子痫前期孕妇胎盘组织中miR-377-3p、血小板凝血酶蛋白1 mRNA表达分析

目的 观察子痫前期(PE)孕妇胎盘组织中微小RNA-377-3p(miR-377-3p)和血小板凝血酶蛋白1(THBS1)的表达变化,分析二者与PE发病的关系。方法 选择PE孕妇65例纳入PE组,其中重度PE 30例、轻度PE 35例;选择同期正常分娩孕妇40例纳入对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组孕妇胎盘组织中的miR-377-3p和THBS1 mRNA,分析miR-377-3p、THBS1 mRNA表达与PE孕妇临床病理参数的关系,采用双荧光素酶实验验证miR-377-3p对THBS1 mRNA的调控作用。结果 PE组孕妇胎盘组织中miR-377-3p表达低于对照组,且轻度患者低于重度患者(P均<0.05);PE组THBS1 mRNA表达高于对照组,且轻度患者高于重度患者(P均<0.05)。PE组胎盘组织中miR-377-3p表达与收缩压、舒张压和24 h尿蛋白呈负相关(r分别为-0.339、-0.530、-0.541,P均<0.05),与血小板计数呈正相关(r=0.439,P<0.05);THBS1 mRNA表达与收缩压、舒张压和24 h尿蛋白呈正相关(r分别为0.397、0.306、0.467,P均<0.05),与血小板计数呈负相关(r=-0.289,P<0.05)。miR-377-3p与THBS1存在潜在的互补结合位点,miR-377-3p可负向调节THBS1 mRNA表达。结论 PE孕妇胎盘组织中miR-377-3p表达下调、THBS1 mRNA表达上调,二者异常表达可能与PE严重程度及妊娠结局有关;miR-377-3p可能通过靶向调控THBS1 mRNA表达影响PE的发生发展。

血小板凝血酶蛋白1下调对肺腺癌A549细胞生物学功能的影响

目的观察血小板凝血酶蛋白1（THBS1）表达下调对肺腺癌A549细胞的细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响。 方法采用Western blot法检测肺腺癌细胞株A549、H1299、H358、H1975、PC9、PG49及Calu3中THBS1蛋白的表达水平，脂质体将THBS1小干扰RNA（siRNA）和对照siRNA分别转染至THBS1蛋白表达水平最高的A549细胞，Western blot检验转染THBS1 siRNA组、对照组和未转染组细胞中THBS1蛋白的表达，然后采用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测各组细胞的增殖，采用流式细胞术分析各组细胞的细胞凋亡及细胞周期分布。 结果不同肺腺癌细胞株中THBS1蛋白的表达水平不同，其中A549细胞（1.120±0.087）表达最高（F＝358.087，P＝0.000）。与未转染组A549细胞和对照组比较：转染THBS1 siRNA组中A549细胞中THBS1蛋白表达量（0.053±0.023）显著降低（P＝0.000），细胞增殖能力减弱（P＝0.000），细胞的凋亡率[转染THBS1 siRNA组早期、中晚期及总凋亡率分别为（17.00±1.33）%、（3.70±0.56）%和（20.71±0.78）%升高（F值分别为115.899、14.418和167.329，P值分别为0.000、0.005和0.000]，G0/G1期细胞百分比（68.43±2.26）%显著升高（F＝46.521，P＝0.000），S期细胞百分比（22.33±2.15）%降低（F＝16.621，P＝0.004），G2/M期细胞百分比（9.23±2.35）%降低（F＝9.282，P＝0.015），以上差异均有统计学意义。 结论沉默THBS1基因，降低肺腺癌A549细胞中THBS1蛋白表达可以减弱细胞的增殖能力，促进细胞凋亡并抑制细胞周期进程。

血小板凝血酶致敏蛋白-1与肾间质纤维化

不论何种病因,终末期肾病是以进行性肾小球硬化和间质纤维化为特征的.导致肾脏硬化的致病因素有很多,其中包括炎性细胞浸润、血管活性介质、细胞因子、细胞外基质蛋白和蛋白酶的作用以及细胞凋亡等.

