有统计学意义（P〈0.05）;在实验的第13、14天血小板计数、PH值差异有统计学意义（P〈0.05）。比较两种机型采集的单采血小板制备成含量为70%的PAS-ⅢM液的单采血小板后,在实验第1-5天各项指标差异无统计学意义（P〉0.05）,从第7天开始,两种机型采集的添加PAS-ⅢM液的单采血小板的一些指标开始分化：HSR值和PO2值在第7、9、13、14天差异均有统计学意义（P〈0.05）;PCO2值在第9、13、14天差异均有统计学意义（P〈0.05）;葡萄糖含量在第7、9天差异有统计学意义（P〈0.05）。MPV在第1、5、7、9、13、14天差异无统计学意义（P〉0.05）。BCT机型采集的添加PAS-ⅢM液单采血小板与对照组在实验的第1-14天,HSR值差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 MCS＋机型采集的单采血小板与BCT机型采集的单采血小板相比,更适合添加PAS-ⅢM液,以延长单采血小板的保存期。

血小板添加液延长血小板保存期的研究

目的探讨血小板浓缩液(PC)加入血小板添加液延时贮存后的质量。方法将新鲜全血(400ml/袋)在4—6h内分离出的白膜层(BC)于22℃静置过夜,取同血型的7袋BCs汇集制备成PC后滤白,用血小板添加液(PAS-ⅢM+血浆)贮存21d,并在存储期内分时间段测定其血小板含量、红细胞和白细胞残留量、最大聚集率、CD41和CD62p阳性表达率、代谢产物和pH值等。结果血小板含量≥2.5×1011/袋,WBC残留量≤3.0×105/袋;贮存至d10,其pH值维持在7.00左右,CD62p阳性表达率45%,ADP和肾上腺素合用诱导的聚集反应率为15%—88%,凝血酶诱导的聚集反应率为89%—99%,HSR恢复率为41%—69%。10d内有可供血小板代谢需要的葡萄糖,乳酸盐浓度随着葡萄糖含量降低而升高,PO2随着PCO2降低而增加。结论加入PAS-ⅢM+血浆的PC贮存10d仍含有可供血小板正常代谢的能量物质,具有较好的聚集功能和抗低渗休克反应的能力。

采用HSR方法测定手工汇集浓缩血小板在不同保存温度下的保存效果

目的评估汇集白膜层方法制备的血小板保养液悬浮血小板在不同保存温度、不同保存期间的抗低渗休克(HSR)能力。方法用汇集白膜层(BC)方法制备的、用血小板保养液(第3代改良型血小板添加液,PAS-ⅢM)和部分血浆悬浮的汇集血小板(PAS-ⅢM汇集BC-PC),分别在22℃和4℃条件下延时保存21d(试验组),同一样本分别用蒸馏水和血浆按1∶1.5比例稀释,采用分光光度法测定不同贮存条件、不同贮存时段的PAS-ⅢM汇集BC-PC透光率。通过公式(TMAX-T10)/(TMAX-TP)×100%计算HSR恢复率。测定结果与血浆悬浮单采血小板(对照组)的HSR恢复率相比对。结果试验组和对照组第1天的测定结果没有统计学差异;试验组两种贮存条件的PAS-ⅢM汇集BC-PC每天的HSR之间没有统计学差异,但均低于对照组对应的3—7d、高于对照组对应的10—21d的测定结果;随着贮存时间的延长,试验组和对照组的HSR逐渐减弱,在1—10d内试验组和对照组的HSR恢复率在40%—70%。结论利用分光光度计测定HSR是一种简便准确的方法,PAS-ⅢM汇集BC-PC在两种贮存条件下保存10d仍具有较好的抗低渗能力。