肝内胆管癌组织中CircACTN4 mRNA和THBS1mRNA的表达与临床病理特征及预后的关系研究

目的研究肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)中环状核糖核酸辅肌动蛋白α4(CircRNAsActininα4,Circ ACTN4)和血小板凝血酶蛋白1(platelet thrombin protein 1,THBS1)mRNA表达与临床病理特征和预后的关系,为临床诊治提供参考。方法回顾性分析2017年5月~2020年6月西安交通大学第二附属医院诊治的84例ICC患者;采用实时荧光定量PCR及免疫组织化学检测组织中CircACTN4 mRNA,THBS1 mRNA和蛋白表达。Pearson相关分析ICC癌组织中CircACTN4 mRNA与THBS1 mRNA的相关性。Kaplan-Meier法(Log-rank检验)比较不同CircACTN4mRNA,THBS1 mRNA表达ICC患者预后差异。COX回归分析ICC患者预后影响因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析CircACTN4 mRNA,THBS1 mRNA对ICC患者死亡预后的评估价值。结果ICC癌组织中CircACTN4 mRNA(3.14±0.42)表达高于癌旁组织(0.76±0.25),差异具有统计学意义(t=44.094,P<0.001);ICC癌组织中THBS1 mRNA(2.82±0.36)和蛋白阳性率(92.86%)均高于癌旁组织(0.81±0.24,7.14%),差异具有统计学意义(t/χ2=42.068,123.429,均P<0.001)。ICC癌组织中CircACTN4 mRNA与THBS1 mRNA表达呈正相关(r=0.669,P<0.001)。TNM分期Ⅲ期、低分化程度及有淋巴结转移ICC癌组织中CircACTN4 mRNA,THBS1 mRNA表达高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、高中分化程度及无淋巴结转移癌组织,差异具有统计学意义(χ2=7.949,9.164,12.207;23.270,18.625,19.828,均P<0.001)。CircACTN4 mRNA高表达组、THBS1 mRNA高表达组三年累积生存率分别低于CircACTN4 mRNA低表达组(25.00%vs 56.82%)和THBS1mRNA低表达组(19.51%vs 62.79%),差异具有统计学意义(Log rankχ2=13.601,24.310,均P<0.001)。CircACTN4mRNA(OR=1.839,95%CI:1.228~2.753)、THBS1 mRNA(OR=1.744,95%CI:1.245~2.443)、淋巴结转移(OR=1.925,95%CI:1.316~2.816)、TNM分期(OR=1.613,95%CI:1.223~2.126)及肿瘤分化程度(OR=1.510,95%CI:1.205~1.892)是影响ICC预后的独立因素(均P<0.01)。CircACTN4 mRNA,THBS1 mRNA联合检测对ICC患者死亡预后的评估曲线下面积为0.868,大于单项指标检测0.812,0.784,差异具有统计学意义(Z=3.348,3.847,均P<0.001)。结论ICC中CircACTN4 mRNA和THBS1 mRNA表达升高,两者与TNM分期、分化程度及淋巴结转移相关,是新的评估ICC患者不良预后的肿瘤标志物。

喉癌内皮细胞THBS1的表达与临床意义

目的探讨喉癌肿瘤微环境中内皮细胞异质性及生物学功能,分析内皮细胞中高表达基因血小板凝血酶蛋白1(THBS1)与肿瘤进展和预后的关系。方法对2019至2021年在宁波市医疗中心李惠利医院接受手术治疗的3例喉癌患者的肿瘤组织、配对的癌旁组织、转移淋巴结以及2例无淋巴结转移喉癌患者的肿瘤组织进行单细胞转录组分析,通过主成分分析、t-分布领域嵌入算法(t-SNE)、统一流行逼近与投影(UMAP)、基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析探讨肿瘤微环境中内皮细胞亚群及其功能,结合癌症基因组图谱(TCGA)数据库中123例样本筛选内皮细胞中可能影响肿瘤进展的高表达基因,并用免疫组化验证。结果经过多重质控共获得45207个单细胞,聚类分析显示喉癌肿瘤微环境主要由上皮细胞、内皮细胞、单核细胞、T细胞、B细胞、自然杀伤性T细胞、肥大细胞、树突状细胞、巨噬细胞、成纤维细胞这10大类细胞构成,其中内皮细胞可被分为4个亚群,以血管内皮生长因子受体1(FLT1)为标志基因的血管内皮细胞(vECs-FLT1)、特异高表达非典型趋化因子受体1(ACKR1)的血管内皮细胞(vECs-ACKR1)、显著高表达G蛋白信号转导调节蛋白5(RGS5)的血管内皮细胞(vECsRGS5)以及高表达CC类趋化因子配体21(CCL-21)的淋巴管内皮细胞(lECs-CCL21),其中vECs-FLT1占据数量优势。经GO分析发现vECs-FLT1与调节血管新生、血管生成密切相关,KEGG结果主要富集于“磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路”、“局部黏附”及“HPV病毒感染”等。生存分析显示vECs-FLT1中高表达的THBS1基因与不良预后相关。免疫组化证实肿瘤组织中存在高表达FLT1的血管内皮细胞,且THBS1在肿瘤血管中阳性表达。结论单细胞转录组测序可用于描绘肿瘤微环境中内皮细胞的异质性及功能多样性,其中v ECs-FLT1在肿瘤进展中起到一定作用,THBS1表达水平可能影响患者生存期,可用于鉴定肿瘤内皮细胞。

结肠癌组织THBS1表达与临床病理特征及远期生存的关系

目的 探讨结肠癌组织血小板凝血酶蛋白1(THBS1)表达与临床病理特征、远期生存的关系。方法 选取2018年5月—2019年4月广东医科大学附属惠东县人民医院消化科收治的行根治性手术治疗的结肠癌患者108例,收集手术切除的结肠癌组织及癌旁正常组织。采用免疫组化法检测结肠癌组织及癌旁正常组织中THBS1表达情况,并对比不同临床病理特征患者结肠癌组织THBS1表达。术后随访3年,根据患者的生存情况将其分为死亡组和生存组,采用Kaplan-Meier曲线和Log-rank检验分析结肠癌组织THBS1不同表达患者生存情况,另采用Cox回归分析法分析结肠癌组织THBS1表达与远期生存的关系。结果 THBS1在结肠癌组织阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、大体分型的结肠癌患者的癌组织THBS1阳性表达率无差异(P>0.05),TNM分期Ⅲ期、低分化、肿瘤浸润至肌层及脏层腹膜患者癌组织THBS1阳性表达率高于TNM分期Ⅰ/Ⅱ期、中/高分化、肿瘤浸润至黏膜及黏膜下层患者(P<0.05);结肠癌患者术后3年生存率为79.63%,经Log-rank检验,结肠癌THBS1阳性表达患者3年生存率低于阴性表达患者(P<0.05);年龄>60岁、TNM分期Ⅲ期、低分化、肿瘤浸润至肌层及脏层腹膜以及结肠癌组织THBS1阳性表达均是结肠癌患者远期生存的危险因素(P<0.05)。结论 THBS1在结肠癌组织中呈高表达,与TNM分期、组织分化程度、浸润深度等临床病理特征有关,且均为结肠癌患者根治术后远期生存的影响因素。

结肠癌组织中WWOX、THBS1、FOXO1的表达变化及意义

目的探讨结肠癌组织中氧化还原酶的WW域抗原(WWOX)、血小板凝血酶蛋白1(THBS1)、叉头框蛋白O1(FOXO1)的表达变化及临床意义。方法选择结肠癌患者76例,术中取癌组织及其癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm)。用荧光定量PCR法检测组织中WWOX、THBS1、FOXO1 mRNA表达,用Western blotting法检测组织中WWOX、THBS1、FOXO1蛋白表达,分析癌组织中WWOX、THBS1、FOXO1 mRNA表达与患者临床病理特征的关系,用Pearson线性相关分析癌组织中WWOX、THBS1及FOXO1 mRNA表达的相关性。结果与癌旁正常组织比较,癌组织中WWOX、FOXO1 mRNA及蛋白相对表达量均低(P均<0.05),THBS1 mRNA及蛋白相对表达量均高(P均<0.05)。癌组织中WWOX、THBS1、FOXO1 mRNA表达与肿瘤分期有关(P均<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤直径、组织分化程度、淋巴结转移无关(P均>0.05)。癌组织中WWOX与THBS1 mRNA表达呈负相关(r=-0.612,P=0.000),与FOXO1 mRNA表达呈正相关(r=0.582,P=0.000);癌组织中THBS1与FOXO1 mRNA表达无相关性(r=0.213,P=0.452)。结论结肠癌组织中WWOX、FOXO1低表达,而THBS1高表达;三者表达变化均与肿瘤分期有关。

THBS1在肿瘤中作用的研究进展

近年来,在多种类型的肿瘤中均发现了血小板凝血酶蛋白-1(thrombospondin-1,THBS1)的异常表达,其是近年来肿瘤领域研究的热门靶点基因。THBS1作为一种多功能蛋白,在肿瘤中的作用较为复杂,对肿瘤的影响机制尚不完全明确,功能及调控机制有待进一步深入研究。现对THBS1在肿瘤中作用的研究进展作一综述,以期为肿瘤的临床研究提供参考。

子痫前期孕妇子宫动脉SD、THBS1与凝血功能障碍的相关性

目的通过测定子痫前期孕妇子宫动脉收缩期峰值流速/舒张末期流速(SD)、血小板凝血酶蛋白1(THBS1)、凝血指标变化,探究其相关性,为子痫前期的治疗提供一定的帮助。方法随机选取2020年3月1日—2022年5月31日舟山市妇女儿童医院产科诊治的60例子痫前期孕产妇作为研究对象,根据病情严重程度分为轻度组(25例)及重度组(35例),选取健康孕产妇60例为对照组。检测子宫动脉SD、THBS1及凝血功能指标水平,分析子宫动脉SD、THBS1与凝血功能间的关系及患者凝血功能障碍的影响因素。结果随着病情的加重,患者SD、D-二聚体(D-D)水平明显升高,THBS1水平明显降低,凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)明显缩短(均P<0.05)。Pearson分析显示,SD与PT(r=-0.627,P=0.014)、TT(r=-0.412,P=0.023)呈负相关关系,与D-D(r=0.556,P=0.030)呈正相关关系;THBS1与PT(r=0.833,P=0.001)、TT(r=0.680,P=0.008)呈正相关关系,与D-D(r=-0.324,P=0.037)呈负相关关系。Logistic分析显示,SD升高及D-D升高为子痫前期患者发生凝血功能障碍的独立危险因素,THBS1升高、PT延长、TT延长为独立保护因素(均P<0.05)。结论子痫前期孕妇存在子宫动脉SD、THBS1及凝血功能异常,且上述指标间存在相关关系,有望成为评估患者凝血功能障碍的指标。